威灵仙总皂苷抗肿瘤作用及其对癌细胞增殖周期的影响

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1、威灵仙总皂苷抗肿瘤作用及其对癌细胞增殖周期的影响作者：赵英，余春粉，张桂英，王宝贵【摘要】目的研究威灵仙总皂苷(CCS)对小鼠肿瘤的抑制作用。方法采用肉瘤(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)3种小鼠移植性肿瘤模型进行实验。结果CCS对小鼠移植性肿瘤S180、HepA、P388均有显著的抑制作用。当剂量为0.3，0.6，1.2g·㎏-1时，对小鼠移植性肿瘤S180抑制率分别为42.78%，52.06%，58.25%(P<0.05或P<0.01)，对移植性肿瘤HepA抑制率分别为37.44%，52.05%和59.36%(P

2、<0.05或P<0.01)，对移植性肿瘤P388抑制率分别为34.50%，46.78%和54.39%(P<0.05或P<0.01);CCS可以使G0～G1期细胞增多，G2～M期细胞减少，癌细胞凋亡率与用药剂量呈正相关趋势。结论CCS对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用，对造血系统和免疫功能无影响。【关键词】威灵仙;总皂苷;抗肿瘤作用　威灵仙为毛茛科植物威灵仙ClematischinensisOsbeck.，棉团铁线莲ClematishexapetalaPall.或东北铁线莲Clematismanshurica7Rupr.的干燥根及根茎，

3、其中东北铁线莲主产于中国东北、内蒙古及日本[1，2]，根中含有甾醇、糖类、内酯、原白头翁素、白头翁素、皂苷等多种化学成分[3]，具有祛风除湿、通络止痛作用[4]。药理研究表明有降血压、降血糖和抗肿瘤作用[5～7]，临床报道用于食道癌的治疗，癌症患者配合用药可以减轻化、放疗的不良反应[8]。本实验观察了CCS对小鼠移植性肿瘤：肉瘤(S180)、肝癌腹水型(HepA)和白血病腹水型(P388)的抗肿瘤作用，以期为开展威灵仙总皂苷的临床应用提供实验依据。　　1材料　　昆明种小鼠从解放军农牧大学动物中心购入，合格证号：10-5112，体质量(20±2)g，雌雄兼用

4、;CCS由吉林大学提供;小鼠移植性肿瘤S180，HepA，P388购自中国科学院上海药物研究所。　　2方法　　2.1CCS体内抗肿瘤作用[9]取小鼠240只，分为三大组(每组80只)按常规方法分别接种3种瘤株后，将每大组随机分为4组，每组20只。对照组(生理盐水)20ml·㎏-1灌胃，CCS0.3，0.6，1.2g·㎏-1灌胃。接种后24h给药，1次/d，连续10d，停药次日称体重，取瘤块并称重，计算抑瘤率。　　2.2CCS对S180、HepA、P388小鼠存活时间的影响7取小鼠192只，分为三大组(每组64只)按常规方法分别接种3种瘤株后，将每大组随机分

5、为4组，每组16只，停药次日，观察小鼠生存时间并记录，方法同“2.1”项。　　2.3CCS对小鼠免疫器官和造血系统的影响取脾脏和胸腺称重，然后计算脾指数和胸腺指数;眼眶取血，测定WBC(白细胞)、RBC(红细胞)、HGB(血红蛋白)、PLT(血小板)和Ly%(淋巴细胞含量)，方法同“2.1”项。　　2.4CCS对小鼠癌细胞增殖周期的影响解剖小鼠后取出瘤块，制成悬液，液洗3次，然后染色并进行FCM分析，计算各时相细胞比率，方法同“2.1”项。　　3结果　　3.1CCS对小鼠肿瘤的抑制作用由表1可见，不同CCS剂量与抑瘤作用呈正相关趋势，剂量越大，抑瘤作用越明

6、显。当剂量为0.3，0.6，1.2g·7㎏-1时，威灵仙总皂苷对小鼠移植性肿瘤S180抑瘤率分别为42.78%(P<0.05)，52.06(P<0.01)和58.25(P<0.01);对移植性肿瘤HepA抑瘤率分别为37.44%(P<0.05)、52.05%(P<0.01)和59.36%(P<0.01);对移植性肿瘤P388抑瘤率分别为34.50%(P<0.05)，46.78%(P<0.05)和54.39%(P<0.01)，抑瘤作用明显。表1CCS对小鼠肿瘤生长抑制作用　　3.2CCS对小鼠S180、H

7、epA、P388存活时间的影响由表2可见，CCS对小鼠生命的延长作用与用药剂量有一定的依赖关系，但均无显著性差异。表2CCS对小鼠180、HepA、P388存活时间的影响　　3.3CCS对小鼠免疫器官和造血系统的影响由表3～4可见,CCS对小鼠免疫器官重量和小鼠的血象无显著影响，说明CCS发挥抗癌作用时不会抑制免疫功能和造血系统。表3CCS对小鼠免疫器官的影响表4CCS对小鼠造血系统的影响　　3.4CCS对小鼠癌细胞增殖周期的影响由表5可见,CCS可以使G0～G1期细胞增多，G2～M期细胞减少，癌细胞凋亡率与用药剂量呈正相关趋势。表5CCS对小鼠S180增

8、殖周期的影响　　4讨论　　新近发现，威灵仙除对类风湿性关节炎、骨性