大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究

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1、大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究李煜，王振飞，李瑶，戴宝贞，贾瑞贞，杨利军，黄翔华【摘要】　　目的研究大蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法细胞形态观察和活细胞计数法研究大蓟提取液对人白血病细胞K562，肝癌细胞HepG2，宫颈癌细胞Hela，胃癌细胞BGC823生长的抑制作用。结果大蓟提取液可使4种癌细胞形态上发生皱缩、变圆、脱壁、碎裂等变化，生长受到明显抑制，抑制率最高可达92.34%。结论大蓟有确切的抑癌作用，并与中医的气血理论、药物归经理论和肝肾同源理论相一致，在体外细胞水平上也有良好体现，对实验室手段研究中医药同样有着重要指导意

2、义。【关键词】大蓟癌细胞生长抑制作用　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectsoftheextractfromCirsiumjaponicumFisch.DCtheongroancarcinomacells.MethodsMorphologicalchangeobservationandlivecellaccountingjaponicumFisch.DConhumanchronicmyloidleukemiaK562cell,hepatomaHepG2cell,cervicalca

3、rcinomaHelacellandgastriccarcinomaBGC823cell.ResultsGroCirsiumjaponicumFisch.DC，thehighestinhibitoryrateorphologicalchangesincludedshrinkage,roundness,floatingandcrumbling.ConclusionCirsiumjaponicumFisch.DChasreliablecarcinoma-inhibitingeffectsandtheeffectsconformtotheqiandbl

4、oodtheory,theMeridian-reachingtheoryandtheliver-kidneyhomologytheoryoftraditionalChinesemedicine,edicineportantguidancemeaningtoChinesetraditionalmedicineresearchbylaboratorymethods.　　KeyjaponicumFisch.DC;Carcinomacell;Groin，纱布过滤，滤渣加适量六蒸水置110℃高压蒸气锅内20min，纱布过滤；合并两次滤液，2℃冰箱中静置72

5、h，高、中、低速滤纸，0.45μm，0.22μm微孔滤膜逐级过滤；滤液蒸发浓缩、灭菌、4℃保存，使用时以培养液稀释至所需质量分数（以生药计算）。　　1.2器材与试剂　　倒置相差显微镜（NikoneclipseTE2000-U），超净台（苏州净化设备有限公司），CO2培养箱（GALAXYBINDER），24孔培养板（BIOFIL），RPMI1640、高糖DMEM（GIBCO），胎牛血清（TBD）。　　1.3癌细胞系　　人白血病细胞系K562，肝癌细胞系HepG2，胃癌细胞系BGC823，宫颈癌细胞系Hela（均由本实验室传代保种），均常规传代培养。

6、　　2方法　　2.1分组每种细胞均设对照组（不加药）与观察组（加药），观察组分设高（12mg/ml）中（6mg/ml）、低（2mg/ml）3个剂量组。　　2.2加药处理取对数生长期的4种癌细胞，均以2×104/孔接种于24孔培养板，接种24h后加药。加药后：①每天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化；②每隔24h各组均取5孔细胞台朌蓝拒染法计活细胞数，每孔计3次，5孔取平均值，计算出当天的生长抑制率，抑制率（%）=〔（对照组平均活细胞数-观察组平均活细胞数）/对照组平均活细胞数〕×100%〔1〕，连续6d。　　2.3抑制效果的判断与分析①细胞形态的

7、观察与分析；②平均抑制率：6d的抑制率相加取平均值；③最高抑制率：每种细胞各剂量组取其6d中最高的1d。抑制率的比较采用χ2检验。　　3结果　　3.1大蓟提取液对4种癌细胞形态的影响对照组：K562（图1）大小均匀，胞体圆整，折光性好，日益密集；HepG2（图2）、Hela（图3）和BGC823（图4）紧贴板壁，胞间紧密接触，胞质透亮，可见分裂相，连续观察，细胞继续生长，集落不断扩大。观察组：加药后8h，K562多数大小不均，胞膜内陷或出泡；HepG2、Hela和BGC823部分胞体回缩，胞质内有颗粒物积累。加药后24h，K562（图5）大部分形

8、态异常，或皱缩或内容物释放形成“鬼影”，板底可见碎渣样物质；HepG2（图6）、Hela（图7）和BGC823（图8）部分皱缩、变圆、脱