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时间:2018-07-24
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1、木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制研究【摘要】目的:研究木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制;方法:以1.25g/L、2.5g/L、5g/L、10g/L的木犀草素溶液对骨肉瘤MG-63细胞行划痕实验、侵袭实验、免疫印迹实验,并观察经不同浓度木犀草素溶液培养后骨肉瘤MG-63细胞形态;结果:木犀草素对于骨肉瘤MG-63细胞的生长、增值、运动迁移能力、穿膜细胞数量、IL-6蛋白表达水平均有一定的抑制作用,并且其抑制作用随着木犀草素浓度的增加而逐渐增加;结论:一定浓度的木犀草素对于骨肉瘤MG-63细胞具有极强的抑制作用,值得应用于临床骨肉瘤的治疗。【关键词】木犀草素;骨肉瘤;抑制效
2、应;机制themechanismofinhibitoryeffectofluteolinonosteosarcoma[Abstract]Objective:inhibitoryeffectonhumanosteosarcomaanditsmechanismofluteolin;methods:1.25g/L、2.5g/L、5g/L、10g/LluteolinsolutiononosteosarcomaMG-63celllinescratchtest,invasionassay,Westernblot,andobservethedifferentconcentrationof
3、mignonettefibroinsolutionculturedosteosarcomaMG-63cellmorphology;results:luteolinforosteosarcomaMG-63cellgrowth,proliferation,movementability,transmembranecellnumber,theexpressionlevelofIL-6proteinwasinhibited,andtheinhibitionincreasedwiththeincreaseofluteolinconcentrationincreasesgraduall
4、y;conclusion:acertainconcentrationofluteolinhasastronginhibitoryeffectonhumanosteosarcomaMG-63cells,treatmentisappliedtoclinicalosteosarcoma.[keyword]luteolin;osteosarcoma;inhibitoryeffect;mechanism骨肉瘤是临床相对常见的恶性肿瘤,多发于少儿或青少年,该病预后不良,相当多的患者因患上该病而死亡1。近几年来,随着保肢手术的不断发展以及全新化疗药物的研制成功,骨肉瘤的治疗疗效有了较大的
5、提高。但是,转移以及复发的骨肉瘤患者预后依然相当差,并且继发转移以及耐化疗药物骨肉瘤的出现仍然是相当严重的问题2。作为来源于植物的黄酮类物质,木犀草素能够干扰骨肉瘤细胞新陈代谢的正常进行,抑制其生长,诱导其凋亡,对于骨肉瘤的治疗具有较高的应用价值3、4。为研究木犀草素对骨肉瘤的抑制效应及其机制,为临床治疗骨肉瘤提供依据,我院于2013年6月——2014年5月展开相关研究,其效果显著,现作如下总结报道。1材料与方法1.1材料细胞系:选择浙江大学药学院培养的人体骨肉瘤MG-63细胞系。药物:木犀草素(Sigma公司产品)试剂:小牛血清(GIBCO公司产品),RPM1640培养基
6、粉剂(GIBCO公司产品),胰蛋白酶(Amersco公司产品),β-actin抗体(Sigma公司产品),IL-6(Sigma公司产品),辣根过氧化物酶标记二抗(Jackson公司产品)。仪器:通用台式冷冻离心机(Sigma公司产品)、倒置相差显微镜(OLYMPUS公司产品)、SG403A-HE生物安全柜(Baker公司产品)、CO2培养箱(Forma公司产品)、全自动高压灭菌锅(ALP产品)、电子分析天平(Sigma公司产品)、紫外-可见光光度计(Hach公司产品)。1.2实验方法1.2.1细胞系培养:将骨肉瘤MG-63细胞系置于37℃、5%CO2培养箱内,以小牛血清(1
7、0%)、100U/ml青霉素、100U/ml链霉素配置而成的RPM1640培养液贴壁培养。倒置荧光显微镜观察骨肉瘤MG-63细胞生长,胰蛋白酶(0.25%)消化传代,选择处于生长期的骨肉瘤细胞进行实验。1.2.2观察骨肉瘤MG-63细胞形态取6孔培养板,每孔分别滴加骨肉瘤MG-63细胞悬浊液1mL,然后分别滴加100μL浓度为1.25g/L、2.5g/L、5g/L、10g/L的木犀草素溶液以及等量磷酸盐缓冲液进行对照,于常规条件下进行培养。24h后使用倒置相差显微镜观察已培养好的肿瘤细胞样本,记录其形态特点,各浓度
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