甜菜红色素的主要成分抗氧化能力

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1、甜菜红色素主要成分抗氧化能力甜菜红色素(Betalain)是红甜菜中有色化合物的总称，由红色的甜菜色苷(betacyanines)和黄色的甜菜黄素(betaxanthin)两类化合物组成，甜菜色苷主要成分是甜菜苷(betanin)，占红色素的75％-95％；其余尚有异甜菜苷、前甜菜红苷、异前甜菜苷以及甜菜红色素的降解产物。甜菜黄素包括甜菜黄素I(vulgaxanthineI)和甜菜黄素II(vulgaxanthineIIo甜菜红色素广泛地存在于藜科、觅科、仙人掌科、商陆科等多种植物中，其中藜科最为人们熟悉的是红甜菜；觅科的叶子花属的叶子花、马齿览的花

2、瓣．仙人掌科植物中仙人掌果实、火龙果果皮和果肉。商陆科的商陆浆果，鸡冠花等等也均含有丰富的甜菜红色。国内外现均已将其作为天然色素加以度为30cI=，时间为20min。纤维素酶水解枣纤维的最佳条件为：酶浓度0．1xl0g／g，温度为4O℃，时间为20min。利用盐酸、氢氧化钠、纤维素酶等3种方法在最佳水解条件下水解枣纤维，所得总糖量和果糖量没有显著性差异。因此，在生产中，可以根据实际情况和需要，选择适当的方法对枣纤维进行水解。开发利用，此外又发现其具有抗氧化和清除自由基的生理功能。但其主要的抗氧化部分是什么还未见报道．采用不同抗氧化体系对这两类化合物的

3、抗氧化活性进行评价，来探究甜菜红色素的主要抗氧化部分。1材料和仪器1．1材料和试剂甜菜红色素购于无锡天彩生物制品有限公司；ABTS【2,2’一azin0_bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfpni—cacid)](Sigma)；Trolox[(6-Hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchro—man-2-carboxylicacid)](Sigma)；DPPH(1，1-Diphenyl-2-picrylhydra--zy1)(Sigma)；TPTZ(Tripyridyl-triazine)(Sigma)；

4、SephdexLH一20(Sigma)；过硫酸钾：天津市赢达稀贵化学试剂厂：其他所用试剂除特殊标明外，均为分析纯．三蒸水配置试剂。1．2仪器高效液相色谱(1abAllianceSerieslII)：天津兰博实验仪器设备有限公司；Kromasil(C185250x4．6mm)：天津兰博实验仪器设备有限公司：MuhiskanMK3酶标仪：美国Thermo公司；真空冷冻干燥机(LGJ0．5)：北京四环科学仪器厂；SK一1快速混匀器：江苏省荣华仪器制造有限公司；平底96孔微量滴定板。2方法2．1甜菜红色素中甜菜色苷和甜菜黄素的分离采用SephadexLH一2

5、0分离甜菜红色素主要部分，用pH=5—6的乙酸洗脱同，收集红色部分和黄色部分，备用。2．2HPLC分析色素红色部分和黄色部分阎用高效液相0abAllianceSeriesIII)配合二极管阵列紫外一可见光检测器(model525)~定甜菜色苷和甜菜黄素。将上述冷冻干燥样品溶解过0．22m滤膜后进样，进样量为20，所用色谱柱为KromasilC，851xL(250x4．6mmi．dj。设定柱温为室温，流动相A甲醇，流动相B2％乙酸，设等度洗脱(A：B=20：80)，流速0．5mUmin，样品洗脱时间30min，每次进样结束后用100％甲醇冲洗色谱柱10

6、min并平衡后再进样。红色部分的检测波长为538nm，黄色部分的检测波长为478nm。2．3ABTS自由基清除试验测定抗氧化能力】取过硫酸钾溶液(140mmol／L)88IxL与ABTS溶液5mL(7mmol／L)混合避光反应16h。然后用乙醇稀释ABTS溶液至吸光度为0．7-+0．002。取200txLABTS溶液与100I．LL样品于96孔板中反应10min．在734nm下测吸光度。以溶于乙醇的Trolox溶液为标样，以清除率与Trolox浓度作标准曲线。样品抗氧化能力用TEAC(tr0l0xequivaIentantioxidantcapaci

7、ty)表看，空白为乙醇。2．4FRAP试验测定抗氧化能力㈣FRAP试剂：0．3mol／L醋酸缓冲液(pH3．6)：10mmol／LTPTZ(~于40mmo]／L盐酸)：20mmo]／L三氯化铁=10：1：1。200I~LFRAP试剂与100L样品于37℃反应10min后在593nm下测吸光度。以溶于乙醇的Trolox溶液为标样作标准曲线。样品抗氧化能力用TEACtroloxequivalentantioxidantcapacit~表示，空白为乙醇o2．5DPPH自由基清除试验测定抗氧化能力51用乙醇配制200Ixmol／LDPPH溶液，试验按表1分组

8、，加人96孔微量滴定板的每孔中。2．6数据处理计算Torlox标准溶液的自由基清除率，以自由基清除率为纵坐标