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1、氧化型低密度脂蛋白对骨髓内皮前体细胞增殖、凋亡及NO分泌功能的影响作者：宗小娟，王海昌，周祥，程康【关键词】内皮祖细胞Effectofoxidizedlowdensitylipoproteinonproliferation,apoptosis,andNOsecretingfunctionofendothelialprogenitorcellsfrombonemarrow【Abstract】AIM:Tostudytheeffectofoxidizedlowdensitylipoprotein(oxLDL)onthepr
2、oliferation,apoptosis,andNOsecretingfunctionofendothelialprogenitorcells(EPCs).METHODS:BonemarrowderivedEPCswereisolatedfrombonemarrowbloodofswinebydensitygradientcentrifugation,thenoxLDLofdifferentconcentrations(groupB,5mg/L;groupC,10mg/L;groupD,20mg/L)wereadd
3、edintoculturemediumtodetecttheeffectofoxLDLonEPCs.MTTassaywasusedtodetecttheeffectofoxLDLonthemultiplicationabilityofEPCs.FlowcytometrywasusedtodetecttheapoptosiscausedbyoxLDL.ThenNOcontentwasmeasuredinthecellculturemedium11/11bynitratereductasemethodtofindthei
4、njuryofoxLDLoncellsandcellfunctions.RESULTS:Comparedwiththatinthecontrolgroup,oxLDLinhibitedtheproliferationofEPCs（groupB,±;groupC,±;groupD,±）（n=8）,promotedtheapoptosisofEPCs（groupB,±;groupC,±;groupD,±）（n=6）,anddamagedtheNOsecretingfunctionofEPCs.Theseeffectswe
5、reintensifiedwiththeincreasingconcentrationofoxLDL(P【Keywords】endothelialprogenitorcells;lipoproteins,LDL;nitricoxide【摘要】目的：探讨氧化低密度脂蛋白（oxLDL）对骨髓内皮前体细胞（EPCs）增殖、凋亡及一氧化氮(NO)分泌功能的影响.方法：密度梯度离心法获得猪的骨髓EPCs，不同浓度oxLDL(B组5mg/L，C组10mg/L，D组20mg/L）作用于EPCs，MTT法检测oxLDL对EPCs增殖
6、能力的影响，流式细胞仪检测oxLDL对细胞的凋亡率的影响，硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO含量的变化，观察oxLDL对细胞及其功能的影响.结果：与对照组相比，oxLDL抑制EPCs增殖（B组±，C组±，D组±）（n=8)，促进EPCs的凋亡（B组±，C组±，D组±）（n=6），损伤细胞的分泌功能，作用随oxLDL浓度增大而增强(P 0引言11/11成体动物及人的外周血、骨髓中存在有内皮前体细胞（EPCs），它们是以CD133,flk1,CD31,Ⅷ因子［1-2］为标志的一群细胞，可以迁移、增殖并分化为成熟的内皮细胞
7、，促进内皮的修复及出生后新生血管化的形成［3］.新生血管化的形成可以改善心肌供血,并且阻止心肌梗塞区域疤痕组织的进一步形成［4］，从而改善心脏功能.大量的研究已经证实，骨髓来源的EPCs有诱导缺血组织新生血管形成的潜力.相反,高脂血症损伤新生血管和供应缺血区组织血运的侧支血管的形成.氧化低密度脂蛋白(oxLDL)在动脉粥样硬化的形成过程中起着重要的作用，我们研究oxLDL是否影响内皮前体细胞的增殖、凋亡及细胞功能，从而间接了解oxLDL对新生血管化的形成有何影响.1材料和方法材料雄性中国小型猪2只，体质量（40±5）
8、kg，由我校实验动物中心提供；PBS,Ficoll淋巴细胞分离液，胎牛血清（Gibco，美国），DMEM（Gibco，美国），VEGF及bFGF（AustraliaTBDScience，澳大利亚），10万U青霉素和100mg/L链霉素，小鼠flk1、山羊属CD133（SantaCruz，美国）、鼠CD31,FITC羊抗小鼠（IgG）、FITC羊
