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1、健物杖术通银。研究报告。刀了口已阴叭儿刀心工拍年增刊芥蓝组织培养及再生体系的建立韦正乙蔡勤安林春晶邢少辰吉林省农业科学院生物技术研究中心,长春加摘要以黄花芥蓝的子叶、于叶柄和带柄子叶为外植体,在不同的和浓度的组合诱导下,获得再生植株。研究结果表明,在洲试激素浓度下,带柄于叶为外植体的再生率录一致,其最适和浓度分别为伪唱几和伪昭较低浓度的和有利于子叶再生,其最适和浓度分别为加呀和加喀几子叶柄只有在较高的卫和浓度下才能再生,但再生率依然很低。关询芥蓝组织培养再生植物漱素户’吨必“加甸盯,咖,拟认口衅『众曲。交衍,肠哪二乎“吐二助肠甘。山玉冲匕,,】初州泪,曰肠目扣沙
2、如,即初压撇山,比砂面欣如即如污件‘一初如二川址,,。叮啥加呛,心·,肠由】乎助咖腼创,代讲冲七,二沙罗巧坛沙。益。。‘欣皿口山】川划运】哪芥蓝姆诩用幽叫助阅属于十字但芥蓝组织培养方面的进展仍较缓慢,直接制约花科芸盆属甘蓝类蔬菜,原产我国南方,栽培历史着芥蓝的转基因研究。虽然已有用芥蓝的下胚轴、久,主要以肥嫩的花共及其嫩叶供食,品质脆嫩、带柄子叶、子叶柄、子叶、薄细胞层、植株基部腋芽、风味别致、营养丰富,是我国著名的特产蔬菜之一,茎、茎源原生质体等作为外植体获得再生植株的报在广东、广西、福建等南方地区是一种很受喜爱的道一川,但是效果并不是很理想。本文以黄花芥兰为
3、家常菜,更是畅销东南亚及港澳地区的出口蔬菜。材料,建立了高效的再生体系,为以后的转基因研但芥蓝的生产过程中会有病虫害和其他逆境的侵究提供了必要保障。害,给生产造成很大损失。随着生物技术的发展,材料与方法利用转基因技术培育抗虫、抗逆的芥兰新品种成为材料可能。然而,要达到此目的,高效的组织培养再生体植物材料黄花芥蓝及朋日允。司用系是转基因的重要前提。虽然十字花科蔬菜中甘威叮址用购自种子门市部。蓝、大白菜、萝卜等的再生系统已发展得较为完善,培养基再生培养基以基本培养基为收稿日期以为一时一基金项目吉林省科技发展创新工程项目以印作者简介韦正乙一,男,硕士,从事植物分子生物
4、学与基因工程研究通讯作者刑少辰,一画‘雌阳“卿曲为年增刊韦正乙等芥蓝组织培养及再生体系的建立基础,添加不同浓度的和表以及利于子叶再生,相反,子叶柄只有在较高的和的、琼脂,为。浓度下才能再生。种子消毒与无菌苗培养用乙醇将种子浸泡后以无菌蒸馏水冲洗一遍,然后用升汞邪浸泡并于℃条件下以的转速展荡消毒巧接着用无菌蒸馏水冲洗遍,接种于培养基上,℃光照培养一,待子叶充分展开后取材。外植体准备、接种与培养无菌苗子叶充分展开后,分别切取子叶柄、带外植体长出的不定芽不定芽生根移栽的再生植株柄子叶和子叶作为三种不同类型的外植体,接种在圈芥蓝的组织培养再生表所示的培养基上,每种外植体
5、每盘接块,每个处理即不同培养基接盘。接种好的外植体在外植体以及再生植株在不同培养基上的生长状态也不一样。在培养基上,除了子叶柄长出淡℃下按照光照黑暗的光周期培养黄绿色愈上组织不能分化外,其他外植体均能长出,观察并统计再生频率坏死的外植体块不计。绿色的遇上组织,并且分化出的不定芽生长正常。再生芽生根、移栽待再生芽的叶片长到一。时,将再生芽切在培养基上,子叶柄也长出淡黄绿色愈上组织,下,接种到含的培养瓶内生根,约左右并且由粗壮的根长出,但不能唱出不定芽另外两即可生根,获得再生植株。待根长到以上,即种外植体虽有绿色愈上组织长成,也有不定芽分可练苗,练苗左右,移栽到的花
6、化,但是由粗壮根和气生根长出,不定芽部分生长盆中,放置在温室中管理。畸形、玻璃化。在培养基上,虽然三种外植体都有不定芽分化,但是每种外植体特别是子叶有大量结果其生根生长,形成的不定芽大都生长畸形、严重玻再生体系的建立璃化。外植体在培养后,在外植体上有不定芽裹培养‘、外植体和再生率分化图。不同外植体在不同的培养基上的再生率有所不同表。子叶在培养基上的再生率最外植体培养基再生率高,为在培养基上次之,为而在培编号浓度浓度养基上仅为。带柄子叶则在培养基上·最高,为培养基次之,为培养基子叶·上的再生率为。子叶柄的再生率最低,在培养·基、上不能再生,而在培养基上的再生率也·
7、印只有。在同一培养基上,不同外植体的再生带柄子叶率也表现差异。在培养基上,子叶的再生率最高·,带柄子叶次之,子叶柄不能再生子叶柄在培养基上也是如此。在培养基上则是带柄子叶再生率最高,子叶次之,子叶注表中的培养基均含几人少和琼脂,为柄虽能再生,但频率仅为,为最低。以上结果可以归结为,带柄子叶外植体在测试的激素浓度再生芽生根、移栽下,再生率表现一致较低浓度的和有大多数再生芽在培养基上约左右性物被术通很丑勿奴几彻玩盯以玲年增刊就可以生根,生根率在以上。获得的再生苗经较高的再生率,且玻璃化率控制在较低的水平,但过练苗后移栽到花盆中,成活率达。是结果显示,除了琼脂浓度外,
8、芥蓝的玻璃化程度讨论显然
