ep2在海马齿状回突触传递中的作用

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1、EP2在海马齿状回突触传递中的作用【摘要】目的探讨EP2在小鼠海马齿状回突触传递中的作用及其机制。方法细胞外记录技术记录海马脑片穿通纤维-齿状回颗粒细胞突触的场兴奋性突触后电位(fEPSP)。结果①EP2的激动剂Butaprost增强海马齿状回突触传递和降低双脉冲比(paired-pulseratio,PPR),此效应被EP2的拮抗剂AH6809所阻断。②Forskolin单独或Forskolin+AH6809均可增强fEPSP的斜率。③EP2增强突触效能的效应由PKA,ERK和IP3途径介导。结论多信号转导途径可能参与EP2激活诱导的突触传递增强。【关键词】前列腺素;环氧合

2、酶-2(COX-2);EP2;突触传递;海马ChinaABSTRACT:ObjectiveToevaluatetheroleofEP2insynaptictransmissionindentategyrusofhippocampus.MethodsFieldexcitatorypost-synapticpotentials(fEPSP)wererecordedattheperforatedpath-granuleneuronsindentategyrusinvitro.Results①Butaprost,anagonistofEP2,enhancedthesynaptictr

3、ansmissionindentategyrusanddecreasedthepaired-pulseratio,andtheseeffectswerereversedbybathapplicationofAH6809(EP2antagonist).②ApplicationofForskolinaloneorwithAH6809elevatedtheslopeoffEPSP.③The10Butaprost-inducedresponsesweremediatedviaPKA,ERKandIP3signalpathways.ConclusionMultiplesignalpat

4、hwayswereinvolvedintheEP2activation-mediatedenhancementofsynaptictransmission.  KEYWORDS:prostaglandin;cyclooxygenase-2(COX-2);EP2;synaptictransmission;hippocampus   环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是转化花生四烯酸(arachidonicacid,AA)为不稳定的中间产物PGG2的限速酶[1-2]。COX-2参与兴奋性谷氨酸能神经传递和长时程突触可塑性[3-5],并在神经源性炎症发生中

5、起关键作用。前列腺素E2(prostagladinE2,PGE2)主要来源于COX-2氧化途径,研究表明PGE2是COX-2介导的突触效能变化的重要信使[3,6]。已经有4种PGE2的受体(PGE2receptors,EPs)被鉴定和克隆,分别为EP1、EP2、EP3和EP4及EP3的多剪接异构体[5,7]。EPs属于7次跨膜结构的G蛋白藕联受体(Gprotein-coupledreceptors,GPCRs),这些EP受体亚型呈现明显不同的信号转导途径和细胞反应。EP1的激活增加细胞内Ca2+水平,并与Gq-PLC-IP3和蛋白激酶C(proteinkinaseC,10PK

6、C)相藕联;EP3是与百日咳毒素敏感的Gi蛋白关联,导致cAMP生成减少,而EP2和EP4与Gs-cAMP-PKA途径相藕联引起cAMP增加[5,7]。研究表明PGE2在调制突触活动的效能是通过激活突触前的EP2起作用的[8-9],但EP2在突触传递中的作用还远未阐明。本研究拟探讨EP2在海马齿状回穿通纤维-颗粒细胞突触传递中的作用及其信号转导机制。  1材料与方法  1.1海马脑片准备  采用C57BL/6雄性小鼠,体重20~25g。海马脑片的制备如文献所述[3-4]。简言之,小鼠断头后将脑迅速置于0~4℃以950mL/LO2+50mL/LCO2混合气饱和的低Ca2+/高-

7、Mg2+的切片用液(mmol/L):2.5KCl,7.0MgCl2,28.0NaHCO3,1.25NaH2PO4,0.5CaCl2,7.0葡萄糖,3.0丙酮酸,1.0抗坏血酸,234蔗糖。脑片被切成350μm厚的薄片,将其转移到含被氧饱和的人工脑脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF)的烧杯中进行孵育,ACSF的组成为(mmol/L):125.0NaCl,2.5KCl,1.0MgCl2,25.0NaHCO3,1.25NaH2PO4,2.0CaCl2,25.0葡萄糖,3.

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