答案--3.细胞生物学的研究方法

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1、第三章细胞生物学的研究方法一、填空题1.透射电子显微镜由、、三部分所组成。镜筒真空系统电力系统2.在酵母人工染色体制备过程中,要用酶脱去酵母的细胞壁,使之成为,并且用进行观察和计数。原生质体相差显微镜3.凝胶过滤层析又称或,主要是根据蛋白质的大小和形状,即蛋白质的进行分离和纯化。排阻层析分子筛法相对分子质量4.观察贴壁生长的培养动物细胞可用,而观察脱去细胞壁的植物细胞,则要用。倒置显微镜相差显微镜5.用紫外光为光源观察物质比用可见光的分辨率要高,这是因为。紫外光波长比可见光的波长短6.通过或形成的细胞叫细胞株。突变克隆

2、化7.细菌细胞、酵母菌细胞和植物细胞的细胞壁的化学组成是不同的,所以在制备原生质体时用不同的酶脱壁。一般说来,细菌可用,酵母可用,植物细胞可用。溶菌酶裂解酶果胶酶或纤维素酶8.相差显微镜与普通显微镜的不同是用替代可变光阑,用代替普通物镜,并带有一个合轴用的望远镜。环状光阑带相板的物镜9.倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其。物镜和照明系统的位置颠倒10.若用紫外光为光源,光学显微镜的最大分辨率为,透射电子显微镜的最大分辨率为,扫描电镜的分辨率为。0.1μm0.1nm3nm11.显微镜的分辨本领是指能够能力,用来表示。分辨

3、出相邻两个点的最小分辨距离12.高压电镜的电压在120kV以上,优点是:、。穿透性强不需切片13.细胞培养的突出特点是:可在。离体条件下观察和研究生命活动的规律14.贴壁生长的细胞具有三个特点:①;②;③。单层生长形态变成多态性具有接触抑制现象15.超薄切片染色常采用和双染法。柠檬酸铅醋酸双氧铀16.免疫细胞化学技术是用来定位细胞中的物质。抗原17.电子显微镜使用的是透镜,而光学显微镜使用的是透镜。电磁玻璃18.在光学显微镜下见到的结构称为,在电子显微镜下见到的结构称为。显微结构超微结构19.细菌质膜的多功能性主要表现

4、在:具有的呼吸作用,具有的分泌作用,具有的信号传导作用。线粒体高尔基体质膜20.显微镜的分辨率约等于光波长的,通常把这一数值看成是光学显微镜分辨力的。一半最大值21.单克隆抗体技术是将与无限繁殖的肿瘤细胞杂交的技术。可以产生抗体的淋巴细胞22.可用技术来研究质膜结构的不对称性。冰冻蚀刻23.乙醇沉淀DNA的主要原理是。脱去与DNA分子结合的水24.适于观察活细胞的光学显微镜有、和等。相差显微镜暗视野显微镜倒置显微镜25.分辨率是指人的肉眼或显微镜在25cm处能够分辨到的相邻两个物体间最近距离的能力。人眼为,普通光学显微

5、镜为,透射电子显微镜为,扫描隧道显微镜为,扫描电子显微镜为,以紫外光为光源的光学显微镜为。100μm0.2μm0.1nm0.001nm3nm0.1μm26.细胞内不同组分分级分离的常用方法有离心法、层析法、电泳法等。离心技术可将细胞匀浆中的不同细胞器或生物大分子进行有效分离。因为不同形态、大小和密度的细胞器以及步弓分子质量的生物大分子在离心力作用下各不相同。离心分离法又分和两种。离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和的分离。因为在密度均一的介质中,颗粒越大沉降越,反之沉降较。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组

6、分分开,而且所获得的分离组分往往不是很纯。而离心则是较为精细的分离手段,这种离心方法的关键是先在离心管中制备出或等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层。在此条件下离心,细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同的沉降带。成密度梯度的介质可以稳定沉淀成分、防止对流混合。层析法是分离蛋白质的常用手段,其基本原理是不同的蛋白质分子其和不同,当它们通过某种介质(基质)而与其发生相互作用时,会被不同程度地,这样便使不同类型的蛋白质分子移动的快慢不同,从而得以分离。根据蛋白质的大小、所带电荷或特殊的化学集团选择不同的基质的层析,如凝胶

7、过滤柱层析、离子交换树脂柱层析或亲和层析等,可以更有效地分离不同的蛋白质。法是分离蛋白质、核酸的有效方法,在细胞生物学研究领域有着广泛的应用。其基本原理是,不同种类的蛋白质或核酸所携带净电荷的不同,它们在一定强度的电场中会按所带、分子的以不同速度在电场中移动,从而得以分离成不同的。沉降速度差速离心密度梯度离心差速细胞器快慢密度梯度蔗糖氯化铯大小电荷滞留或吸附电泳性质(正或负)或多少净电荷大小和形状电泳带谱二、判断题1.透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞,而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。对2.扫描隧道显微镜是具

8、有原子显像力的显微镜。对3.以蔗糖为介质的密度梯度离心又叫差速密度梯度离心。对4.CsCl密度梯度离心又称等密度梯度离心。对5.CsCl密度梯度离心法分离纯化样品时,样品要和CsCl混匀后分装。离心时,样品中不同组分因重力的不同而停留在不同区带。错。因密度不同而停留在不同的区带6.提高显微镜的分辨率,可通过缩短波长,或给标本染色。

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