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时间:2018-08-01
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1、RNA干扰在眼底疾病中的新进展【摘要】 RNA干扰(RNAi)发现,改变了人们对细胞基因调控的传统理解。这种技术具有传统治疗方法无可比拟的优势和潜力,因此近些年来越来越受全世界眼科医师的重视。目前,虽然在临床应用中还存在不少问题,但是RNAi必将为眼科疾病的治疗带来新的前景。我们就RNAi在眼底方面的研究进行综述。【关键词】RNA干扰;眼底病;基因沉默 StudyonRNAinterferencetechnologyinfundusdiseases BoMeng,NingYuLei Foundationitem:ProgramofDepartmentofE
2、ducationinShandongProvince,China(No.J05L12) DepartmentofOphthalmology,theAffiliatedHospitalofBinzhouMedicalCollege,Binzhou256603,ShandongProvince,China Abstract ThediscoveryofRNAinterference(RNAi)haschangedpeople'straditionalconceptsofthegene.This18techniquepossesesadvantagesandpoten
3、tialsthattraditionaltherapiescannotcompareespeciallyintermsofitsspecificityandefficiency,anditisdrawingmoreandmoreattentionsfromophthalmologistsallovertheworldtheseyear.Althoughtherearestillalotofproblemsinclinicaluseatpresent,variouskindsofrelatedexperimentalresultsmakeusfirmlybelieve
4、thatRNAiwillsurelybringanewepochforcuringdiseasesinophthalmology.Thisarticleprovidesanoverviewonsomeofthelatestadvancesinfundus. KEYWORDS:RNAinterference;fundusdiseases;genesilencing 0 引言 RNA干扰(RNAInterference,RNAi)是指mRNA降解所引起的转录后水平的基因沉默(PosttranscriptionalGeneSilencing,PTGS)[1]。这
5、种技术的应用为体内和体外基因表达的抑制提供了新的方法[1]。尽管siRNAs和反义寡核苷酸都是通过WastonCrick碱基互补配对原理和目标mRNA结合[2,3],但是相比之下,siRNAs具有更强的优势和潜力[4],可能为眼底方面疾病的治疗带来新的前景。我们就RNAi在眼底方面的研究进行综述。18 1 RNA干扰技术 1.1 RNAi的发现 1995年,康乃尔大学的SuGuo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C.elegans)的par1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本想利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义
6、RNA以期观察到基因表达的增强,但得到的结果是二者都同样地切断了par1基因的表达途径[5]。这是与传统上对反义RNA技术的解释正好相反。1998年,Fire和Mello通过实验发现,正义RNA抑制基因表达的现象及过去的反义RNA技术对基因表达的阻断,都是由于体外转录所得RNA中污染了微量双链RNA(dsRNA)[1,6]而引起。他们将单链RNA纯化后注射线虫时,基因抑制效应变得十分微弱,而经过纯化的双链RNA却正好相反[69]。他们将这种现象称作RNAi[1]。1999年,人们发现RNA干扰现象广泛存在于几乎所有的真核生物中细胞。2000年,Hammond和Z
7、amore提出了RNAi作用机制模型[3,10]。2001年,人们利用RNAi技术成功诱导出培养的哺乳动物细胞基因沉默现象[11]。2006年,美国科学家Fire和Mello[1214]发现了RNAi[1],获得了诺贝尔生理学或医学奖。 1.2 RNAi的作用机制18 RNAi的作用机制尚不十分清楚,目前普遍认为RNAi很可能都是通过dsRNA的介导而特异地降解靶mRNA,抑制相应基因的表达,属于PTGS[6]。现已初步阐明dsRNA介导的同源性靶mRNA降解过程主要分为两步:(1)一种称为Dicer的RNaseⅢ样核酸酶在ATP参与下把dsRNA[1,6
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