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《“热研11号”黑籽雀稗植株再生体系的建立》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、“热研11号”黑籽雀稗植株再生体系的建立第29卷第2期2008年4月热带作物CHINESEJOURNALOFTROPICALCROPSApr.2008"热研11号"黑籽雀稗植株再生体系的建立侯海军.郭建春胡新文1中国热带农业科学院热带生物技术研究所海1:35711012中国科学院亚热带农业生态研究所长沙4101253海南大学衣学院海南儋州571737摘要以热带牧草"热研11号"黑籽雀稗(PaspalumatratumCV.ReyanNo.11)种子为材料,对其外植体植株的再生过程进行系统研究.结果表明,以M
2、S无机盐+9.0mg/L维生素Bl+9.5mg/L维生素B+4.5mg/L尼克酸+1.0mg/L水解酪蛋白+30.0g/L蔗糖+8.0g/L琼脂为基本成分(MSM),附加植物激素类物质2.0mg/L2,4一D时,适合种子的愈伤组织形成,愈伤诱导率可达65%;继代培养基附加1.0mg/L2,4一D和0.1mg/LKT;分化的培养基附加6.0mg/L6-BA,分化率可达50%;生根培养基附加0.5mg/L激素类物质NAA,生根率100%.完成植株再生约需13周.关键词黑籽雀稗组织培养植株再生中图分类号$544.
3、903.53黑籽雀稗品种"热研11号"(PaspalumatratumCV.ReyanNo.11)属禾本科雀稗属,是中国热带农业科学院于1994年从印度印西亚引进的热带牧草,适宜在湿热地区中等肥力或贫瘠土壤种植,并有一定的耐寒和耐旱性.该品种在华南热带地区推广种植,并己取得了巨大的经济和社会效益].黑籽雀稗的组织培养和植株再生相关研究报道极少.Can曾以雀稗(PaspalumdilatatumPoir.)幼穗诱导愈伤组织和植株再生…,笔者曾以简报形成报道"热研11号"黑籽雀稗的组织培养和植株再生l2】,本文
4、详细报道该研究的结果,以便利用基因工程方法对黑籽雀稗进行品质改良,进一步提高它对环境的适应性,有利于黑籽雀稗在我国推广种植.l材料与方法1.1试验材料供试材料:热研11号黑籽雀稗种子,中国热带农业科学院品质资源研究所提供.1.2方法1.2.1种子发芽实验选取150粒饱满的黑籽雀稗种子,55℃温水浸种1h,放置在有湿润滤纸的培养皿中,每皿50粒种子,在培养温度为25℃下,避光使其发芽,2周后统计出芽率.1.2.2黑籽雀稗种子消毒首先,将黑籽雀稗种子以55℃温水浸种1h,去除浮在上层的不饱满种子,选取成熟饱满的
5、种子,然后用体积分数70%的酒精先消毒2min,再用0.1%～0.2%(:)的氯化汞消毒35min,无菌水冲洗5次,每次4～5min.1.2.3培养基及培养条件用于愈伤诱导和保持以及分化的基本培养基为改良的MS培养(MSM)[31,其基本成分是MS无机盐+维生素B,9.0mg/L+维生素B9.5mg/L+尼克酸4.5mg/L+水解酪蛋白1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8.0g/L.实验中所有的培养基都在灭菌前将pH调到5.8,灭菌条件为121℃保持20rain.经过消毒的黑籽雀稗种子接种到诱导愈伤组织培
6、养基中,置于黑暗处,在25℃环境下培养.每处理接种30粒,设置3个重复.待愈伤组织长到米粒大小时,将其剥离,转到继代培养基上教育部重点资助项目(编号:204158).人事部留学人员科技行动项目.中国热带农业科学院基金Rky0526.侯海军男,1980年生,助理研究员.研究方向:植物基因工程.'郭建春,通讯作者,E-mail:jianchunguoh@163.tom收稿日期:2007—06—11修回日期:2007—10—10中国热带农业科学院热带牧草研究中心编.热带牧草及草坪草优良品种简介[G].儋州:中国热
7、带农业科学院热带牧草研究中心,2002.192期一一堡塑兰量!::垫塑兰:墨堑垫要竺堡墨垄兰一.—-_-__I___-__●___-●_I-__-__I--____--___-_I-__-__I_____●-__I___●__I__I-__-__-__---●-_____-—_-————————————————一——一培养.30d后,统计愈伤组织诱导率并记录愈伤生长状态.愈伤组织长到半粒黄豆大小时,进行分化培养,每处理接种20块愈伤组织,设置3个重复.30d后统计有芽分化的愈伤组织比例.丛生芽长到1cm长时
8、,进行生根培养,每处理接种10棵绿芽,14d后统计正常成苗植株的生根率.愈伤继代时开始光照,培养物表面光照强度约3000lux,光照周期为16h/d.1.3公式计算及数据处理种子发芽率:发芽的种子数/播种的种子数X100%愈伤诱导率:愈伤形成的种子数/接种种子总数X100%愈伤分化率:有芽形成的愈伤组织数/接种的总愈伤组织数X100%根诱导率:有根形成的芽丛数/接种的芽丛数X100%数据采用SAS统计分析软件处理
