利用食用菌菌渣进行饲料发酵的研究

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1、食用菌菌渣进行饲料发酵的研究报告人指导老师研究目的和意义据中国食用菌协会不完全，像河南、山东等7省，年产量超过万吨，占全国总产的63%；像江西、湖北等9省年产为50~100万吨，由此可见我国食用菌栽培面积广泛。研究目的和意义那么每年产生的食用菌菌渣又将如何处理呢？？研究目的和意义研究目的和意义然而，以上6种处理方法，在农村还未真正使用；目前所使用的处理方法为：(1)当作垃圾丢弃于农村的路旁、河流；(2)作为燃料燃烧。开发菌渣发酵饲料的意义保护环境、提高资源利用率降低畜牧养殖成本维持农业、畜牧业和食用菌产业的可持续

2、发展技术路线食用菌菌渣的主要成分及营养价值主要成分的检测含水量粗蛋白粗脂肪粗纤维粗灰分无氮浸出物磷钙常压干燥法凯氏定氮法索氏抽提法酸碱洗涤法高温灼烧无氮浸出物(%)=1-(粗蛋白%+粗脂肪%+粗纤维%+粗灰分%)定磷试剂法EDTA络合滴定法食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究纤维素降解菌的筛选及酶活力测定纤维素降解菌的富集、分离及纯化1富集分离纯化称取50g木屑香菇菌渣加入250mL的三角瓶中，加入适量自来水，使其含水量达到60%左右，28～30℃培养20d。称取1g经富集的木屑香菇菌渣倒入含玻璃珠的99mL无菌水中

3、，28℃下震荡均匀并浸泡1h，按照常规稀释分离方法，均匀涂布在羧甲基纤维素（CMC）培养基上，28～30℃恒温倒置培养，每个处理三个重复。待菌落长出后，根据各个菌落的形态特征点接至相应的常规培养基斜面上（牛肉膏-蛋白胨培养基、高氏一号培养基、PDA培养基），28～30℃恒温倒置培养，每个处理三个重复，进行多次转接，直到获得纯种。食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究纤维素降解菌的筛选及酶活力测定纤维素降解菌的筛选2初筛将纯化后的但菌落分别接种到纤维素刚果红培养基上28℃恒温倒置培养。复筛采用滤纸降解率法：待菌落长出后，

4、挑选生长快、红色浓郁且水解圈大的菌落分别接种于细菌滤纸培养液、放线菌滤纸培养液、霉菌滤纸培养液中。细菌滤纸培养液置于37±1℃培养2d；放线菌滤纸培养液和霉菌滤纸培养液中置于28℃培养7d；然后将培养物连三角瓶一起烘干，每个处理三个重复，称取滤纸片的重量。滤纸降解率的计算公式如下：食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究纤维素降解菌的筛选及酶活力测定木屑香菇菌渣固体发酵3称取50g粉碎的木屑香菇菌菌渣装入250mL的三角瓶中，121℃灭菌半小时，待其冷却至室温时，将筛选出来的细菌、放线菌、霉菌菌液分别接入三角瓶中，细菌组

5、置于37±1℃140r/min培养；放线菌和霉菌组置于28℃140r/min培养7d；细菌组每隔4h取一次样，放线菌和霉菌组从第24h开始每隔4h取一次样称取1g，4℃保存备用。食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究纤维素降解菌的筛选及酶活力测定纤维素酶活性的测定4纤维素粗酶液的制备纤维素酶活性测定食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究木质素降解真菌的筛选及酶活力测定木质素降解菌的筛选1富集分离纯化复筛称取50g木屑香菇菌渣加入250mL的三角瓶中，加入适量自来水，使其含水量达到60%左右，28～30℃培养20d。称取1g经

6、富集的木屑香菇菌渣倒入含玻璃珠的99mL无菌水中，28℃下震荡均匀并浸泡1h，按照常规稀释分离方法，均匀涂布在培养基1上，28～30℃恒温倒置培养，每个处理三个重复。待菌落长出后，观察菌落形态特征，挑选出能够在平板上生长并产生变色圈的菌株。将其接种于PDA培养基上，28～30℃恒温倒置培养，每个处理三个重复，进行多次转接，直到获得纯种。将纯菌株分别接种PDA培养基斜面上，28℃培养7d后备用有学者研究发现，微生物若能够在含愈创木酚的培养基上产生红棕色的变色圈，则说明该微生物具有降解木质素的能力。将上述获得的纯种接

7、种于培养基2上，28℃培养7d，观察其菌落直径（d1）、变色圈直径（d2），并计算菌落直径与变色圈直径的比值（d1/d2）。选出对木质素有较强降解作用的菌种。食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究木质素降解真菌的筛选及酶活力测定木屑香菇菌渣固体发酵2称取50g粉碎的木屑香菇菌菌渣装入250mL的三角瓶中，121℃灭菌半小时，待其冷却至室温时，将筛选出来的对木质素降解能力最强的仪株真菌接入三角瓶中，保持适合的含水量，置于28℃140r/min培养。每隔3天取样，连续取样30d，4℃保存备用。LipMnPLac木质素过氧化

8、物酶活性的测定反应体系为：酒石酸钠缓冲溶液、藜芦醇、粗酶液，H2O2室温启动反应，在310nm的波长下测定前3min内的吸光值的增加量。酶活力单位的定义：每克样品中每分钟吸光值增加0.001所需要的酶量，定义为1个活力单位（U）。食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究木质素降解菌酶活性的测定2LipMnPLac食用菌菌渣进行饲料发酵的初步研究木质素降解菌酶活性的测定2锰过氧化物