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1、利用正交设计优选复方三花茶剂中水溶性成分的提取工艺作者：韩春辉,李淑媛,韩国柱【摘要】目的建立TLC-UV法测定复方三花茶剂中绿原酸含量的方法,并利用正交试验优选复方三花茶剂中水溶性成分的提取工艺。方法建立TLC-UV法测定复方三花茶剂中绿原酸含量的方法后,以绿原酸含量及浸膏得率的综合评分为指标,采用正交试验法对提取过程中的温度(A)、浸出时间(B)、加水量(C)、浸出次数(D)4个因素进行优选。结果提取工艺中影响三花茶剂中绿原酸含量的显著因素是A、C、D。结论以绿原酸含量和浸膏得率二者的综合评分为考察指标的最优提取工艺为A
2、3B2C3D3。【关键词】复方三花茶剂；正交设计；浸提工艺Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionproceduresofcompoundThree-Flower-Tea(CTFT)byorthogonaldesign.MethodsAfterhavingestablishedthemethodsofquantifyingthechlorogenicacidbyTLC-UV,theorthogonaldesignwasusedtoselectthebestextractionproc
3、edures,usingchlorogenicacidcontentandextractyieldasthemeasuringindex,throughcontrollingfourdifferentfactors,namingextraction9temperature(A),extractiontime(B),watervolumeadded(C)andextractionnumberoftimes(D),andthreelevelsateachfactor.ResultTheeffectivefactorswhichi
4、nfluencedtheextractionprocedureswereA,CandD.ConclusionTheoptimumextractionproceduresforCTFTshouldbe15-foldwatervolume,three-timedecoctingwith20minutespertimeattemperatureof100℃. Keywords：compoundThree-Flewer-Tea；orthogonddesign；extractionprocedures复方三花茶剂由金银花、红花、菊花
5、、甘草4味中药组成,具有清热解毒、利咽、消肿止痛、活血化瘀的功效,是本院治疗咽炎常用方。应用时,以传统茶剂的开水泡、代茶饮作为该方的临床使用方法,水温、水量、浸泡次数、是否药尽其用均没有科学的实验依据。本实验选择金银花、菊花中含有的具有抗菌、消炎作用的主要成分绿原酸作为含量测定的检测指标,建立TLC-UV法测定三花茶剂中绿原酸含量的方法,并以绿原酸含量和浸膏得率的综合评分作为考察指标；采用L9(34)正交试验法对提取过程中的温度、浸出时间、加水量、浸出次数进行了优选研究。 1仪器和材料9UV/UISSpectrometer
6、lambdar12紫外可见分光光度计(美国PERRINELEMER公司制造)；W-80A旋涡混合器(上海精科实业有限公司制造)；UV-Ⅱ型三用紫外分析仪(北京凯星电讯设备研究所制造)；TDZ5-WS多管架自动平衡离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司制造)；DGB/20-002台式干燥箱(重庆试验设备厂制造)；HH-S恒温水浴箱(江苏医疗仪器厂制造)。 金银花(LonicerajaponicaThunb.)、菊花(ChrysanthemumindicumL.)、红花(GarthamustinctoriusL.)、甘草(Glyc
7、yrrhizauralensisFisch.)均为市售；绿原酸购自中国药品生物制品检定所(纯度≥98%,批号0735-200111)。硅胶G(青岛海洋化工厂出品)；羧甲基纤维素钠(CMC-Na,中国医药集团上海化学试剂公司出品)；试剂用水均为二蒸水；其他试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1供试品溶液的制备按照正交实验的条件浸提复方三花茶剂,合并浸液,水浴蒸干后以二蒸水溶解,使原药材(g)∶溶液(mL)=1∶2,加入无水乙醇,使含醇量为75%,静置24h,使充分沉淀,离心分离沉淀,取上清液,回收溶剂蒸干,以定量二蒸水溶解
8、,1mol/L9HCl调pH=2,以等量的乙酸乙酯萃取,共萃取4次,合并乙酸乙酯液,回收溶剂蒸干,以50%甲醇定容到10mL,置棕色瓶中、冰箱内保存备用。同法制备去除金银花和菊花的阴性对照液。 2.2对照品溶液的配制精密称取绿原酸标准品,以50%甲醇溶解配成1mg/mL溶液即得,棕色瓶保
