重楼皂苷ⅰ对涎腺腺样囊性癌acc-m细胞系的增殖的影响作用及其机制

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122200HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位重楼皂苷I对涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞系的增殖的影响作用及其机制研究生：崔怡导师：张英怀教授贾志宇副教授专业：口腔临床医学二级学院：第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公幵和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名

2、为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。？nr研究生签名：导师签章广V年、/o曰.月河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。上年；月P曰目录中文摘要………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………5英文缩写…………………

3、……………………………………………10研究论文重楼皂苷Ⅰ对涎腺腺样囊性癌细胞ACC-M细胞系的增殖的影响作用及其机制前言……………………………………………………………11材料与方法……………………………………………………12结果……………………………………………………………20附图……………………………………………………………23附表……………………………………………………………34讨论……………………………………………………………36结论……………………………………………………………39参考文献…………………………………

4、……………………40综述中药重楼的抗肿瘤作用研究进展……………………………………43致谢………………………………………………………………………55个人简历……………………………………………………………56中文摘要重楼皂苷Ⅰ对涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖的影响作用及其机制摘要目的：涎腺腺样囊性癌（salivaryadenoidcysticcarcinoma，SACC）旧称圆柱瘤或圆柱瘤型腺癌，是涎腺常见的上皮源性恶性肿瘤，没有明显的性别差异，可发生于任何年龄，但以中老年居多。SACC可发生于任何涎腺，但以腮腺、颌下腺以

5、及腭部小涎腺居多。SACC作为恶性肿瘤，有着独特的生物学特性，其具有嗜神经侵袭生长和远处转移性，远处转移尤以肺部最为常见，其远端转移率在口腔颌面部肿瘤中居首位。SACC目前临床治疗手段仍采用以手术切除治疗为主，术后辅以放疗的综合治疗方案。但该综合治疗方案无法对局部复发以及远处转移形成有效控制，其远处转移比例在口腔颌面部居肿瘤中仍位于首位。但如今，从涎腺腺样囊性癌的发病原因、嗜神经侵袭性和远处转移的机制仍然未能研究清楚，因此探索新的治疗方法，提高对腺样囊性癌的治疗疗效，降低其局部复发和远处转移，对提高患者生存率、生存质量显得

6、十分重要。重楼（RhizomaParidis）为百合科重楼属的干燥根茎，目前研究表明其具有抗炎、止血、止痛、镇静以及抗癌等作用。重楼皂苷Ⅰ（PolyphyllinI）为重楼的一种甾体皂苷类成分。近年来相继有研究显示，重楼皂苷Ⅰ有抗肿瘤的作用。但重楼皂苷Ⅰ是否有对人腺样囊性癌细胞增殖存在抑制作用，及其作用机制，国内外尚未见报道。本研究拟对体外培养的人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞进行不同浓度、不同时间重楼皂苷Ⅰ处理，观察不同浓度、不同时间的重楼皂苷Ⅰ对人涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞系的增殖是否具有抑制作用，探讨其可能的作用机制

7、，旨在为腺样囊性癌综合治疗中寻找新的并且有效的植物化学药物奠定实验基础材料与方法：1材料1.1ACC-M由上海交通大学口腔颌面外科实验室提供，建立于1995年；1.2重楼皂苷Ⅰ（PolyphyllinI）1中文摘要购自成都普菲德生物技术有限公司2方法2.1药液配制重楼皂苷I用二甲基亚砜溶解配制成10mg/mL的储存液，室温下储存，使用前用RPMI1640培养液稀释。2.2细胞培养培养液采用RPMI1640加入10%的新生牛血清和青霉素-链霉素，置于37℃、5%CO2恒温箱内饱和湿度进行培养，每72-96小时传1代，采用胰蛋

8、白酶进行消化传代。2.3MTT比色试验4取对数生长期细胞制成5.0×10个/mL细胞悬液，接种于96孔板，每孔100μl，培养24h后，分别加入含重楼皂苷Ⅰ溶液200μg，使终浓度为1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL，并设对照组和调零孔，每组5个复孔。继