冰冻血小板融化后出现絮状物的原因分析及预防对策

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1、冰冻血小板融化后出现絮状物的原因分析及预防对策【关键词】,冰冻血小板　　【摘要】目的探讨冰冻血小板融化后出现絮状物的原因及预防。方法对血小板采集后振荡与否、放置时间、二甲基亚砜加入速度以及融化温度进行分析。结果对血小板采集后振荡可明显降低絮状物的出现率（P＜0.05)、放置时间、二甲基亚砜加入速度以及融化温度对血小板有显著影响（P＜0.05)。结论冰冻血小板采集、制备、冻融等各个环节应严格遵守操作规程以确保血小板质量。　　【关键词】冰冻血小板；絮状物；冻融；二甲基亚砜　　二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂，于-80℃冰存血小板可以延

2、长血小板体外保存期，减少细菌污染，缓解临床供求矛盾。但冰冻血小板储存条件高，制备操作过程严格。若操作不当极易出现絮状物而影响血液质量甚至导致浪费。因此笔者对血小板冰融过程中的相关因素进行了分析研究，现报告如下。　　1对象与方法　　1.1研究对象符合献血者健康检查标准的献血员。5　　　　1.2仪器设备-80℃超低温冷冻冰箱（SANYO）。国产血小板振荡仪、循环解冻水浴箱、37℃恒温水浴箱、百级净化台、一次性注射器、二甲基亚砜（DMSO）。　　1.3方法　　1.3.1冰存血小板的制备［1］采集后的血小板放入血小板振荡仪振荡2～3h，以DM

3、SO为冷冻保护剂，在百级净化台上操作。MSO化的血小板置于-80℃超低温冷冻冰箱储存。　　1.3.2融化复苏过程临床需要时，将冰存血小板置38℃～40℃循环解冰水浴箱迅速融化，融化后无絮状物出现，可供临床输用，以患者能够耐受的最快速度输注。　　1.4统计学方法采用χ2检验。　　2结果　　24h内加入DMSO冷冻组与24h后加入DMSO冷冻组比较结果见表1，经振荡与未经振荡的血小板发生絮物状情况比较见表2，DMSO加入速度对血小板冻存质量的影响见表3，37℃普通水浴和40℃5循环水浴对出现絮状物的影响见表4。　　表124h内加入DMSO

4、冷冻组与24h后加入DMSO冷冻组比较（略）　　注：两组比较，P＜0.05　　表2经振荡与未经振荡的血小板发生絮状物情况比较（略）　　注：两组比较，P＜0.05　　表3DMSO加入速度对血小板冻存质量的影响（略）　　注：两组比较，P＜0.05　　表437℃普通水浴和40℃循环水浴对出现絮状物的影响（略）　　注：两组比较，P＜0.05　　3讨论　　22℃5保存液体血小板保存期短，已不能满足日益增长的临床需要。低温条件下贮存血小板，可使血小板长时间保证功效，从根本上解决了临床输注血小板供不应求的难题。但冰存血小板的制备工作还处于起步阶段，

5、仍需在实践中摸索、总结。笔者对我院2001年开始临床应用冰冻血小板以来进行了跟踪观察与分析，冻融血小板过程中应注意以下问题［2～3］。　　（1）加入DMSO时速度要缓慢而均衡，以1ml/min为宜，同时要不断摇动血小板袋，使加入的DMSO迅速扩散混匀，避免局部温度太高，大量产热损坏血小板。（2）采集后的血小板振荡要充分，放入血小板振荡箱振荡1h以上，以防采集的新鲜血小板未充分解聚。（3）手工分离血小板要避免红细胞混入富含血小板血浆中，影响血小板质量，且融化时容易出现絮状物。（4）机采血小板血浆量收集必须充足。一个治疗量的机采血小板（2

6、.5×1011）应悬浮于200～250ml的血浆中。（5）冰箱温度要恒定［（-80±4）℃］。-65℃以上就会出现絮状物聚集。（6）血小板冻存前不宜超过24h，加入DMSO后迅速将血小板袋放入-80℃冰箱中，尽量减少堆码层数，使血小板尽快降温-80℃。使其快速通过冰点，彻底停止细胞代谢，瞬间达到冷冻效果，最大程度地保持细胞活性。（7）融化血小板时应将血袋置于38℃～40℃的循环水浴中，使血小板迅速融化，以免纤维蛋白析出，融化过程中不可用手挤压冰块，以防破坏或激活血小板。血小板融化后应尽快输注。　　总之，通过对血小板采集、制备、冻融等各

7、个环节的严格控制，规范操作，可降低融化后出现絮状物的几率，减少浪费，提高血小板质量。5　　【参考文献】　　1马曙轩，欧阳锡林，刘景汉.手工采集血小板的制备与临床应用.中国输血杂志，2004，17（5）：372-374.　　2吕俊海，刘明东，韩颖.血小板保存损伤的研究进展.中国输血杂志，2002，15（1）：65-66.　　3刘小雯.温度波动对血小板冻存质量的影响.临床输血与检验，2003，5（2）：129.5