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1、草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究草珊瑚总黄酮的微波提取研究囝2010,VoI27No.1亿与生物Z程Chemistry&Bioengineering草珊瑚总黄酮的微波提取研究刘仙金.周文富(三明学院化学与生物工程系,福建三明365004)摘要:研究了草珊瑚中总黄酮的微波提取工艺.探讨了微波功率,微波作用时
2、问,乙醇体积分数和固液比等因素对草珊瑚总黄酮提取率的影响,通过单因素实验和正交实验确定最佳的提取条件如下:乙醇体积分数60,固液比1:40(g:mL),微波功率400W,微波加热时间30S,间歇作用3次,此时总黄酮的提取率为9.394.微波法是提取草珊瑚总黄酮高效快速的方法.关键词:草珊瑚;总黄酮;微波提取;HPLC中图分类号:TQ461R282.2文献标识码:A文章编号:1672—5425(2009)01—0044—05草珊瑚(Sarcandraeglabra)又名肿节风,九节茶,竹节草,鸭脚节,牛膝头等,属于金粟兰科草珊瑚属,其昧苦,辛,性温,有小毒,有驱风通络,活血祛淤,止血止痛,
3、接骨续筋之功效,民间常用来治疗风湿痹症,跌打损伤等[】叫],多为全草人药.?临床上草珊瑚主要用于治疗肿瘤,胃溃疡,细菌性痢疾,骨折及各种口腔疾病.草珊瑚主要分布在四川,云南,贵州,安徽,福建,江西等地,资源丰富.草珊瑚中含量最多,最主要的药用成分是黄酮类化合物[4].草珊瑚总黄酮具有抗菌消炎,清热解毒,抗肿瘤,促进骨折愈合等多种生物活性叫.毒理学研究表明,草珊瑚及其提取物具有较好的安全性[1.因此,近年来,草珊瑚活性成分的高效提取一直是国内外研究的重要课题.目前,黄酮类化合物的常规提取方法主要有冷浸法,渗漉法,煎煮法,回流提取法,稀醇提取法和微波法.其中微波法具有选择性高,操作时间短,溶
4、剂消耗少,提取率高,不产生噪音等优点,适用于热不稳定生物质药材的提取[1].本研究采用单因素实验和正交实验对三明地区基因工程选育的草珊瑚总黄酮进行提取,得出最佳的工艺条件,拟为三明地区基因工程选育的草珊瑚的开发利用提供有益的参考.1实验1.1原料,试剂与仪器草珊瑚叶片采自福建三明市吉口天然药物种植基地.芦丁标准品,中国药品生物制品检定所;95乙醇,亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,磷酸,分析纯;甲醇,色谱纯;水为超纯水.LWMC-205型可调功率微波化学反应器,南京陵江科技开发有限责任公司;722S型可见分光光度计,FA1604N型电子天平,上海精密科学仪器有限公司;UV一1100型紫外可见分
5、光光度计,北京瑞利;SHB一3型循环水式多用真空泵,郑州杜甫仪器厂;800型离心沉淀器(4000r?min),上海手术器械厂;360型FT—IR红外光谱仪,美国Nicolet公司;1200型高效液相色谱仪,美国安捷伦公司.1.2方法1.2.1草珊瑚总黄酮的提取精确称取0.5g草珊瑚叶片粉末(过120目筛)于锥形瓶中,加入一定量不同质量分数的乙醇摇匀,将瓶口用保鲜膜覆盖,浸泡1h,在一定功率下微波提取一定时间,抽滤,滤液加水定容.1.2.2草珊瑚总黄酮的测定1.2.2.1标准溶液的配制精密称取10.4mg已烘干至恒重的芦丁标准品,置100mL容量瓶中,用60乙醇溶解并定容至刻度,摇匀,得到
6、浓度为0.104mg?mL的标准溶液.1.2.2.2标准曲线的绘制取芦丁标准溶液显色后在400~600nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长为510nm.精密量取芦基金项目:三明市天然药用植物资源开发利用研究中心资助项目(HX2OO801)收稿日期:2009—09—05’作者简介:刘仙金(1986一),女,福建宁德人,硕士研究生,研究方向:中草药提取与药物合成;通讯作者:用文富,教授.E-reall:zff79@sina.corn.刘仙金等:草珊瑚总黄酮的微波提取研究/2010年簟1朋丁标准溶液0.0mL,0.5mL,1.0mL,2.0mL,3.0mL,4.0mL,5.0mL分别置于10m
7、L容量瓶中,各加6O乙醇至5mL;各加5亚硝酸钠溶液0.3mL,摇匀,放置6min;再各加10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀,放置6min;最后各加4氢氧化钠溶液4mL,并用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置15min;在51Ortm处测定吸光度.以芦丁浓度(.z)为横坐标,吸光度(.),)为纵坐标绘制标准曲线,见图1.拟合线性回归方程为:y一1.6894×10+0.013175x;R一0.9999.图1芦丁标准曲线Fig.1Thest