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1、丹参对小鼠黑色素瘤细胞株B16-BL6侵袭和转移能力的影响作者:徐建亚,顾勤,夏卫军,程罗根【摘要】目的研究活血化瘀中药丹参对小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6生长、粘附、侵袭、运动、转移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法测定丹参对B16-BL6细胞增殖能力的影响;采用细胞粘附实验、重组基底膜侵袭实验、趋化性运动能力实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察丹参对B16-BL6细胞生长、粘附、侵袭、运动及转移能力的影响。结果丹参水提液对B16-BL6细胞的增殖具有双向调节作用;能显著促进B16-BL6细胞与基底
2、膜成分纤维粘连蛋白粘附,显著抑制B16-BL6细胞侵袭基底膜能力及趋化性运动能力;能显著减小肺转移结节体积,但对结节数目没有明显作用。结论丹参提取液能够显著减轻小鼠黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6的肺转移程度,可能与其能够抑制B16-BL6细胞对基底膜的侵袭能力以及降低B16-BL6的运动能力有关。【关键词】丹参;黑色素瘤细胞株B16-BL6 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofRadixSalviaeMiltiorrhizae(RSM),akindofChineseTraditional
3、Medicinewhichcandissolvestasisbyactivatingbloodcirculation,on10proliferation,invasion,adhesion,migrationandmetastasisofB16-BL6metastaticmousemelanomacellsanddiscussitsfunctionalmechanism.MethodsTheproliferation,adhesion,invasionandmigrationcapacityofB16-BL6metastatic
4、cellswasevaluatedbyMTTassay,adhesionassayandreconstitutedbasementmembraneinvasionandmigrationassayinvitrorespectively.MousespontaneousmelanomamodelwasusedtostudytheeffectofRSMonmetastasisinvivo.ResultsTheextractofRSMbidirectionallyadjustedthemultiplicationofB16-BL6ce
5、lls,promotedprominentlytheadhesionofB16-BL6toLaminin,inhibitedsignificantlyB16-BL6invadingreconstitutedbasementmembraneandthemigrationofB16-BL6.Inthemousespontaneousmelanomamodel,itsuppressedsignificantlythevolumeoflungmetastaticnodesbuthadlittleeffectonthenumberoflu
6、ngmetastaticnodes.ConclusionTheextractofRSMcanalleviatethedegreeofthemetastasisofB16-BL6metastaticmousemelanomacells,whichmayberelatedwithinhibitingtheB16-BL6cellsinvadingtheextracellularmatrixandreducingthemigrationofB16-BL6cells.Keywords:RadixSalviaeMiltiorrhizae(R
7、SM);B16-BL6mousemelanoma10 侵袭与转移是恶性肿瘤最显著的生物学特征,是导致癌症患者临床死亡的主要原因。因此,阻止肿瘤细胞的侵袭和转移是恶性肿瘤治疗成败的关键因素。丹参为唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根及根茎,其味苦、微寒,入心、心包及肝经,具有活血通络、祛瘀止痛、凉血消痈等功效,可用于月经不调、经闭痛经、癥瘕积聚、胸腹刺痛、热痹疼痛、疮疡肿痛、心烦不眠、肝脾肿大、心绞痛等[1]。小鼠黑色素瘤细胞B16-BL6具有高转移特性,是研究肿瘤侵袭转移的理想模型。本实验从体
8、内、体外实验全方位研究丹参对B16-BL6细胞侵袭、粘附、运动和转移能力的影响,希望有助于其临床的进一步应用。 1实验材料 1.1药物及试剂 中药的制备:将原药材浸泡于药量10倍的水中1h,然后文火煎煮2h,滤出上清后再加8倍量水煎煮1h,合并2次上清液,