热激蛋白基因克隆

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1、编码：河西学院大学生科技创新申报书项目类别自然科学类项目名称热激蛋白基因（HmHSP70）克隆项目负责人曹新文项目合作者秦海红、段东东、冯兴华、姚晓琴学院、班级 农业与生物技术学院生物科学101班负责人联系方式18719578225指导教师梁倩倩起止年限2013年1月—2013年12月申报日期2012年11月20日结项日期2013年12月30日是否重点项目资助金额（大写）共青团河西学院委员会制二〇一二年十一月五日locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejia

2、ng,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame11申报者情况（集体项目）申报者情况姓名曹新文性别男出生年月1991-6-7学院班级农生院生科101现学历本科专业生物科学年级10级学制四作品全称热激蛋白基因（HmHSP70）克隆通讯地址农业与生物技术学院生物科学101邮政编码734000移动电话18719578225合作者情况姓名性别学历所在学院班级联系方式段东东男本科农生院生科10115393610972冯兴华

3、男本科农生院生科10118993616490姚晓琴女本科农生院生科10118093615662秦海红女本科农生院生科10115309469369资格认定教学学院意见作者是否为2012年9月1日前正式注册在校学生。□是□否若是，其学号为：部门盖章：年月日指导教师意见本作品是否为学生自已的真实作品。□是□否指导教师签名：年月日一、立项依据locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(Wuzhensaidi

4、nformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame11包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处。研究意义：高温常常限制作物、蔬菜、食用菌等的生长和推广，获得温度耐受性强的转基因新品种，解除温度限制，将大大降低推广栽培的成本，热激蛋白（HSPs），又称热休克蛋白，是细胞或生物体在一定时间（几小时、几分钟、甚至几秒钟）内遭受高于其正常生长温度8～12℃以上的温度时，新合成的或含量增高的一类在生物进化中最保守并由热激基因所编码的伴随细胞蛋白，因此又被称为“分子伴侣”。作为“分子

5、伴侣”，HSPs可以与正在合成的多肽结合，使其正确折叠，能够引导新生肽穿过细胞器膜结构，使蛋白定位于细胞的不同部位；在高温胁迫下，可以阻止热变性蛋白的聚集或阻止不可逆蛋白变性，对蛋白质在高温胁迫变性之后的复性也有一定作用，因此，热激蛋白在生物抗高温中的作用不言而喻。Edwards等研究发现，许多细胞的耐热能力取决于细胞内热激蛋白70（HSP70）的合成，HSP70为HSP中最保守、最重要的一族，其在大多数生物中含量最多，在应激反应中最为敏感，因此成为HSP中最受关注、研究最深入的一种。目前，人们对植物和动物体内热激蛋白已有较深刻的认识，但关于微生物热激蛋白却鲜有报道。因此本研究拟采用P

6、T-PCR技术克隆荷叶离褶伞HSP70全长基因，构建克隆载体，为真菌热激蛋白研究及真菌的分子育种奠定良好的基础；为下步的分子育种工作构建耐高温食用菌菌株做基础——使食用菌过量表达热激蛋白70基因，提高食用菌的耐受性，应对生产过程中气温的突然变化，解除温度对食用菌栽培生产的限制，为获得较高的生物学效率奠定了基础。本研究预期目标若能实现，对建立食用菌基因工程研究平台具有较好的现实意义，我们将为我国食用菌行业增添一个新的珍稀品种，为甘肃食用菌产业的发展培育出一个新的增长点和新的支撑点，产生显著经济效益。国内外现状研究分析：热激蛋白(heatshockprotein,HSP)是一类能对外界环境

7、刺激做出应答反应并能有效提高生物体对恶劣环境适应能力分子伴侣类型的应激蛋白。首次克隆的热激蛋白是从热激果蝇幼虫唾液腺中分离获得(Tissereetal.,1974)。根据分子量的不同，可将热激蛋白分为6个家族，即HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、分子植物育种MolecularPlantBreeding小分子sHSP和泛素(Carperetal.,1987)。研究发现属于分子伴侣类型的蛋白家族能够在环境胁迫时防止未折叠蛋白变性和促