丹参提取液对hmgb1胞外释放的抑制作用

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1、丹参提取液对HMGB1胞外释放的抑制作用作者：王婷婷徐明，陈国千王春新倪芳颖帅朝霞【摘要】　　目的：研究丹参对内毒素脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）激活后巨噬细胞高迁移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox1,HMGB1）释放和内毒素血症小鼠血清HMGB1水平的影响。方法：使用不同浓度的丹参提取液处理100ng/mlLPS激活的培养巨噬细胞株RAW264.7，观察培养上清液中HMGB1水平和细胞HMGB1mRNA表达的变化，并通过腹腔内注射LPS建立的内毒素血症小鼠模型，观察丹参提取液对内毒素血症小鼠血清HMGB1水平和存活率的影响。细胞培养上清液和血清H

2、MGB1含量采用酶联免疫分析方法检测，细胞HMGB1mRNA表达采用RTPCR方法检测。结果：丹参提取液明显抑制LPS激活后的巨噬细胞HMGB1释放和HMGB1mRNA表达，降低内毒素血症小鼠血清HMGB1水平并提高存活率。结论：丹参有抑制巨噬细胞HMGB1释放和保护内毒素血症小鼠的作用。【关键词】丹参；高迁移率族蛋白B1；巨噬细胞；内毒素血症　　［Abstract］Objective:TostudytheeffectsofSalviamiltiorrhizaonthereleaseofhighmobilitygroupbox1(HMGB1)fromendotoxinstimulatedm

3、acrophagesandserumHMGB1levelof10endotoxemiamice.Methods：HMGB1concentrationintheculturemediumandexpressionofHMGB1mRNAwereanalysedbyenzymelinkedimmunosorbentassayandRTPCR,respectively,after100ng/mllipopolysaccharide(LPS)stimulatedmacrophagelikeRAW264.7cellsweretreatedwithdifferentdosesofSalviamilt

4、iorrhizaextract.Inaddition,theeffectofSalviamiltiorrhizaextractwasinvestigatedonserumHMGB1levelandsurvivalrateofendotoxemiamicewhichwereestablishedbyintraperitonealinjectionofLPS.Results：SalviamiltiorrhizaextractmarkedlysuppressedthereleaseofHMGB1andexpressionofHMGB1mRNAinLPSstimulatedmacrophages,a

5、nddecreasedserumHMGB1levelofendotoxemiamicewiththesurvivalrateelevated.Conclusion：SalviamiltiorrhizasuppressedextracellularreleaseofHMGB1inendotoxinstimulatedmacrophages,andconferredprotectionagainstendotoxinlethality.　　［Keywords］Salviamiltiorrhiza;highmobilitygroupbox1;macrophages;endotoxemia　　胞外高

6、迁移率族蛋白B1（highmobilitygroupbox1,10HMGB1）为近年发现的一种晚期炎症介质，在脓毒症、关节炎、肺炎、急性胰腺炎等疾病的发病机制中起着十分重要的作用［1-4］。鉴于HMGB1在诸多炎症性疾病病理中的重要性，HMGB1靶向治疗研究已引起广泛重视［3,4］。丹参(Salviamiltiorrhiza)为唇形科鼠尾草属植物的干燥根及根茎，具有活血通经、凉血消肿、祛痈肿丹毒之功效［5,6］。我们在筛选中药抗HMGB1成分研究中发现丹参提取液具有明显抑制巨噬细胞HMGB1释放和保护内毒素血症小鼠的作用，现报告如下。　　1材料与方法　　1.1实验材料　　BALB/c小鼠（6～

7、8周，雄性，20～25g）由江苏省血吸虫病防治研究所提供；丹参购自甘肃天水药材供应站(经无锡市人民医院许英华主任药师鉴定)；巨噬细胞株RAW264.7购自中国科学院细胞库。内毒素脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）为Sigma公司产品，mRNA提取试剂盒为Promega公司产品，MMLV一步法RTPCR试剂盒为上海捷瑞公司产品。　　1.2方法　　1.2.1丹参提取液的制备10