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1、乳腺康巴布剂提取工艺研究作者：于敏,韩德强,苏瑾,张云萍【摘要】目的优选乳腺康巴布剂的提取工艺。方法采用L9(34)正交设计,考察粉碎度、溶剂量和提取时间对丹参酮ⅡA含量和浸膏率的影响,采用高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA的含量,优选最佳提取条件。结果用95%乙醇-50%乙醇-水法提取的最佳条件为：药材粉碎成40目粉,每次加12倍量溶剂,每次提取1h。结论经正交试验优化的乳腺康巴布剂提取工艺经验证,合理可行。【关键词】乳腺康巴布剂；丹参酮ⅡA；正交试验；提取工艺；高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractin
2、gconditionforeffectiveingredientsofRuxiankangCataplasmata.MethodsTheorthogonaltestwasusedtochoosetheoptimumextractingconditions.TanshinoneⅡAandcondensateratewereusedasevaluatingindex,andtanshinoneⅡAwasdeterminedbytheHPLC.ResultsTheextractionmethod(95%alcohol-50%alcohol-water)wit
3、hasmuchastwelvetimesofsolventfor1handfinemedicinepower(through40meshsieve)wasmoreeffective.ConclusionTheextractingconditionoptimizedby8orthogonaltestisfeasible. Keywords：RuxiankangCataplasmata；tanshinoneⅡA；orthogonaltest；extractioncondition；HPLC丹参系唇形科鼠尾草属植物丹参(Salviamiltiorrhiza
4、Bge.)的干燥根及根茎,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的功效。乳腺康巴布剂由丹参、莪术、拳参、鸡血藤、瓜蒌、地龙组成,其中丹参为君药。丹参中的脂溶性成分具有天然抗氧化作用、抗动脉粥样硬化、降低心肌耗氧量及抗菌、抑菌、抗炎、抗肿瘤作用；丹参中的水溶性成分对脂质过氧化引起的细胞膜损伤有明显的保护作用,还具有抗血小板聚集和抗血栓形成的作用。本试验以丹参中丹参酮ⅡA和浸膏率为指标,采用正交设计对影响丹参提取工艺的主要因素进行了考察。 1仪器与试剂Agilent110型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；UV/Vis-WC1型褶合光谱仪,上海玉田分析仪器公司
5、)；旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司)。丹参酮ⅡA对照品(中国药品生物制品检定所,批号110766-200417)；丹参、莪术、拳参、鸡血藤、瓜蒌、地龙药材均购自佳木斯药材公司,并经刘娟教授鉴定,所有药材均符合2005年版《中华人民共和国药典》(一部)各项相应的要求,为合格产品。甲醇为色谱纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)；其他试剂均为分析纯。8 2方法与结果 2.1试验方案设计 根据文献[1-3]及单因素试验,选取影响95%乙醇-50%乙醇-水法提取效果的粉碎度(A),溶剂量(B,药材重量的倍数)和提取时间(C)为考察因素,以丹参酮ⅡA的含量及
6、浸膏率为考察指标,确定因素水平。见表1。表1提取条件考察因素及水平表（略） 2.2药材提取工艺按配方比例称取药材粗粉75g,共18份,按L9(34)正交设计,先用一定量95%乙醇浸泡3h,回流一段时间后,再用50%进行回流提取,最后用水煎煮一段时间,合并提取液,药液浓缩至100mL,备用。每组试验重复2次。 2.3含量测定 2.3.1色谱条件 色谱柱：KromasilCl8(150mm×4.6mm,5μ8m),流动相：甲醇-水(83∶17),流速：1.0mL/min,检测波长：270nm。色谱图见图1。 2.3.2对照品溶液的制备 取丹参酮
7、ⅡA对照品适量,精密称定,置棕色量瓶中,加95%乙醇制成每1mL含41μg的溶液,即得。 2.3.3标准曲线绘制 分别精密吸取对照品溶液(41.00μg/mL)5、10、15、20、25μL,进样测定,以对照品进样量对峰面积作图,计算,得回归方程：Y＝4723.8X－263.97,r＝0.9996,说明丹参酮ⅡA对照品在0.205～1.025μg范围内有较好的线性关系。 2.3.4精密度试验 精密吸取对照品溶液15μL,按“2.3.1”项下条件测定,连续测定5次峰面积,结果表明,精密度RSD＝1.71%,说明精密度较高。 2.3.5加样回收率
8、试验8 吸取一定量已知含量的提取液,加入一定量丹参酮ⅡA对照品,制备成5份样品,按前述条件进
