基于hplc分析南烛叶中乌饭成分的方法研究可

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1、基于HPLC分析南烛叶中乌饭成分的方法研究可行性报告及项目经费概算一、项目可行性报告（一）立项的背景和意义南烛树又称乌饭树（VacciniumbracteatumThunb），为杜鹃花科植物，是常绿灌木，主要长在山坡林内和灌木从中，在其群落中为优势树种。在我国分布极广，主要产于江苏、浙江一带，产量可观[1]。江浙一带民间有用南烛树叶渍米做乌饭的习俗。据《本草纲目》记载：“南烛树叶气味甘平、无毒、止泻除睡、强筋益气力。久服轻身长年、令人不饥、变白却老、填胃补髓、消灭三虫。取南烛茎叶捣碎，渍汁浸粳米，九渍九蒸九曝，米粒紧小如翳珠，袋盛，可以适远方也。”从现

2、代观点来看，南烛叶中的天然有效成分具有强身健体、减肥养颜、延年益寿的功效。由于南烛树叶具有特殊的特性和口味，良好的抑菌防腐作用，可以作为天然色素和防腐剂。而市场对新奇品种的需求逐渐旺盛，开发野生乌饭树具有十分重要的现实意义。无论从药用、日用化工角度，还是从食品添加剂角度开发乌饭树系列产品都具有广阔的应用前景，并能产生较大的社会和经济效益。但由于南烛叶作为原材料存在地域性和季节性的限制，以及国内外南烛叶中乌饭成分相关研究的缺乏，不适应现代人的生活节奏，南烛叶相关产品一直未能进入现代食品或者中药材市场，尚属于未开发的植物资源，关于南烛叶的研究还处于起步阶段

3、。关于南烛叶乌饭机理有诸多推测，有认为是花青苷引起的，也有认为是槲皮素引起的。本项目申请者由于偶然机会发现，南烛叶冷冻后再放于室温下，在有水的条件下由绿色变为红色，而无水的条件下变成褐色，发生变色后的南烛叶不能和米饭共煮发生乌饭现象，说明南烛叶中乌饭成分对温度和水分的存在比较敏感。后又经实验发现不同产地的乌饭叶乌饭效果相差较大，乌饭叶提取物在没有米存在的情况下单独加热并未发生变色反应，而含槲皮素的鱼腥草、荷叶等植物也并不能有乌饭现象的发生。因此，现有的研究并不能确定出南烛叶中的乌饭成分，也不能说明南烛叶的乌饭机理。迄今为止对于乌饭叶的着色机理11尚未有

4、一个较为统一的意见。如果开发南烛叶系列产品，必须对南烛叶乌饭成分的结构与理化性质进行进一步研究，对乌饭成分的分析检测方法进行探索，从而为制定南烛叶系列产品质量标准提供技术支持。本项目拟通过研究不同产地南烛叶中的成分差异，从南烛叶中提取出不同的组分，将不同的组分与米饭进行共煮，以期寻找出南烛叶中能够乌饭的成分，建立南烛叶乌饭成分的HPLC分析方法。并利用高效液相制备色谱技术分离制备出乌饭成分高纯品，采用UV、HPLC-MS、NMR等技术对该成分进行鉴定。并通过研究有机溶剂、温度、时间、pH值、氧、金属离子、水分等对乌饭成分乌饭效果的影响来探索乌饭成分的理

5、化性质。为开发系列具有自主知识产权天然乌发剂和食品防腐剂等南烛叶系列产品提供理论依据和技术基础。（二）国内外研究现状和发展趋势根据本草记载乌饭叶能够益精气、强筋骨、明目、益肠胃、补骨髓[2]。现代研究亦表明乌饭树叶含有花青素、无羁萜、表无羁萜醇、β-谷甾醇、熊果酸、蓝黑色素、异荭草素、对羟基桂皮酸、内消旋肌醇、α-亚麻酸、乌索酸、齐墩果酸、三十一烷、鞣质等，还含有多种微量元素，其中Fe、Mn、Zn等的含量相对较高[3-5]。有报道指出乌饭叶具有促进视红素再合成、Vp样机能、改善血液微循环、抗溃疡、抗炎症、抗衰老、止泄、抗菌等多种生理活性[6-8]。乌饭

6、叶浸出汁和米饭共煮做成的乌米饭，具有驱虫效果，并且可以放置多日不馊不变质。因此乌饭叶是一种良好的药食同源植物资源。但迄今为止，由于国内外对于南烛叶的研究尚未引起足够重视，属于未开发的植物资源，因此关于南烛叶的研究还处于起步阶段，目前关于南烛叶相关报道较少，仅有的少量报道主要集中于南烛叶中的有效成分提取的研究和有效成分药效的研究两个方面，而对于乌饭叶中乌饭成分的分离纯化、乌饭成分分析方法的建立以及乌饭机理的探讨尚处于空白状态。关于乌饭叶有效成分药效的研究报道主要集中于抗疲劳、提高免疫力、保护视网膜、抗炎抗过敏和抗病毒等方面。James等[9]报道乌饭树嫩

7、叶的醇提取物具有抗疲劳和耐寒作用，乌饭树提取物具有增强记忆和提高动作协调能力的功能。闫赋琴等[10]研究表明乌饭树提取物能够减轻大鼠氧化应激损伤，提高应激刺激大鼠脑组织中的SOD值。王立等[11]研究通过11体外实验表明乌饭树提取物具有抑制癌细胞生长和清除氧自由基的作用。张雪彤等[12]的研究发现乌饭树叶及其提取液能明显提高视网膜功能，对视网膜具有明显的保护作用。黄丽娜等[13]研究发现乌饭叶醇提物能够对睡眠剥夺大鼠所致的精神疲劳有一定的改善作用，可以提高精神疲劳大鼠的自发活动度与认知能力，并通过改变脑干内的单胺类递质的含量发挥作用。章海燕等[14]采

8、用二倍稀释法和管碟法对乌饭树树叶提取物进行体外抑菌实验，研究表明乌饭树叶提取无对霉菌和酵母菌的