大鼠急性胰腺炎血清中il6浓度的动态变化

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1、大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化【摘要】目的：制作大鼠急性胰腺炎（AP）模型，探讨AP发病过程中血清IL－6与胰腺病理变化及两者之间的关系。方法：SD大鼠随机分为2组，假手术组和AP组，每组30只，用十二指肠闭襻法制作大鼠的AP模型，各组于造模后6、12、24h分批处死大鼠，用ELISA法检测血清IL6,同时取胰腺组织进行病理评分。结果：(1)AP组血清IL6水平明显高于同时间点假手术组，并随时点延长而升高，P<0.01；(2)各时间点假手术组的胰腺病理评分均显著低于AP组，P<0.01；(3)胰腺病理评分与IL6浓度呈正相关。结论：IL6的升高在A

2、P的发生发展中起重要作用，且与胰腺病理改变的严重程度呈正相关。【关键词】胰腺炎急性坏死性白细胞介素6血清学病理状态解剖学急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)是临床内、外科常见的急症之一。病理上分为水肿型和出血坏死型，临床上又分为轻型AP（MAP）和重症急性胰腺炎(severeacutepancretitis,SAP)，大约20%的轻型急性胰腺炎患者会发展成为重症急性胰腺炎，而SAP往往合并严重的并发症及较高的死亡率[1]。AP的发病机制至今尚未完全明了,研究认为,AP的发生发展与胰酶的异常激活引起胰腺细胞的“自身消化”9外，还与细胞因子的过度释放,胰腺微循环障碍

3、,胰腺腺泡细胞坏死及凋亡等诸多机制有关[2，3]。细胞因子等炎症介质启动全身炎症反应,被认为是SAP从局部病变迅速发展为全身性损害的重要因素，越来越多的证据表明，细胞因子在AP的发病过程中发挥着重要的作用[4]。2008年5月～2008年10月,研究大鼠AP不同时期外周血中IL6浓度变化及相应的胰腺病理改变,对IL6与AP严重程度的相关性进行初步探讨，进一步阐明AP的发病机制。1材料与方法1.1材料1.1.1动物及分组健康成年SD大鼠60只（由贵阳医学院实验动物中心提供），雌雄不限，体重为(250±30)g,标准棒状饲料喂养，大鼠随机分为2组，假手术组和AP组，每组30只。1

4、.1.2试剂及仪器EILSA试剂盒(由天津灏阳生物有限公司提供)，全自动酶标仪(Metertech∑960)，显微镜(OLYMPUS100)。1.2实验方法1.2.1动物模型的制备9采用改良十二指肠闭襻法制作AP模型[5]，该模型与人体胆汁返流性AP相类似，手术造成十二指肠腔内压力增高,使胆汁返流入胰管诱发AP。假手术组大鼠开腹后，胃窦部做小切口，并缝合关闭腹腔。麻醉清醒后大鼠可以自由饮水。1.2.2观察指标与检测法两组大鼠分别于术后6、12、24h分批处死，每批10只，经颈静脉取血2.0ml，1500r/min离心5～10min，取分离血清-70℃保存备用。用酶联免疫吸附法（E

5、ILSA）检测血清中IL6浓度，检测方法严格按照说明书进行。1.2.3胰腺组织的病理检查及评分各组在规定时间内处死大鼠，肉眼观察胰腺组织的大体病理改变。取胰腺组织用10%甲醛溶液固定，石腊包埋、切片及HE染色，在光镜下观察并盲法病理评分，按Kusske等[6]标准进行病理学分级，分为水肿、出血、坏死及中性粒细胞浸润4项，程度逐项按其正常（0分）至最重（4分），共分为5级，得分越高，胰腺组织的病理改变越重。分级标准见表1。贵阳医学院学报34卷2期田宇等大鼠急性胰腺炎血清中IL6浓度的动态变化表1胰腺组织病理评分标准9评分水肿出血坏死炎性细胞浸润0无无无无1小叶间灶性水肿实质出血

6、面积<25%导管周围坏死<5%局限导管内2小叶间弥散性水肿实质出血面积25%～50%灶性坏死5%～20%实质内浸润<50%3小叶广泛分隔实质出血面积51%～70%弥散性实质坏死21%～50%实质内浸润51%～75%4全小叶分隔全小叶出血严重小叶丧失>50%形成脓肿1.2.4统计学处理以SPSS11.50软件包进行统计处理，用方差分析及SNK(StaeleatNewmanKewts)检验，结果表示为均数±标准差（x±s），IL6与病理评分的相关性研究用peason分析，P＜0.05有统计学差异。2结果2.1血清IL6AP组于造模后6h开始，血清IL

7、6含量即升高，并随术后时间的延长逐渐升高，各时间点的IL6值均较假手术组明显升高，差异显著（P<0.01）；AP组6h、12h与其24h相比差异有统计学意义（P<0.01）,AP组6h与其12h相比差异有统计学意义（P<0.05），见表2。2.2胰腺大体病理改变假手术组各时间点胰腺无明显改变。AP组6h时胰腺轻度水肿，无腹水渗出；12h见胰腺明显充血水肿，色泽暗淡；24h可见胰腺明显出血及多灶坏死，部分胰腺呈灰白色样改变，胰周及网膜皂化斑，数量不等淡黄色或红色