百脉根植株高频再生体系的建立-论文.pdf

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1、收稿日期：2014—02—24辽宁大学学报JoURNALoFuAoNINGUNlVERslTY自然科学版NnturalSciencesEdttion第4l卷第2期2014年Vo1．41No．22014百脉根植株高频再生体系的建立韩阳，卢福荣，崔智昕，王成，茹艺，李曹娜(辽宁大学生命科学院，辽宁沈阳l10036)摘要：以百脉根的下胚轴为外植体材料，探究不同激素种类和不同浓度对百脉根愈伤组织的诱导、分化增殖及生根的影响．结果表明：诱导愈伤组织的最佳培养基为：MS+2，4一D2．0mg／L+KT2．0mg／L+3％蔗糖+0．7％琼脂；诱导愈伤组织分化最佳培养基为：MS+6一BA1．

2、0mg／L+NAA0．5mg／L+3％蔗糖+0．7％琼脂；诱导不定芽生根的最佳生根培养基为：MS+NAA0．叭nag／L+2％蔗糖+0．7％琼脂，生根率达100％；实验建立了一个高频的百脉根再生体系，为百脉根基因工程操作奠定了基础．关键词：百脉根；下胚轴；愈伤组织；不定芽；再生体系中图分类号：Q945．3文献标志码：A文章编号：1000—5846(2014)02-0152-05EstablishmentofHighFrequencyRegenerationSystemofLotuscorniculatusL．HANYang，LUFu—rong，CUIZhi—Xin，WANGC

3、heng，RUYi，LICao—na(SchoolofLifeSciences，LiaoningUniversity，Shenyang110036，China)Abstract：ThehypocotyloftheLotuscorniculatuswastakenastheexplantsforresearchingtheeffectsofdifferenthormonecompositionsoncallusinduction，plantletregenerationandplantletroots．TheresultsshowedthatthemediumofMS+2．4一

4、D2．0mg／L+KT2．0mg／L+3％sucrose+0．7％agarcouldeficientlyinducecallustissue：andthemediumofMS+6一BA1．Omg／L+NAA0．5mg／L+3％sucrose+0．7％agarcouldeficientlyinducebudofcallus：mediumofMS+NAA0．1mg／L+2％sucrose+0．7％agarinducedtheregenerationofrootsquickly，andtherootingratereached100％．Thisresearchbuiltthebes

5、tregenerationsystemthathadlaidasoundfoundationfortransgenicopecationofLotuscorniculatus．Keywords：LotuscorniculatusL．；hypocotyl；callus；budofcallus；regenerationsystem收稿日期：2014—02—24基金项目：辽宁省自然科学基金资助项目(201202083)；辽宁省教育厅重点实验室资助项目(LS2010070)作者简介：韩阳(1962一)，女，博士，教授，硕士生导师，从事植物生物技术研究．E—mail：hanyang__

6、0802@163．tom．第2期韩阳，等：百脉根植株高频再生体系的建立153O引言百脉根(LotuscorniculatusL)又名牛角花、五叶草和鸟趾草，为豆科百脉根属草本植物，是世界著名的多年生优良豆科牧草之一，性喜温暖湿润，耐热、耐牧，为各种家畜所喜食．亦是良好的蜜源植物和水土保持植物。’卫]．百脉根原产于欧亚温带地区，现欧洲、北美以及澳大利亚、新西兰、日本均有栽培．我国贵州、云南、湖北、湖南、陕西省均有野生种，华南、西南、西北、华北等地均有栽培，是我国温暖湿润地区极有希望的豆科优良牧草_3J．百脉根被广泛用于林园生草、草场改良及牧草转基因育种等方面的应用．百脉根茎叶匍

7、匐、叶形秀美玲珑、叶色鲜翠、花冠黄色醒目、花期长，具有较高的观赏价值，加之其具有耐踩、耐阴、能覆盖地面、病虫害少及易于管理等诸多特点，是一种较好的园林绿化地被植物，可作为国道和城郊园林街道的绿化草种j．百脉根具有营养丰富、适应性强、皂素含量低、家畜饲用安全等特点，而且花量大、自交结实、种子结实率高，能够得到比较稳定遗传后代．尽管百脉根作为地被植物有许多优点，但大多数栽培品种苗期生长缓慢、种子硬实率高和抗逆性差]，使得百脉根常规育种产业化生产难以进行．通过基因工程技术改良的百脉根，培育出优质、高产的百脉根