人参叶的hplc指纹图谱研究

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1、人参叶的HPLC指纹图谱研究成之福’,李维娜,王毅华(日照市人民医院,山东日照276800)〔摘要」目的:应用HPLC进行不同产地人参叶指纹图谱研究。方法:采用Cl:柱,乙睛一四氢吠喃一磷酸一水梯度洗脱,流速1.omL.min一’,检测波长203nm。结果:通过色谱图相似度比较,各样品之间有一定的差异性。结论:本实验方法对人参叶中各成分能进行很好的分离,可以作为人参叶药材定性和半定量鉴定依据。[关键词〕人参叶;指纹图谱;人参皂昔;HPLC;梯度洗脱法人参叶为五加科植物人参panaxginseng2方法C.A.Mey.的干燥叶。现为《中国药典》收载品2.1色谱分析条件种

2、。人参茎叶与人参根具有相似的药理作用,而且色谱柱:Discove叮C18(5林m,4.6mmx人参茎叶总皂昔的含量显著高于人参根[’〕。目前以250mm),2%THF一0.05%磷酸一水一乙睛梯度洗人参叶为原料药材提取总皂昔应用逐渐增多,为了脱,流速1,omL·min一’,柱温40℃,检测波长更有效地控制其内在质量,从而保证制剂质量的稳203nm,所有的组分80min内检测完。定,用HPLC建立了人参叶药材指纹图谱的分析方2.2供试品溶液制备法,并对多个产地的人参叶进行了指纹图谱研究,取干燥人参叶,粉碎(过3号筛),精密称取为资源的合理应用和质量控制提供依据。0.59

3、,置锥形瓶中,精密加甲醇50mL,密塞,称1仪器和试药定重量,超声处理lh,放冷,用甲醇补足减失的重Asilentlloo液相色谱仪,VWD检测器,安捷量,滤过,精密量取续滤液25mL,置烧瓶中,减伦Chemstation工作站;乙睛为色谱纯(美国及dia压蒸干,残渣加流动相4mL使溶解,并定量转移至公司),四氢吠喃(THF)为色谱纯(天津四友生smL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,用微孔物科技公司),磷酸为分析纯(沈阳化学试剂厂);滤膜(0.45林m)滤过,取续滤液作为供试品溶液。人参皂昔Rg,(中国药品生物制品检定所)。人参2.3对照品溶液制备叶来源及采收时间,

4、见表1。精密称取人参皂昔Rg,对照品适量,加流动相表1不同产地人参叶药材制成每lmL含1.Omg的溶液,即得。编号样品来源采收时间2.4方法学考察辉南县10月2.4.1精密度和稳定性试验精密吸取供试品溶液抚松县10月20林L,注入液相色谱仪,记录色谱图。连续进样6抚松县11月次,然后每间隔一定的时间进样一次(由于该样品靖宇县10月的分析时间较长,所以兼作稳定性考察)。以人参通化10月皂昔Rgl峰为参照峰,比较各共有峰的相对保留时通化10月间和主要共有峰的峰面积比值,考察仪器的精密度辉南县10月和方法的稳定性。结果各色谱峰的相对保留时间和长白县9月单峰面积大于或等于10

5、%总峰面积的色谱峰峰面积集安市9月的比值没有明显的变化(RSD<3%),供试品溶液集安市10月在24h内比较稳定,仪器的精密度良好,满足指纹[通讯作者]‘成之福,Tel:(0633)3365350。22NO.62007图谱的要求。2.5人参叶药材ErLC指纹图谱中的特征峰及指纹2.4.2重现性试验分别精密吸取供试品溶液图谱的确立20匹,注人液相色谱仪,记录色谱图。以人参皂分别精密吸取供试液各20卜L,注人液相色谱昔Rg,峰为参照峰,比较共有峰的相对保留时间仪,记录80min色谱图。用国家药典委员会发布的和主要共有峰的峰面积比值,判断方法的重现性。“中药色谱指纹图谱相似

6、度评价系统(2004A版)”结果各色谱峰的相对保留时间和单峰面积大于或对数据进行分析,提取共有峰并生成标准图谱。借等于10%总峰面积的色谱峰峰面积的比值没有明助软件对10批供试品的检测结果进行处理,最终显的变化(RSD<3%),说明方法具有良好的重确定17个共有峰,其特征数据见表2,生成的图谱现性。见图1。表210批人参叶药材的指纹图谱测定结果.9次1234310平均值RSD/%精号、-11-一-1-.l.1llSlllll,01、n1Q︸.9‘0巧IJ入1lURRTI1.0571.0571.0581058︸1.0581.0581.9011.9120.05J.(,1)

7、1g巧j.9‘01了111.9131U1.90119120.30RRTZ19161.9191.9201.9101.911,久1勺只,,j82,376‘‘‘2.3730.45RRT32.3822.3872.3862.368~︸2.3682.3702.360,Q962.8932.8992.8742.8752.8742.876︸O2.8752.8662.883045RRT42.902内O73‘0.45RRrfs2.96929792.9752,950295029502.952砂2.9502‘9422.959内、0内J︸、内﹂0292.9963.0150.48

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