己酮可可碱对大鼠心肌损伤的保护作用

《己酮可可碱对大鼠心肌损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、己酮可可碱对大鼠心肌损伤的保护作用作者：徐志刚陈立王春梅范征宋艳芳王春艳【摘要】目的探讨己酮可可碱(PTX)对心肌损伤的保护作用及机制。方法建立心肌缺血再灌注(I/R)模型，采用Langendorff灌流装置。120只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组、I/R5、10、20、30min组，相应的PTX(100μmol/L)治疗组，持续观察PTX对血流动力学指标的影响。ELISA法检测心肌组织中的肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果缺血前及灌注期PTX100μmol/L给药能明显恢复大鼠I/R前后心脏的左室发展压(P<0.05)，左心室舒张末期压亦明显下降;10

2、0μmol/LPTX治疗组在I/R5min时明显降低TNFα的含量(P<0.05)。结论PTX提高大鼠缺血缺氧后心肌收缩力的恢复水平，增强心肌缺血缺氧的耐受性。改善心肌I/R引起的TNFα生成可能是其心肌保护作用的机制之一。【关键词】己酮可可碱;缺血再灌注;肿瘤坏死因子α研究表明，己酮可可碱(pentoxifylline，PTX)具有保护心血管损伤、改善慢性心衰患者及特发性扩张型心肌病患者心功能的作用〔1〕，但其对心肌缺血再灌注(ischemiareperfusin,I/R)损伤的作用及其机制尚未见报道。本文旨在研究PTX对心肌损伤的保护作用及其机制，为PTX

3、的临床应用提供理论依据。8　　1材料与方法　　1.1实验材料及动物清洁级Wistar大鼠(吉20030001)，体重250～300g，由吉林大学基础医学院实验动物中心提供;PTX购自Sigma公司，其他试剂均购自北京化学试剂厂;蠕动泵购自兰格恒流泵有限公司。　　1.2分组120只健康雄性Wistar大鼠，随机分为12组，每组10只：(1)正常对照组：含氧灌流液灌流80min;(2)缺血(I)组：灌流液预灌注20min，停止灌注30min;(3～6)I/R5、10、20、30min组：均为灌流液预灌注20min，停止灌注30min，再灌注时间分别为5、10、20、30min

4、;(7)PTX100μmol/L对照组;(8)PTX100μmol/L缺血组;(9)PTX100μmol/LI/R5min组;(10)PTX100μmol/LI/R10min组;(11)PTX100μmol/LI/R20min组：(12)PTX100μmol/LI/R30min组;治疗组灌注方法同I/R组，但在缺血前10min及再灌注期持续给药至实验结束;记录各组血流动力学指标。　　1.3Langendorff灌流乌拉坦(1g/kg)腹腔麻醉，经舌下静注肝素5mg/kg，分离心脏。将其立即放入KrebsHenseleit(KH)缓冲液(120mmol/LNaCl，4.8m

5、mol/LKCl，1.35mmol/LCaCl2，1.2mmol/LMgSO4，1.2mmol/LKH2PO4,25mmol/LNaHCO3，11mmol/L8葡萄糖，pH7.4)。于液面下行主动脉插管，丝线结扎固定。将心脏接入Langendorff灌流装置上，用95%O2、5%CO2平衡的37℃KH液行主动脉逆行恒压灌流，灌流压力为80cmH2O，611刺激器(Phipps&Bird，Richmond，USA)维持心脏博动300次/min。充水气球插入左心室并连接压力换能，左室舒张末期压(LVEDP)在实验开始调整为9～10mmHg，通过BL420系统(成都泰盟

6、)记录左心室发展压(LVDP)、LVEDP、左心室压上升最大速率(+dP/dt)及下降最大速率(-dP/dt)，并计算实验结束时恢复率(当前值/基础值)。　　1.4肿瘤坏死因子α(TNFα)含量检测取心肌100mg溶于1ml磷酸盐缓冲液(含1%TritonX100及蛋白酶抑制剂)中匀浆，4℃离心20min，取上清-20℃保存。严格按照TNFαELISA试剂盒说明书进行检测。　　1.5统计学分析采用SPSS10.0软件，实验结果以x±s表示，两组间比较采用t检验;组内比较采用单因素方差分析(ANOVA)。　　2结果　　2.1PTX对心肌I/R损伤血流动力学的影响见表1

7、。缺血组和I/R30min组可以引起显著的心功能抑制。I/R5min后LVEDP明显升高，是缺血前的40倍;LVDP明显降低缺血前的14倍。308min再灌后LVDP显著降低了缺血前的10倍(P<0.01)，而LVEDP显著升高是缺血前的30倍(P<0.05);同时±dP/dt亦显著降低是缺血前的10倍(P<0.05)。PTX100μmol/L缺血前10min给药，再灌注5、10、20、30min时均明显改善左心室功能(P<0.05)，再灌注30min后±dP/dt恢复60%(P<0.