“通督调神固本”电针法对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素含量的影响

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1、“通督调神固本”电针法对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素含量的影响：邵瑛，宫育卓，唐纯志，赖新生【摘要】【目的】观察“通督调神固本”电针法对血管性痴呆（ＶＤ）模型大鼠学习记忆能力和血浆内皮素（ＥＴ）含量的影响。【方法】将成年健康ＳＤ大鼠（ＳＰＦ级）随机分为假手术组８只、电针组９只（电针治疗，取百会、大椎、脾俞、肾俞穴）、西药组８只（尼莫通治疗，剂量为12mg/kg）和模型组８只（不作治疗）。采用改良的四血管阻断法复制ＶＤ模型,Morris水迷宫法测定大鼠学习记忆能力，放射免疫法测定血浆ＥＴ含量。【结果】模型大鼠血浆ＥＴ含量显著性升高（Ｐ＜０.０１），其学习记忆

2、能力表现出明显的障碍，在水迷宫实验中，其逃避潜伏期显著性延长（Ｐ＜０.０１），在原平台象限跨越平台次数与其他３个象限比较无显著性差异（Ｐ＞０.０５）。而电针组、西药组大鼠逃避潜伏期显著性缩短（Ｐ＜０.０１），相同时间内跨越原平台次数显著性多于其他３个象限（Ｐ＜０.０１），并可使血浆ＥＴ含量显著性降低（Ｐ＜０.０１），与假手术组比较无显著性差异（Ｐ＞０.０５）。【结论】“通督调神固本”电针法治疗ＶＤ的作用可能与其调节血浆ＥＴ含量，有效提高ＶＤ大鼠学习记忆能力有关。【关键词】血管性痴呆／针灸疗法；内皮素／血液；通督调神固本；疾病模型，动物；大鼠　　针灸治疗血管性痴呆（vas

3、culardementia,VD）具有多系统、多水平、多层次、多靶点的特点。本课题组在长期的临床和科研实践中，总结出“通督调神固本”之法，选取精而少的穴位（百会、大椎、脾俞、肾俞）治疗ＶＤ，取得了肯定的临床疗效［１］，并通过对氧自由基、脑神经递质及脑细胞超微结构等的观察加以证实［１-４］。大量的临床和实验研究表明，内皮素（endothelin,ET）不仅可促使脑缺血的进一步加重，并通过脑神经元或胶质细胞的直接影响参与ＶＤ发生和发展的全过程［５-６］。本文观察了“通督调神固本”电针法治疗对痴呆大鼠血浆ＥＴ含量及学习记忆能力的影响，为探讨针灸治疗ＶＤ和对脑细胞保护作用的机理

4、提供实验依据。现报道如下。　　1材料与方法　　1.1动物、分组与造模　　成年雄性健康ＳＤ大鼠（ＳＰＦ级）４８只，体质量180~220g，由广州中医药大学实验动物中心提供〔实验动物许可证号：ＳＣＸＫ（粤）２００３-０００１；使用实验动物质量合格证编号：００１１１３６〕。随机抽取８只大鼠作假手术对照组，其他４０只均采用改良的四血管阻断法［7］复制ＶＤ模型。术后7d存活并无肢体残疾的大鼠２５只，将其随机分为电针组９只、西药组８只和模型组８只。假手术组８只全部存活。实验动物均按常规饲养。　　1.2主要仪器　　ＳＤＱ-３０双极射频电凝器（上海手术器械厂）；Morris水迷宫（广州

5、中医药大学实验动物中心提供）；Ｇ６８０５-１型治疗仪（中国青岛华声仪器厂）；１次性无菌针灸针（苏州天一针灸器械有限公司）；ＳＮ-６９５Ｂ型放免γ测量仪（上海核仪器一厂）。　　1.3治疗方法　　电针组采用２８号25mm毫针，参考《实验针灸学》［８］取穴，于模型大鼠头部百会穴（顶骨正中）斜刺１０mm，大椎穴（第７颈椎下）、脾俞穴（第１２胸椎下两旁肋间）和肾俞穴（第２腰椎下两旁）各直刺５mm，连接电针仪，施以连续波，频率150Hz，强度以大鼠安静耐受为度（约１mA），每天电针１次，留针２０min；西药组给予尼莫通（拜耳医药保健有限公司生产，批号：１１０１５６），按12mg／k

6、g灌胃，每日１次；模型组给予生理盐水，按２０mL/kg灌胃，每日１次。各组均连续治疗１５d。假手术组在同等条件下饲养，未予任何治疗。　　1.4检测方法　　1.4.1行为学观测治疗结束后开始水迷宫检测［９］。水迷宫内水深４１cm，水温２２℃~26℃。在水池壁标明４个入水点，由此将水池等分为４个象限（Ｅ，Ｓ，Ｗ，Ｎ），任选一象限正中放置平台，没于水下１cm，水面覆盖塑料泡沫。①定位航行试验：将受试大鼠按顺时针方向依次由Ｅ，Ｓ，Ｗ，Ｎ４个入水点面向池壁放入水中。记录２min内寻找平台的时间（逃避潜伏期，escapelatency）。如果大鼠在２min内找到平台，记录其实际逃避

7、潜伏期；如果在２min内未找到平台，由试验者将其引上平台并停留１０s，逃避潜伏期记为２min。历时6d，每天１次。②空间探索试验（spatialprobetest）：定位航行试验结束后撤出平台，然后任选一相同入水点将大鼠放入水中，测其２min内跨原平台及其他３个象限相应平台位置的次数。　　1.4.２血浆ＥＴ含量测定各组大鼠于水迷宫检测后取样，眼眶采血，每mL加入０.３mol/Ｌ抗凝剂乙二胺四乙酸二钠（EDTANa2+）2μL和抑肽酶５００kU，４℃温度下立即离心，３　５００r/min离心15min，取上清液低温保存，采用放射免疫法（ＲＩＡ