“温通针法”对拟血管性痴呆模型大鼠血浆txb2、6

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1、“温通针法”对拟血管性痴呆模型大鼠血浆TXB2、6摘要:目的：探讨“温通针法”治疗血管性痴呆(VD)的机理，为进一步推广本疗法奠定基础。方法：将60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型对照组、捻转针法组、温通针法组、药物组，采用反复夹闭双侧颈总动脉―再灌注造成血管性痴呆大鼠模型，并行相应处理。各组大鼠经过治疗，跳台实验结束后，利用放射免疫学方法检测大鼠血浆中血栓素B2(TXB2)及6-酮-前列腺素F1α(6KetoPGF1α)含量。结果：“温通针法”能使VD大鼠血浆中6KetoPGF1α含量显著升高，TXB2含量

2、显著下降。结论：“温通针法”通过调整VD大鼠血浆中TXB2、6KetoPGF1α之间的平衡，增加VD大鼠脑血流量，改善脑功能。这可能是“温通针法”治疗VD取效的主要机制之一。　　关键词:“温通针法”；血管性痴呆；血栓素B2；6-酮-前列腺素F1α　　血管性痴呆(VD)是一系列脑血管因素导致脑血管损害所引起的痴呆的总称,是在智能获得充分发展后,由于中风的损害造成退化的结果[1]。随着社会的日益老龄化，脑血管疾病成为人类的多发病、常见病，而血管性痴呆作为脑血管疾病的并发证之一，也日益危害着人类的健康。本实验从分子生物学的

3、角度，运用放射免疫学方法研究“温通针法”8对血管性痴呆模型大鼠血浆中血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6KetoPGF1α)含量的影响，从而揭示“温通针法”对血管性痴呆的治疗作用机理。　　1实验材料　　1.1实验动物　　雄性Wistar大鼠60只,体重250±30g（兰州军区总医院动物研究中心提供）。　　1.2实验药物　　尼莫地平片（由西安博爱制药有限责任公司生产，批号:E035)；2%戊巴比妥钠、硝普纳（双鹤药业生产，批号：京卫药准字[1996]第107043号）。　　1.3仪器及试剂　　SN-682

4、放射免疫γ计数仪（中科院上海核子所日环仪器厂）；80-1型电动离心机（上海手术机械厂）；AB204-WO型电子天平(瑞士,梅特勒-托力多有限公司)；跳台实验装置（自制）；TXB2试剂盒、6ketoPGF1α试剂盒，批号:820050527（均由中国人民解放军总医院放免研究所生产）。　　2实验方法　　2.1模型的建立采用改进的拟血管性痴呆大鼠的造模方法[2]。将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、捻转针法组、温通针法组、药物组。术前12ｈ禁食水。除假手术组外，其余各组大鼠均用2%戊巴比妥钠(2.5mL/kg)腹腔麻醉，

5、备皮消毒后，行颈正中切口，钝性分离双侧颈总动脉及神经,腹腔注射硝普钠(2.5mg/kg)，随即用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min，再灌注10min，再夹闭10min后恢复灌注，缝合伤口。放回笼中保温饲养,每只肌注青霉素20万Ｕ,连续5ｄ,以防感染。假手术组仅分离双侧颈总动脉后缝合。造模后动物在同等条件下［室温(20±5)℃，相对湿度(45±5)%］，普通饲养，自由饮水。　　2.2治疗　　①取穴：人中、照海、太溪。②8温通针法操作：针穴部位及针具常规消毒后，押手紧按穴位，刺手持针刺入穴内，候其气至（针下有沉紧感），

6、押手加重压力，刺手用力向前连续捻按9次，使针下继续沉紧，针尖拉着有感应部位连续小幅度重插轻提9次后，再向前连续捻按9次，针尖顶着有感应的部位推弩守气，使针下持续沉紧，同时双手施以关闭法，以促使针下热感向前传导，到达病所，然后缓慢将针拔出，紧按针孔，每穴每次操作1min，连续治疗14d。③捻转针法[3]：针穴部位及针具常规消毒后，将针刺入穴位，施以前后捻转的手法，指力均匀，角度适当（180°），不单向捻动，每穴每次操作1min，连续治疗14d。④选用30号0.5寸毫针。⑤穴位定位：按照《实验针灸学》中实验动物常用腧穴简

7、表定位。⑥药物组：尼莫地平片与蒸馏水调制成混悬液灌胃，剂量为10.8mg/(kg・d)，浓度为1mg/mL,共治疗14d。假手术组、模型组每日灌胃10.8mg/(kg・d)剂量的蒸馏水。　　2.3跳台实验　　各组大鼠治疗期满后，进行跳台实验。跳台装置为15cm×30cm×30cm的被动条件反射箱，四周为黑色塑料板，底面为通电的铜栅。箱正中央放置一高和直径为4.5cm的橡皮垫作为动物回避电击的安全区。先将动物放在反应箱内的橡皮台上适应3min，然后立即通以40Ｖ交流电，动物受到电击后逃避反应

8、为跳上橡皮台。分别记录各组大鼠在通电后从箱底到达安全区所需时间（潜伏期）和5min内大鼠受到电击的次数(错误次数)作为判断大鼠学习记忆成绩的指标。　　2.4血浆标本制备8　　各组大鼠断颈后，取中段血3mL，加入消炎痛EDTANa2液0.2mL，并颠倒混匀，3500r/min4℃下离心15min，分离血浆，置于-20℃保存待测。　　2.5TXB2