半胱氨酰白三烯受体在大鼠分泌性中耳炎黏膜中的表达

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1、半胱氨酰白三烯受体在大鼠分泌性中耳炎黏膜中的表达【摘要】　　目的探讨半胱氨酰白三烯受体（CysLTR）1、2在变应性分泌性中耳炎黏膜中表达及其变化。方法建立卵白蛋白激发变态反应中耳炎大鼠模型。实验动物分为阴性对照组Ⅰ、阴性对照组Ⅱ和实验组，采用半定量反转录聚合酶链反应（RTPCR）技术分别检测半胱氨酰白三烯受体CysLTR1、CysLTR2mRNA在中耳黏膜的表达变化。结果CysLTR1、CysLTR2mRNA在阴性对照组Ⅰ、Ⅱ的中耳黏膜表达很低，炎症情况下两型受体在实验组中耳黏膜的表达均显著增高,

2、相对值分别为（0.42±0.05）和（0.28±0.06）,与阴性对照组Ⅰ、Ⅱ比较差别有统计学意义（P<0.01）。结论CysLTR1、CysLTR2均在中耳黏膜表达，变应性炎症时表达明显上调。【关键词】中耳炎，伴渗出液；半胱氨酰；白三烯类；受体，白三烯；白三烯拮抗剂；聚和酶链反应　　ABSTRACT:ObjectiveTodeterminetheexpressionsofcysteinylleukotrienereceptors,CysLTR1andCysLTR2,inaratmodelofoti

3、tismediawitheffusioninducedbyovalbumin(OVA).MethodsEighteenSpragueDawleyratsweredividedintothreegroups(theexperimentalgroup,negativecontrolⅠandⅡ).RatsfromtheexperimentalgroupweresensitizedtoOVAvia14intraperitonealinjectiononceaweekfortwoweeksandthenchall

4、engedtransbullarly.MiddleearmucosaswereharvestedandassayedforCysLTR1andCysLTR2mRNAexpressionsbysemiquantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction.ResultsThemRNAexpressionofCysLTR1andCysLTR2wasdetectableinmiddleearmucosasofthenegativecontrolgrou

5、psandsignificantupregulationwasobservedafterOVAchallenge(P<0.01).ConclusionTwotypesofreceptorsofcysteinylleukotrienearepresentinthemiddleearmucosaandcanbemodulatedimmunologically.　　KEYWORDS:otitismediawitheffusion；cysteine；leukotrienes；receptors,leuko

6、triene；leukotrieneantagonists；polymerasechainreaction　　分泌性中耳炎是严重影响儿童健康的常见病，其致病机理复杂，目前研究认为变态反应是一重要的致病因素或促发因素［1］。在变态反应炎症中,半胱氨酰白三烯（cysteinylleukotrienes,14CysLTs）是一重要的致炎介质,其在中耳炎发病中的作用,已有相关研究报道［2］。CysLTs可分为CysLTC4、CysLTD4、CysLTE4，必需通过和相应的受体结合才能发挥其病理生理效应。因此，有必

7、要对白三烯受体在中耳黏膜表达情况进行研究。本研究拟通过建立变态反应分泌性中耳炎动物模型，探讨二型半胱氨酰白三烯受体（cysteinylleukotrienereceptors,CysLTR）1，2在变应性分泌性中耳炎黏膜中表达变化及其调节机制。　　1材料和方法　　1.1动物和分组　　采用耳廓反射灵敏、健康清洁级SD大鼠18只，雄性，体质量约200g（由福建医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK闽20040002）。应用随机数字表法将动物均分成3组，分别为阴性对照组Ⅰ、阴性对照组Ⅱ和实验组。　　1

8、.2动物模型的建立　　实验前所有动物均经耳显微镜检查排除中耳感染。参照文献［1］方法建立变态反应中耳炎动物模型：实验组腹腔注射0.8mL溶有10mg卵清蛋白（ovalbumin,OVA,sigmaⅤ级）+5.14mg氢氧化铝凝胶佐剂的PBS磷酸盐缓冲液（0.01mol/L，pH7.4），每周1次，连续2周，此为全身致敏阶段；2周后予盐酸氯胺酮（100mg/mL）+地西泮（5mg/mL）2∶1混合液（314mL/kg）腹腔注射深