大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究论文

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1、大蓟提取液对4种癌细胞生长抑制作用的研究论文李煜，王振飞，李瑶，戴宝贞，贾瑞贞，杨利军，黄翔华【摘要】目的研究大蓟提取液对癌细胞生长的抑制作用。方法细胞形态观察和活细胞计数法研究大蓟提取液对人白血病细胞K562，肝癌细胞HepG2.freelCirsiumjaponicumFisch.DCtheongroancarcinomacells.MethodsMorphologicalchangeobservationandlivecellaccountingjaponicumFisch.DConhumanchronicmyloi

2、dleukemiaK562cell,hepatomaHepG2cell,cervicalcarcinomaHelacellandgastriccarcinomaBGC823cell.ResultsGroCirsiumjaponicumFisch.DC，thehighestinhibitoryrateorphologicalchangesincludedshrinkage,roundness,floatingandcrumbling.ConclusionCirsiumjaponicumFisch.DChasreliablec

3、arcinoma-inhibitingeffectsandtheeffectsconformtotheqiandbloodtheory,theMeridian-reachingtheoryandtheliver-kidneyhomologytheoryoftraditionalChinesemedicine,.freeledicineportantguidancemeaningtoChinesetraditionalmedicineresearchbylaboratorymethods.KeyjaponicumFisch.

4、DC;Carcinomacell;Groin，纱布过滤，滤渣加适量六蒸水置110℃高压蒸气锅内20min，纱布过滤；合并两次滤液，2℃冰箱中静置72h，高、中、低速滤纸，0.45μm，0.22μm微孔滤膜逐级过滤；滤液蒸发浓缩、灭菌、4℃保存，使用时以培养液稀释至所需质量分数（以生药计算）。1.2器材与试剂倒置相差显微镜（NikoneclipseTE2000-U），超净台（苏州净化设备有限公司），CO2培养箱（GALAXYBINDER），24孔培养板（BIOFIL），RPMI1640、高糖DMEM（GIBCO），胎牛血清（

5、TBD）。1.3癌细胞系人白血病细胞系K562，肝癌细胞系HepG2，胃癌细胞系BGC823，宫颈癌细胞系Hela（均由本实验室传代保种），均常规传代培养。2方法2.1分组每种细胞均设对照组（不加药）与观察组（加药），观察组分设高（12mg/ml）中（6mg/ml）、低（2mg/ml）3个剂量组。2.2加药处理取对数生长期的4种癌细胞，均以2×104/孔接种于24孔培养板，接种24h后加药。加药后：①每天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化；②每隔24h各组均取5孔细胞台朌蓝拒染法计活细胞数，每孔计3次，5孔取平均值，计算出

6、当天的生长抑制率，抑制率（%）=［（对照组平均活细胞数-观察组平均活细胞数）/对照组平均活细胞数］×100%［1］，连续6d。2.3抑制效果的判断与分析①细胞形态的观察与分析；②平均抑制率：6d的抑制率相加取平均值；③最高抑制率：每种细胞各剂量组取其6d中最高的1d。抑制率的比较采用χ2检验。3结果3.1大蓟提取液对4种癌细胞形态的影响对照组：K562（图1）大小均匀，胞体圆整，折光性好，日益密集；HepG2（图2）、Hela（图3）和BGC823（图4）紧贴板壁，胞间紧密接触，胞质透亮，可见分裂相，连续观察，细胞继续生长

7、，集落不断扩大。观察组：加药后8h，K562多数大小不均，胞膜内陷或出泡；HepG2、Hela和BGC823部分胞体回缩，胞质内有颗粒物积累。加药后24h，K562（图5）大部分形态异常，或皱缩或内容物释放形成“鬼影”，板底可见碎渣样物质；HepG2（图6）、Hela（图7）和BGC823（图8）部分皱缩、变圆、脱壁，HepG2（图6）板底已可见碎渣样物质；加药后48h，K562多数崩解；HepG2大量浮起，碎渣量大；Hela和BGC823更多的脱壁并出现碎渣。3.2大蓟提取液对4种癌细胞生长的平均抑制率结果见表1。由表1

8、可见，大蓟提取液对4种癌细胞的生长都有明显抑制作用，但它们的抑癌效果是不同的，如高剂量组中，K562的抑制率最高，可达89.12%，BGC823的抑制率最低，也在62.85%，四者间相互比较，K562HepG2HelaBGC823。3.3大蓟提取液对4种癌细胞生长的最高抑制率结果见表2。由表2可见，大蓟