冰冻机采血小板复融出现絮状物凝块情况分析.doc

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1、冰冻机采血小板复融出现絮状物凝块情况分析　[摘要]目的:分析冰冻机采血小板复融情况。方法:分析了482U冰冻机采血小板复融过程中出现絮状物凝块的原因。结果:冰冻机采血小板的复融过程出现絮状物凝块的原因比较复杂，必须控制好制备流程的每一个环节。结论:制备高质量的冰冻机采血小板，血源的筛选是基础，注射DMSO的技巧是关键。　　[关键词]冰冻机采血小板;复融;絮状物凝块随着成分输血在临床的普及与推广，血小板的输注已成为治疗各种血小板减少或血小板功能障碍所致急性大出血的重要治疗手段。冰冻机采血小板因其可大量储备、有效期长、止血效果理想等特点，临床需求

2、量迅速增加。但冰冻机采血小板的制备技术要求高、操作过程严格，在复融冰冻机采血小板时极易出现絮状物凝块等问题。笔者自2001年7月～2004年10月通过对482U冰冻机采血小板复融情况进行总结，分析出现絮状物凝块的可能原因及对策，以为同行提供经验。　　1一般资料　　1.1仪器与试剂血细胞分离机MCS+（美国Haemonetics公司），－80℃低温冷冻冰箱（SANYO公司），美国HELMERPC100血小板振荡保存箱，上海大江SW-CJ系列百级超净工作台，上海跃进医疗器械厂HH・W21・Cu600型电热恒温水浴箱，上

3、海康德来集团生产的加样件。试剂是上海永华高新技术分析中心公司经营的RESEARCHORGANICS生产的DMSO（二甲基亚砜）。样本来源：2001年7月～2004年10月采集的482U冰冻机采血小板。　　1.2血小板供者的选择符合国家规定的《献血者健康检查标准》，血常规检查各项正常：血红蛋白男≥120g/L，女≥110g/L，血小板计数≥150×109/L，红细胞压积0.35-0.50；血小板形态和功能正常；体重≥50kg；采血前72h禁服阿司匹林类药物；机采血小板间隔时间≥一个月。　　2方法和结果　　2.1机采血小板的制备应用血细胞分离机M

4、CS+在无菌房间中集中采集。选择合适的穿刺点，严格无菌操作并确保进针顺利。按照血细胞分离机的操作规程选择分离机技术参数，保证机采整个过程的顺利，确保新鲜机采血小板的质量。　　2.2DMSO化的机采血小板制备及保存将制备好的机采血小板放在（22±2）℃血小板振荡保存箱水平振荡至血小板完全解聚，保存有效期内在百级超净工作台内按无菌操作要求以1ml/min速度缓慢加入DMSO，使最终浓度达到（5±1）％，并使DMSO与机采血小板悬液体充分混匀。加药后的机采血小板迅速平放于－80℃的低温冰箱内冻存备用。　　2.32冰冻保存机采血小板的解冻方法复融时，

5、从－80℃的低温冰箱内冻存成制品的冰冻机采血小板，立即放置于42℃恒温水浴箱中轻轻摇晃，使机采冰冻血小板迅速融化，观察解冻机采冰冻血小板，正常应为无溶血、无气泡、无变色、无凝丝、均匀一致的混悬液。我们在482U冰冻机采血小板的复融过程中，发现出现絮状物凝块有62U例，占全部复融数量的12.9％，该部分全部弃用。其他检查合格后发至临床科室使用。　　3讨论　　根据冰冻机采血小板制备、保存、复融过程及机采血小板本身的特点，分析总结出现絮状物凝块的原因有：①机采血小板献血员本身因素。如机采前的饮食致脂肪血、因红细胞混入出现血小板计数不准确、血小板计数

6、分布出现双峰或多峰等，都是影响冰冻机采血小板溶解后是否出现絮状物凝块的原因；②机采冰冻血小板中DMSO的浓度影响，有文献报导5%浓度的DMSO可以较好的对冰冻血小板起到保护作用；③制备冰冻机采血小板时加入二甲基亚砜的速度和摇匀情况对絮状物凝块的影响，注射时应注意保持匀速，并且整个过程中应充分摇匀，避免因加药速度过快致血浆蛋白变性；④（22±2）℃血小板振荡保存箱保存时间，发现保存时间越长，冰冻机采血小板复融后越容易出现絮状物凝块；⑤机采血小板存储温度和冻存中的袋与袋间的放置也是影响冰冻机采血小板复融后絮状物出现的因素，制备后的机采血小板应保存

7、在－80℃的专用冰箱中速冻，袋与袋间应留有空隙，并加以平放；⑥复融过程慢或水浴箱温度不稳定都可导致冰晶形成而影响冰冻机采血小板的质量，造成絮状物析出。机采血小板的冰冻保存突破了常规保存时间的局限，保存期可达一年以上。对于生命垂危的特急病例，尤其是DIC产妇的抢救，冰冻血小板具有不可替代的作用。现在有许多的文献报导冰冻机采血小板的止血效果并不比新鲜机采血小板的效果差。总之，制备高质量的冰冻机采血小板，血源的筛选是基础；注射DMSO的技巧是关键；复融过程是否成功是结果；应该掌握制备的每一个环节，只有这样才能提高冰冻机采血小板的临床应用效果。　　[

8、参考文献]　　[1]丁国良，赵树华，王珍,等.冰冻血小板中出现絮状物的原因分析[J].临床输血与检验,2004,6(2):114-116.　　[2]崔徐江.血细胞分