胡杨再生体系及转基因体系的建立

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1、胡杨再生体系及转基因体系的建立综述摘要:胡杨(PopuluseuphraticOliver)是唯一能在沙漠中生长的乔木树种,因而,进行胡杨再生体系及转基因体系的建立具有重要意义。对胡杨试管苗再生的途径及转基因体系的影响因子进行了综述,对胡杨组织培养中存在的黄萎、玻璃化等主要问题进行了讨论,试管苗黄萎问题没有解决,有必要进一步开展黄萎发生机理和高效再生体系的研究。关键词:胡杨;再生体系;转基因体系;黄萎;玻璃化ReviewofestablishingsystemoftransgenosisandregenerationofPopuluseuphraticAbstract:Populuse

2、uphraticistheonlytree,survivingindesert.So,workingontransgenosisandregenerationofPopuluseuphratichassignificantmeaning.TheinfluencefactorsonPopuluseuphratictest-tubeplantletandtransgenosissystemwerereviewed.Meanwhile,themainissuesoccurredinPopuluseuphratictissueculturelikewitheredplantletandvitr

3、ificationwerediscussed.Theformerissueremainedmysterious,whichneedsfurtherresearchofthemechanismofwitheredplantletandsufficientregenerationsystem.Keyword:Populuseuphratic;Regenerationsystem;transgenesissystem;witheredplantlet;vitrification胡杨(PopuluseuphraticOliver),杨属中最古老的树种,胡杨亚属包括2个种,即胡杨和灰胡杨(Pop

4、uluspruinosaSohrenk)。胡杨别称异叶杨、异叶胡杨,在我国新疆叫做胡桐或水桐,在西北甘肃、陕西一带有“陶来杨”之称。胡杨分布甚广,横跨欧、亚、非三大陆,其垂直分布亦很广,胡杨林在我国主要集中在海拔800-1100m之间的荒漠内陆河流冲积平原,上限可达2400m。它耐盐碱,抗大气干旱,耐强光高温与风袭沙埋,在防风固沙和保护自然环境上起着重要作用。因此,为研究胡杨抗逆分子机制与应用技术研究提供方法。国内外在胡杨再生体系及转基因体系方面做了一定的研究。1.再生途径植株的再生途径有2种,即体细胞胚发生途径和器官发生途径。器官发生途径是通过产生单极性的不定芽(或不定根),然后在芽

5、下方产生不定根(或根上方产生不定芽),并在二者之间分化出维管束组织,形成完整植物体。胡杨再生中主要利用器官发生途径,该途径又包括由外植体直接分化成器官的直接器官发生途径和外植体先脱分化形成愈伤组织然后再分化成器官的间接器官发生途径。1.1间接的器官发生途径据周林元等的试验,胡杨离体器官对植物激素不太敏感,无论培养基中是否加外源激素,植物都极易产生愈伤组,因此,胡杨离体培养多是通过间接的器官发生途径获得再生植株[6-9](见表1)。表1不同外植体通过间接的器官发生途径再生外植体培养基(mg/l)出处茎段、叶片带芽茎段无菌苗叶无菌苗叶、茎段MS+BA0.6+2iP2.0+NAA0.3+IA

6、A0.2H+BA0.001+NAA0.00021/2MS+BA0.25+NAA0.02MS+BA0.5+NAA0.1黄钦才,袁巧平等,1992孙雪新等,1993汪志军,李康等,1997谷瑞升,蒋湘宁等,1999胡杨愈伤组织根据形态可大致分为两类:一类质地较松软、湿润,呈浅绿色,增殖速度快;另一类质地较致密、表面较干燥,呈黄白色,增殖速度慢。H.W.Kohlenbach就植株再生研究得出的结论为:前一种是非胚性愈伤组织,后一种是胚性愈伤组织;其中后者具有胚的特征,遗传性状和植株再生能力都优于前者。因此,最大限度地获得胚性愈伤组织,利用增殖培养能快速生产出大量遗传性状一致的优良株系[10]

7、。许多试验表明,将已获得的愈伤组织进行巧妙的继代培养是获得胚性愈伤组织的必需步骤之一,有时可以通过控制培养条件(特别是生长调节物质)能将无形态建成能力的愈伤组织改变成有形态建成能力的愈伤组织[11]。间接的官发生途径是胡杨最容易获得无菌植株的途径,但是,该途径所需时间长[6-7],愈伤组织经长期培养后会表现出遗传不稳定性和变异性[12]。1.2直接的器官发生途径直接的器官发生途径从芽到芽,分化时间短,繁殖速度快。表2列出了近10多年胡杨通过直接

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