5负载u266细胞抗原的树突状细胞诱导t细胞的抗骨髓瘤活性

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1、5负载U266细胞抗原的树突状细胞诱导T细胞的抗骨髓瘤活性【摘要】　　本研究探讨负载骨髓瘤U266细胞裂解物的树突状细胞（DC）瘤苗活化的T细胞对U266细胞的体外杀伤作用。用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，然后分别用含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)、重组人白细胞介素4（IL4）的AIMV无血清培养液和含胎牛血清的RPMI1640培养液体外诱导培养DC，用MTT法检测负载U266细胞全抗原的DC活化的T细胞对U266细胞的杀伤作用。结果表明：健康人外周血来源的单个核细胞用

2、无血清培养液和含血清培养液诱导培养均可得到足够数量的DC，这两种培养液培养的DC在表型上无明显差异。分别用负载U266细胞全抗原的DC＋IL2、成熟DC＋IL2和单独应用IL2刺激后的T细胞与U266细胞共培养，其对U266细胞的杀伤作用逐渐减弱，负载U266细胞全抗原的DC＋IL2刺激后的T细胞较成熟DC＋IL2刺激后的T细胞对U266细胞的杀伤作用明显，且T细胞对U266细胞的杀伤率随效靶比的增加而升高。结论：用GMCSF、IL4诱导培养健康人外周血单个核细胞可以得到不成熟的DC，体

3、外负载U266细胞全抗原的DC可以刺激自体T细胞增殖并能杀伤U266细胞。【关键词】多发性骨髓瘤；树突状细胞；免疫治疗　　AntimylomaActivityofTcellActivatedbyDentritic15CellsLoadingAntigenofU266CellsAbstractThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofTcellsactivatedbyDCsloadedwithwholeantigensofU266cellsontheU266ce

4、llssurvivalinvitro.Peripheralbloodmononuclearcellswereisolatedfromhealthydonor,andadherentedoncultureplate.AdherentcellswereculturedinAIMVserumfreemediumorinRPMI1640mediumcontained20%fetalbovineserum(FBS),supplementedwithgranulocytemacrophagecolonyst

5、imulatingfactor(GMCSF)andinterleukin4(IL4).Methylthiazolyltetrazolium(MTT)assaywasusedtoevaluatekillingrateofU266cellsbyTcellsactivatedbyDCsloadedwithwholeantigenofU266cells.TheresultsshowedthatDCsderivedfromperipheralbloodmononuclearcellsculturedbyA

6、IMVserumfreemediumorRPMI1640mediumcontainingFBShadsimilarimmunophenotype.TcellsactivatedbyDCsloadedwithwholeantigenofU266cellsormatureDCsmightkillU266cellsinadosedependentmanner.Itisconcluded,DCsderivedfromperipheralbloodmononuclearcellsofhealthydono

7、randloadedwithwholeantigenofU266cellscaninduceantimyelomaresponseofTcellsinvitro.15Keywordsmultiplemyeloma;dendriticcell;immunotherapyJExpHematol2007;15(3):581-585树突状细胞（DC）是体内功能最强的抗原呈递细胞(APC)，存在于除脑组织外的所有组织器官中，是机体免疫反应的始动者，其表达丰富而独特的免疫球蛋白分子而发挥免疫佐剂的作用。DC表面

8、的免疫球蛋白不仅可以聚集免疫细胞，而且有利于免疫细胞间的信息传递；DC受抗原性物质刺激后能够分泌多种细胞因子，诱导特异性的免疫反应。肿瘤免疫逃避的机制之一是抗原呈递细胞的数量不足或功能下降，而肿瘤细胞的清除要依靠宿主抗原呈递细胞的强有力的功能。DC作为最强的唯一能激活初始T细胞的抗原呈递细胞，在治疗肿瘤和预防肿瘤发生、复发及转移中发挥重要作用。15目前针对多发性骨髓瘤的治疗主要采用化疗和造血干细胞移植等综合治疗，取得了一定的效果，但微小残留病灶的存在使骨