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时间:2018-12-03
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1、微波提取杜仲总黄酮的工艺研究论文【摘要】目的研究微波提取杜仲总黄酮的最佳工艺条件。方法利用微波技术通过正交实验方法,探讨杜仲总黄酮最佳提取工艺条件。结果因素相关性为:乙醇浓度>提取温度>提取时间>料液比;杜仲总黄酮提取的最佳工艺条件为微波时间9min,乙醇浓度60%,提取温度80℃,料液比1∶10。结论微波技术具有提取效率高,提取速度快,能量消耗小等特点,应用于中草药有效成分提取的前景广阔。【关键词】微波技术杜仲总黄酮正交实验杜仲Eumiaulmoides是杜仲科杜仲属植物.freelg,加80%乙醇溶解后定容至25ml。分别移取0.0,0
2、.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml置10ml容量瓶中,各加5%亚硝酸钠0.3ml,6min后加10%硝酸铝0.3ml,放置6min,加4%氢氧化钠溶液4ml,以80%乙醇稀释至刻度,摇匀。在510nm波长下,以空白试剂为参比测定吸光度,得到回归方程为:A=0.1028C-0.0112(R2=0.9905)。2.2样品黄酮含量的测定称取2.0g杜仲粉,加入提取溶剂,放入MDS-6型温压双控微波萃取仪提取。定时取出,过滤,滤液移至100ml容量瓶,定容。分别用分光光度仪,按标准曲线制备各项处理,在510nm波长测定吸光度,代入回归方程,计
3、算总黄酮含量。2.3最佳微波提取条件的确定分别称取2.0g杜仲粗粉,根据预实验结果,选择提取温度,提取时间,乙醇浓度,料液比为实验因素,采用L9(34)按表1方法进行微波提取,提取液过滤,合并滤液,定容至100ml,摇匀备用。2.4对比实验煎煮法:称取杜仲粉10g,加水200ml,浸泡30min,煮沸后,文火煎60min,过滤,共煎煮两次,合并滤液,定容至100ml,摇匀备用。连续回流提取法:称取杜仲粉10g,加60%乙醇200ml,水浴回流90min,过滤,共提取两次,合并滤液,定容至100ml,摇匀备用。表1因素水平(略)3结果3.1正
4、交实验结果见表2。由表2可知,影响杜仲总黄酮提取率的因素主次顺序为:乙醇浓度(C)提取温度(A)提取时间(B)料液比(D),杜仲总黄酮微波提取的最佳工艺条件为:A3B3C1D1,即提取温度为80℃,提取时间为9min,乙醇浓度为60%,料液比1∶10;正交实验的方差分析(见表3)结果显示,乙醇浓度差异显著,对杜仲总黄酮提取率的影响起最主要作用,其它在此实验范围内没有显著差异,对测定结果的影响较小,与直观分析结果(见表2)相吻合。3.2验证实验为考察正交实验得到优选工艺条件的稳定性,按其重复实验6次,杜仲黄酮提取率为2.13mg/g,RSD=
5、0.833%(n=6),说明该工艺稳定可行。表2正交实验结果(略)3.3对比实验结果见表4。由表4可知,微波提取方法的黄酮提取率明显高于其它两种方法,且提取时间最短,提取溶剂用量最少。表3正交实验方差分析结果(略)*表示显著影响,Δ表示影响不显著;F0.1(2,2)=9;F0.05(2,2)=19.0;F0.01(2,2)=99.0表4提取方法比较(略)4结论微波提取杜仲总黄酮的最佳条件为:提取温度80℃,提取时间9min,乙醇浓度60%,料液比1∶10,此时黄酮得率最高,为2.130mg/g。与传统的煎煮法和回流提取法相比,微波提取法具有
6、提取时间短,效率高,而且提取物中杂质相对少等优点。煎煮法和回流提取法由于高温时间较长,很容易使杜仲中的蛋白质、糖类等极性大的物质溶出,造成提取液成分复杂,需要进一步提纯的工序,较微波提取要繁琐。微波提取法应用于中药有效成分的提取是非常有发展前途的。在耗材、提取所用时间、提取得率等方面都有传统方法不可比拟的优势。但目前大多集中于实验室的小批量研究,对于工业化生产的潜在价值,还需要进一步研究。【
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