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时间:2018-08-02
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1、TSA对甲状腺鳞癌细胞株SW579增殖的影响【摘要】目的探讨曲古抑菌素A(trichostatinA,TSA)对甲状腺鳞癌细胞株SW579生长增殖的影响。方法分别以终浓度为25、50、100、200、400nmol/L的TSA作用于SW579细胞株,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的体外增殖、吖啶橙染色荧光显微镜观察细胞形态及细胞凋亡、流式细胞术检测细胞凋亡率的改变。结果TSA作用后对细胞的增殖有抑制作用;吖啶橙染色后光镜下观察发现有典型的凋亡小体生成;流式细胞仪分析凋亡率随TSA浓度的升高而
2、升高(P<0.05)。结论不同浓度的TSA可抑制SW579细胞增殖,促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性。【关键词】曲古抑菌素A甲状腺鳞癌细胞增殖细胞凋亡Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsoftrichostatinA(TSA)onapoptosisandproliferationofthyroidsquamouscellcarcinomaSW579.MethodsTreatedwithdifferentdosesofTSA(finalconcentrationof25nmol/L,50nmol/L,100nmol/
3、L,200nmol/L,400nmol/L),thecellswereobservedwithaninvertedmicroscope;Theproliferationactivitiesofcelllineweredeterminedbyusingmethylthiazolyltetrazolium(MTT)assay.Cellmorphologiesandapoptoticwereobservedbyfluorescencemicroscopestainedwithacridineorange.Flowcytometrywas10adopt
4、edtoexamineapoptoticrate.ResultsTSAinhibitedsignificantlythegrowthofcelllineandtheeffectwaswithadosedependentmanner.Typicalapoptoticmorphologicfeaturewasdiscoveredunderfluorescencemicroscope.TheapoptoticpeakwasdetectedwithFCMandapoptoticrateincreasedwiththeconcentrationraise
5、d.ConclusionsTSAcaninhibittheproliferationandinduceapoptosisinthethyroidcancercellswithadose-dependentmanner.Keywords:TSA;thyroidsquamouscellcarcinoma;proliferation;apoptosis曲古抑菌素A(TrichostatinA,TSA)源自链霉素代谢产物,是一种氧肟酸类非竞争性可逆的组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase,HDAC)抑制剂,也是四大类HDAC抑制剂的代表
6、药物之一。有研究表明,HDAC抑制剂TSA和丁酸钠均可使人结肠癌细胞系SW1116和人直肠癌细胞系Colo-320的细胞周期阻滞于G1期。TSA在低于微摩尔浓度时即可通过提高p21waf1的转录阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡,以抑制胰腺癌细胞的生长,TSA还可活化胰腺癌细胞系BxPC-3和MIAPaCa-2中的转化生长因子β受体II(Tβ10RII)。TSA可在体外抑制人肝癌细胞系HepG2细胞增殖,使Huh-7细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导凋亡。另外,人们在对人类膀胱癌细胞T24的研究中发现,HDAC抑制剂SAHA可诱导CDK抑制因子P2
7、1/WAF1的转录,从而使癌细胞停止增殖,趋向分化。已有研究报道TSA对肝癌、胃癌、宫颈癌、前列腺癌及神经母细胞瘤等多种肿瘤细胞具有抗肿瘤作用[1],但对甲状腺癌细胞的影响国内外研究甚少,对甲状腺鳞癌尚无报道。本研究旨在探讨TSA对甲状腺鳞癌细胞株SW579细胞增殖与凋亡的影响。1材料与方法1.1主要试剂与仪器TSA(SIGMA公司)用二甲基亚砜(DMSO)充分溶解,配成4×10-4mol/L的贮备液,-20℃避光保存。使用时用细胞培养液稀释到所需浓度。AnnexinV—FITC凋亡检测试剂盒购自晶美生物工程有限公司;L15培养液(SIGMA公
8、司产品)按照说明用三蒸水配置,100U/mL青霉素、100μg/mL的链霉素,调整pH值至7.0~7.2,0.22μm微孔滤器无菌过滤,4℃冰箱保存。
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