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1、第卷第期细胞生物学杂志,年月,芥蓝植株再生体系的优化,黄科’’,余小林‘,吴秋云’,沈迎春‘,向殉‘,曹家树‘’浙江大学蔬菜研究,,福州所杭州福建省农业科学院蔬菜研究中心,结摘要采用正交设计方法对影响芥蓝植株再生体系的因素进行了优化研究果表明影响芥蓝植株再生的最主要因素是外植体类型,其次依次为从,妙,蔗糖和。结果进一,最十蔗糖步显示利于芥蓝再生植株的培养基条件为叭泌几十琼脂,最适宜的外植体类型为下胚轴,植株再生频率高达。关键词芥蓝再生体系正交设计一一一中图分类号文献标识码文章编号芥蓝脂,根据实验设计加入一节不同浓度的细胞分裂素,,属于十字花科芸蔓属甘蓝类蔬菜原产我国南方基氨基嘿吟和生
2、长素蔡乙酸等植物生长,,,,栽培历史悠久是我国著名的特产蔬菜之一在广调节剂高压灭菌前值调至培养基分装于东、广西、福建等南方地区是一种很受喜爱的家常的三角瓶中,℃,一压力条,。,,菜更是畅销东南亚及港澳地区的出口蔬菜芥蓝件下灭菌高压灭菌后添加然后,。,。在栽培过程中会受到病虫害和其他逆境的侵害给分装于的培养皿培养条件为士℃·。。,,林,芥蓝的生产造成很大的损失近年来随着生物技光照黑暗的光周期的光密度术的发展,已经有可能采用遗传转化技术对芥蓝的芽诱导和生根培养,,性状进行人工改良而植物遗传转化技术的一个重用天苗龄的无菌苗切取外植体分别取不同,。要基础是建立高效的植株再生体系但芥蓝植株再类
3、型外植体植于不同的培养基上进行芽的诱导正,,。生体系的建立一直未能取得很好的效果其主要交设计水平编码见表正交设计方案见表原因是有影响再生的因素如基因型等在很大程度上外植体接种至分化培养基上进行不定芽的诱。,,制约了高效植株再生体系的建立本文采用正交设周后待不定芽长至一导左右时用手术,。计方法闷系统地将影响植株再生体系建立的因素刀片切下转至生根培养基生根培养基配方设计为,,,,做最优化组合以便提供生产实际中应用性强的植几蔗糖琼脂一株再生体系。般经过周不定根的诱导即可进行再生植株的出瓶,移栽时要小心地洗去生根组培苗上的培养基,材料与方法然后将小苗移至含蛙石的培养土中,按常规管理方法进行栽
4、培管理。实验材料芥蓝个品种“早花芥蓝”·”“·、“”中花芥蓝刀结果与讨论、“”,石吞迟花芥蓝对影响芥蓝植株再生的因素通过正交设计方法优化,均购于广东省种组合并采用分析软件进行数据方差分子公司。种子用的乙醇表面消毒,然后析,结果表明,最适于中花芥蓝再生的条件为·,目留蔗糖用消毒再播种于发芽培养基培养基上发芽,以供外植体的取用。一一修回一一收稿日期日期培养基组成和培养条件浙江省重大科技项目资助,,一实验中使用的基本培养基均为加入琼通讯作者七细胞生物学杂志第卷表正交水平编码表,几外植体‘艺,了叶带柄子叶子叶柄下胚轴表中花芥蓝再生植株频率结果了叶︶︸内八‘一飞,带柄子叶‘内一、月八︺了子叶柄
5、下胚轴下胚轴子叶柄带柄子叶一了叶带柄子叶︺︸今一子叶下胚轴子叶柄子叶柄下胚轴子叶带柄了叶试验所用外植体数均为个,其中一表示水平上的差异。琼脂,最适,,宜的外植体类型为下胚轴晚花芥蓝再生频率为芥蓝个品种的再生频。,这个品种均属植株再生频率达到表培养基的生长调节率均在以上于十字花科中的、,剂种类和浓度蔗糖浓度和外植体类型等均对中花同一种作物说明该再生体系图是适用于芥蓝各芥蓝再生有影响,而对中花芥蓝再生体系的品种的优化组合。建立影响无显著影响。采用该条件对另两个不同品种生长调节剂对芥蓝再生体系的影响进行了验证实验,发现早花芥蓝再生频率为,植物生长调节剂的种类和浓度对芥蓝愈伤组织图芥蓝再生植
6、株体系的建立芥蓝愈伤组织的形成芥蓝不定芽的形成芥蓝不定芽的生长,芥蓝再生苗生根芥蓝再生苗的移植。第期黄科等芥蓝植株再生体系的优化。,。「‘,的诱导与分化有较大影响研究结果表明还能影响丛芽发生频率和各水平分别对芥蓝再生体系的影响达到极显外植体类型对芥蓝再生体系的影响,,刀,著水平凡外植体的取材部位和时间决定外植体的分生能力说明不同浓度的和水平对芥蓝再生影响很和内源激素水平,从而影响其再生频率。本实验取,大其中几的浓度和的下胚轴、子叶、子叶柄和带柄子叶等种外植体类。浓度最利于芥蓝再生型,各种外植体类型对植株再生影响很大,最适于是一种生长素,在组织培养中通常被用于芥蓝植株再生的外植体是下胚
7、轴外植体·,。,。诱导细胞的分裂和根的分化本实验中水。,、平以浓度最利于芥蓝愈伤组织的形成外植体必须同时具备芽再生频率高易为农杆,,。并且与其他水平的差异达到极显著水平说明较高菌侵染等特点才能成为良好的转化受体芸蔓属浓度有利于芥蓝的再生。属于细胞分裂作物的离体植株再生一般选用带柄子叶作为外植,,素在组织培养中通常起到促进细胞分裂和由愈伤体其原因可能是齐生长点切下的带柄子叶带有部。,组织上分化不定芽的作用本实验中水平以分分化能力强的原分生细胞。而本实验中选用
