microrna生物合成酶单核苷酸多态性与结直肠癌发病风险的关系-内科学专业论文

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1、优秀毕业论文河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。.,.、-、v7.一研究生签名建≤字盈导师签章:哆彬钞二级等障领鲁盖章卜硎堂

2、_1年j月巾河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除

3、了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。研究生签名煮这雪7恣导师签章:弓那孑训f年3月7日精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录中文摘要OOOOOO1英文摘要OOOOOoooo4英文缩写0000007研究论文MicroRNA生物合成酶单核苷酸多态性与结直肠癌发病风险的关系前言日Ⅱ吾””““““””””一”“””。”””””””“”””一””””””””””“。8·········8材料与方法9结果······18附图·······

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5、险的关系摘要目的:结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,近年来在包括中国在内的亚洲国家,其发病率与死亡率均已呈逐年上升趋势。MicroRNA(miRNA)是一类广泛存在于真核生物中,长度约为22个核苷酸的小型非编码RNA,miRNA在许多生理病理过程中,如:胚胎发育,细胞的分化、增殖、凋亡以及肿瘤发展和激素分泌等过程都扮演着不可忽视的作用。单核苷酸多态性(Singlenucleotidepolymorphisms,SNP)是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异引发的DNA的多态性变化。MiRNA相关单核苷酸多态性(miRNA.relatedsinglenuc

6、leotidepolymorphisms,miR-SNPs),是指导致miRNA基因调控功能紊乱的一类功能型SNP的总称,其可调节miRNA及靶基因的表达,从而影响肿瘤发生风险、治疗效果及预后。MiR-SNPs包括:miRNA核酸序列SNP,miRNA生物合成酶SNP和miRNA结合位点SNP。MiRNA生物合成酶SNP与人类肿瘤发生风险关系密切,但关于其与结直肠癌关系的研究甚少。本研究对生物合成酶XP05(rsll077),RAN(rsl4035),Dicer(rs3742330),TNRC6B(rs9623117),GEMIN3(rsl97412

7、),GEMIN4(rs2740348)的SNP进行测序分析,结合病例.对照研究,寻找与结直肠癌发生风险相关的特异SNP位点,筛查易患结直肠癌的高危人群。方法:1研究对象:结直肠癌组患者为2006年1月-2008年12月间,在河北医科大学第四医院外科住院的手术患者,经内镜检查、组织病理确诊为结直肠癌,并行结直肠癌根治手术。结直肠癌组137例抗凝静脉血标本,均取自结直肠癌患者术前静脉血样;对照组134例抗凝静脉血标本,均来自2013年10月-2014年10月间,在河北医科大学第四医院体检的正常人,详细记录体检资料,并除外与结直肠癌相关的疾病,取静脉血样。

8、2基因组DNA提取:用DNA纯化试剂盒(Promega,Madison,WI,USA)提取静脉血标本的基因组DNA,提取后置于4"C恒温冰箱中保存备用。3基因组DNA扩增及miR-SNP筛查:在NCBI数据库中查找与6个精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文中文摘要miRNA生物合成酶相关SNP位点对应的目的基因,设计PCR扩增引物,用PCR预混试剂盒进行扩增,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳证实后,送往上海捷瑞生物工程技术服务有限公司用聚合酶链反应.连接酶检测反应(PolymeraseChfinReaction.1igasede

9、tectionreaction,PCR-LDR)方法对XP05(rsl1077),RAN(rs14035),

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