杧果低分子量热激蛋白基因mihsp17.6的克隆及表达分析

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1、园艺学报，（）：–2014411223832392http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com收稿日期：2014–08–19；修回日期：2014–11–14基金项目：广西自然科学基金项目（2013GXNSFDA019011，2014GXNSFBA118102）；广西高校科研项目（YB2014009）；广西大学科研基金项目（XBZ120766）*共同第一作者M杧果低分子量热激蛋白基因iHSP17.6的克隆及表达分析CANVanToan1,3,*，罗聪1,*，董龙1，刘召亮1，何新华1,

2、2,**（1广西大学农学院，南宁530004；2广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁530007；3北江农林大学林业系，越南北江）摘要：采用RT-PCR与RACE相结合的方法获得了杧果低分子量热激蛋白基因的cDNA全长序列，命名为MiHSP17.6，GenBank登录号为KJ459857。序列分析显示，该基因序列全长为680bp，其中开放阅读框为462bp，编码154个氨基酸，5′非编码区和3′非编码区长度分别为80bp和135bp。杧果MiHSP17.6与其他物种的低分子量热激蛋白同源性介于74%~82%。实时荧光定量分析表明，MiHSP17.6在‘四季杧’不同组织器

3、官中均表达，在果实发育的中期表达水平持续上升。高温（44℃）、低温（4℃）、盐（NaCl）、聚乙二醇（PEG）、脱落酸（ABA）、双氧水（H2O2）和水杨酸（SA）处理均诱导该基因表达，因此推测MiHSP17.6的功能可能与杧果果实发育和抵御逆境胁迫相关。关键词：杧果；MiHSP17.6；克隆；表达分析中图分类号：S667.7文献标志码：A文章编号：0513-353X（2014）12-2383-10CloningandExpressionAnalysisofaSmallHeatShockProteinGene（MiHSP17.6）fromMangiferaindicaCANVa

4、nToan1,3,*，LUOCong1,*，DONGLong1，LIUZhao-liang1，andHEXin-hua1,2,**（1AgriculturalCollege，GuangxiUniversity，Nanning530004，China；2GuangxiCropGeneticImprovementandBiotechnologyLaboratory，Nanning530007，China；3BacgiangAgriculturalandForestryUniversity，Bacgiang，Vietnam）Abstract：Thefulllengthsequence

5、ofcDNA，smallheatshockprotein17.6geneofmangowasclonedbyRT-PCRandRACEmethod，whichwasnamedMiHSP17.6withtheGenBankaccessionnumberofKJ459857.Theresultsshowedthatthefull-lengthsequenceofMiHSP17.6is680bpandtheopenreadingframeis462bp，whichencodingapolypeptideof154aminoacids.Theuntranslatedregion（UTR

6、）5′and3′withthelengthof80bpand135bp，respectively.ComparisonoftheaminoacidssequencesofhomologousHSPproteinsfromotherspeciesindicatedthatMiHSP17.6hasarangeof74%to82%identity.Thereal-timequantitativePCRresultsshowedthatMiHSP17.6wasexpressedinalltestedorgans.AndwealsofoundthatMiHSP17.6wasregulat

7、edbyseveraltreatments，suchashightemperature（44℃），lowtemperature（4℃），salt（NaCl），polyethyleneglycol（PEG），abscisicacid（ABA），hydrogen**通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：honest66222@163.com；Tel：15177169189）2384园艺学报41卷peroxide（H2O2）andsalicylicacid（SA）t