大黄素对大鼠移植肝细胞凋亡的作用.doc

《大黄素对大鼠移植肝细胞凋亡的作用.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大黄素对大鼠移植肝细胞凋亡的作用【摘要】目的探讨大黄素对大鼠肝脏移植术后肝细胞凋亡的作用。方法建立大鼠肝移植模型，分为三组：对照组，供受体均为LEW大鼠；移植组；供体为LEW大鼠，受体为BN大鼠；大黄素组，在移植组基础上，移植术后每日以大黄素50mg·kg-1腹腔注射。分别于术后第1，3，5，7天各取6只移植大鼠的肝脏，TUNEL法染色，检测肝脏细胞凋亡。以肝脏细胞凋亡阳性细胞数占总肝脏细胞数的百分比作为肝细胞凋亡指数(AI)。结果移植组肝细胞于术后第1天即已出现凋亡，第3天明显增加，第7天达到高峰。大黄素组各时间点肝细胞凋亡指数明显小于对应的移植组(P

2、<0.01)。结论大黄素对肝移植急性排斥反应中肝细胞凋亡有显著抑制作用。【关键词】大黄素肝移植移植物排斥细胞凋亡大鼠AbstractObjectiveToevaluatetheeffectofEmodinonhepatocellularapoptosisfollowingorthotopiclivertransplantationinrats.MethodsThemodeloforthotopiclivertransplantationinratswassetup.Theratswererandomlydividedintothreegroups.

3、Incontrolgroup，thedonorsandreceptorwereLEWrats；intransplantgroup，thedonorswereLEWratsandthereceptorwereallBNrats；inEmodingroup，ratsweretreatedwithsameagentasthoseintransplantgroupdone，exceptthattheywerefedwithadditionalEmodinafterlivertransplantation.Onthe1st，3rd，5thand7thdayafte

4、rtransplantation，apoptosisindexwasevaluatedbythepercentageoflivercellswithTUNELpositivestaining.ResultsTheapoptoticlivercellsappearedonthe1stdayandsignificantlyincreasedatthe3rdday，whiletheapoptoticpeakreachedonthe7thdayaftertransplantationintransplantgroup.Apoptosisindicesoflive

5、rcellsinEmodingroupweresignificantlylowerthanthoseintransplantgroup(P<0.01).ConclusionEmodincaninhibithepatocellularapoptosisinratlivertransplantation.KeywordsEmodin；livertransplantation；graftrejection；apoptosis；rats大黄素是中药大黄的有效成分，先前的实验研究表明，它能延长非同系大鼠原位肝移植的术后存活时间，能明显降低移植肝的排斥活动指数

6、[1]。也有研究表明，移植肝排斥反应和细胞凋亡具有密切的相关性，抗排斥反应药物能有效地降低移植肝的细胞凋亡[2-3]。本实验采用近交系大鼠原位肝移植模型，探讨大黄素对肝移植急性排斥反应中肝细胞凋亡的影响。1材料和方法1.1药物和试剂3大黄素粉剂购自西安华萃公司，原位细胞凋亡检测(TUNEL检测)试剂盒及相关的染色试剂购自福建迈新公司。1.2实验动物和分组实验大鼠购自北京动物实验中心。其中近交系Lewis(简称LEW)大鼠48只，近交系BrownNorway(简称BN)大鼠24只。质量220~280g，均为雄性。将动物随机分为3组：?譹?訛对照组，供、受体

7、各12只LEW大鼠；?譺?訛移植组，供、受体各12只，供体为LEW大鼠，受体为BN大鼠；?譻?訛大黄素组，在移植组基础上，肝脏移植术后每天以大黄素50mg·kg-1腹腔注射。1.3指标检测和方法　分别于移植术后第1，3，5，7天各取6只移植大鼠肝脏，切取部分肝脏组织，用10%的中性福尔马林固定，常规制作蜡块。切片行原位末端标记(TUNEL)法染色，检测肝细胞凋亡情况。以肝细胞凋亡阳性细胞数占总肝细胞数的百分比作为肝细胞凋亡指数(AI)。1.4统计学方法　所得计量数据以均数±标准差(x±s)表示，应用SPSS12.0软件行t检验。2结果移植组肝细胞术后第1

8、天即已出现凋亡，第3天明显增加，第7天达到高峰。与对照组相比，各时间点均有显著差