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1、不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响作者：时维静,储明明,谭志静【摘要】目的考察不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响。方法应用清炒、酒炙、醋炙3种炮制方法加工白芍饮片,采用HPLC法测定各种炮制品中的芍药苷含量。结果各炮制品中芍药苷含量由高到低依次为：生白芍＞炒白芍＞酒白芍＞醋白芍。结论不同炮制方法对白芍中芍药苷含量有较大影响。【关键词】白芍；炮制；芍药苷；高效液相色谱法Keywords：RadixPaeoniaeAlba；processingdrugs；paeoniflorin；HPLC8白芍临床常用的炮制品有酒炙品、醋炙品和清炒品等。生白芍强于养血柔肝、平肝滋阴,主
2、要用于镇肝熄风、滋阴安神,治疗肝阳上亢等；炒白芍强于养血和络、缓脾止痛,主要用于脾虚或肝脾不和之泄泻腹痛者；酒白芍强于补中、行散,用于血虚兼见血瘀,或血虚兼见寒凝者；醋炒白芍主要用于缓肝、柔肝、止痛、敛血,常与养血补肝或止血药同用,治妇人肝急失柔、冲任不固等证[1]。有研究报道,炮制后的白芍其中的芍药苷含量均显著降低[2]。本试验采用清炒、酒炙、醋炙3种方法炮制白芍,用HPLC法测定不同炮制品及生品中芍药苷的含量,考察不同炮制方法对芍药苷含量的影响。 1材料 1.1仪器美国Waters-1525高效液相色谱仪,2487-DAD紫外检测器,Breeze色谱工作站(美国
3、Waters)；BS21S精密电子天平(德国赛多利斯天平有限公司)；ZK-82B型电热真空干燥箱(上海市实验仪器总厂)。 1.2试剂与药物 白芍购自安徽沪谯中药饮片厂(生产许可证号：Y20050027；批号060904)；白芍苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号110736-200629)。双蒸馏水(自制)；陈醋(金山寺,镇江市陈醋厂)；黄酒(海神黄酒,安徽省海神黄酒有限公司)；乙腈为色谱纯；其余试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1白芍炮制品的制备[3]8 2.1.1炒白芍 取白芍片置锅内,用文火加热,炒至表面微黄色,取出放凉。 2.1.2酒白芍
4、取白芍片,喷淋黄酒拌匀,稍闷后置锅内,用文火加热,炒干,取出放凉；每白芍100kg用黄酒10kg。 2.1.3醋白芍 取白芍片,用米醋拌匀,稍闷后置锅内,用文火加热,炒干,取出放凉；每白芍100kg用米醋20kg。 2.2芍药苷含量测定 2.2.1色谱条件 色谱柱：ZORBAXSB-C18(4.6mm×150mm,5μm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)；流速为1.0mL/min；检测波长为230nm[1]；柱温：室温；进样量20μL。在该色谱条件下,芍药苷峰与其他成分有较好的分离,理论塔板数按芍药苷峰计算不低于38000。色谱图见图1。 2.
5、2.2供试品溶液制备 精密称取各炮制品白芍粗粉50.0g,用8倍量乙醇,回流提取2次,每次提取1h,合并提取液,在常压下回收乙醇,待成稠膏时,置真空干燥箱内(80℃)干燥,研末,存入干燥器内。称取相当于0.5g原药材的粉末,置50mL量瓶中,用甲醇定容至刻度。取1mL置10mL容量瓶中,制成1g/L的溶液,为供试品溶液。 2.2.3对照品溶液制备 精密称取芍药苷对照品2.10mg,用甲醇定容到5mL量瓶中,即得对照品溶液。 2.2.4线性关系考察 取芍药苷对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL用甲醇定容到5mL,进样量20μL,按上述色谱
6、条件测定,记录峰面积。以芍药苷含量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,进行回归处理,得回归方程为：Y＝2×106X－74470,r＝0.9990。芍药苷在0.17～1.68μg范围线性关系良好。 2.2.5精密度试验8 精密吸取芍药苷对照品溶液,依次重复进样5次,每次20μL,在上述色谱条件下测定芍药峰面积值,RSD＝0.17%。表明本法精密度良好。 2.2.6稳定性试验 取供试品溶液,每隔1h进样20μL,重复进样5次,测定各峰面积值,RSD＝0.54%。表明样品稳定性好。 2.2.7重复性试验 同一批样品进行5次平行试验,测定芍药苷含量,每次进样量为20μ
7、L,测定结果RSD＝0.67%。 2.2.8加样回收率试验 取已知含量的样品5份,分别添加芍药苷对照品0.1mg,依法测定含量,平均回收率RSD＝0.26%,表明本方法的加样回收率以芍药苷加入量计符合要求。 2.2.9样品含量测定8 分别取供试品溶液20μL进样,在上述色谱条件下测定芍药苷的峰面积,由标准曲线计算出芍药苷的含量。结果见表1。表1芍药苷含量测定结果(略) 3讨论 历史上白芍的道地产区为安徽亳州(亳芍)、浙江杭州(杭芍)、四川中江一带(川芍)。芍药共有11个种(或变种),种质资源非常丰富。安徽亳芍主要栽培于亳州、涡
