草珊瑚总黄酮的提取及其注射液的研制和应用的研究

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1、四川农业大学兽医硕士学位论文中文摘要题目:草珊瑚总黄酮的提取及其注射液的研制与应用研究作者:郁建生指导教师:李英伦何照范领域:兽医研究方向:药学本论文内容以贵州地方资源植物草珊瑚为原料,研究草珊瑚有效成分总黄酮的提取分离新技术、新工艺及新兽药草珊瑚注射液的研制与应用。1.采取L,(34)正交试验方法,用沸Jr,-提取及乙醇浸提,确定了对草珊瑚总黄酮的最佳提取工艺条件。沸水提取法:即采用1000C温度、加水量(固液比)10倍、每次1小时、提取2次;乙醇提取法:乙醇浓度60%、提取温度800C、提取时间3小时

2、、提取次数3次。研究表明,乙醇提取法草珊瑚总黄酮提取量高,其提取率是沸水提取法的3.25倍。2.在确定了草珊瑚总黄酮最佳提取工艺条件后,对自然存放时间不同、采摘季节不同、部位不同的草珊瑚原料进行总黄酮含量的动态变化考察。研究表明:草珊瑚自然存放时间越长,总黄酮含量越低,平均每年下降24.74%;不同季节采摘的草珊瑚其总黄酮含量以秋末冬初(10~12月)最高;经对贵州草珊瑚根、茎、叶中总黄酮的提取测定表明,草珊瑚叶中总黄酮含量最高,茎中最低。3.实验表明,AB-8型大孔吸附树脂对草珊瑚总黄酮静态饱和吸附量为

3、126.2mg/g(干树脂),动态饱和吸附量为83.6mg/g(干树脂),总黄酮收率在92%、纯度在80%vg上。是四种实验大孔吸附树脂中对草珊瑚总黄酮纯化精制最佳树脂。洗脱剂为70%乙醇,上柱液pH值以pH4—5时饱和吸附量最大。随着温度升高,树脂饱和吸附量减小而解吸率增大,吸附及解吸时间在1小时后基本达到平衡.4.以芦丁为对照品采用分光光度法测定草珊瑚总黄酮含量,用硝酸铝一亚硝酸钠作显色剂,二者在500rim波长处有最大吸收。经回归处理得方程:C=84.317A—O.77361(C=ug/mL),r=

4、0.9997.回收试验结果表明:其加样回收的平均回收率为98.97%,RSD%=I.85%;样品液在显色后1h内是稳定的。5.定性试验表明,本研究设计的五种方法具有专一性强,操作简便,反应迅速,结四川农业大学兽医硕士学位论文果特异性强而明显,容易观察,达到定性鉴别的目的。6.草珊瑚注射液由草珊瑚全草经二步提取(蒸馏、水醇浸提)、分步配伍的生产工艺提取有效成分后精制而成,成品每毫升含有效成分总黄酮不低于5mg。7.研究表明,草珊瑚注射液中总黄酮含量在存放三年中平均每年降低O.86%;在加热灭菌后降低O.82

5、%,变化甚微,是非常稳定的。强光直射30h可使注射液中总黄酮含量平均下降9.91%,影响较大。注射液的pH值在4~6时总黄酮含量最高。对温度、时间、pH值等影响注射液稳定性因素的研究结果表明,以pH值变化影响较大.灭菌后注射液pH值平均降低O.67,三年存放中平均每年降低0.16%。在八种常用注射液的附加剂中以硫代硫酸钠、亚硫酸钠对总黄酮的稳定性影响较大,可使总黄酮含量降低12.07%~21.98%。在与26种中草药注射液的配伍中,与博落回、苦参、黄柏、虎仗、朱砂莲、地苦胆、十大功劳有配伍禁忌。8.草珊瑚

6、注射液体外抑茵试验结果表明,对所试9种细菌均有不同程度的抑菌效果:其中,对禽巴氏杆菌、猪丹毒杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金色葡萄球菌、大肠杆菌等有较好的体外抑菌作用,对禽巴氏杆菌的lvllC在7.81mg/mL-15.63mg/mL;对大肠杆菌、猪丹毒杆菌、金色葡萄球菌的MIC在15.63mg/mL。9.草珊瑚注射液对小白鼠及家兔采用腹腔注射给药,小白鼠LD,。为38.99/kg;小白鼠对本品的最大耐受量是猪用剂量的150倍;兔对本品的最大耐受量是猪用剂量的133倍(均按体重计)。急性毒性试验动物仔猪、山羊、黄

7、牛、鸡无一发病或死亡,剖检鸡及部分山羊、仔猪其主要器官(心、肝、脾、肺、肾等)均未见有眼观病理变化。试验结果表明本品对动物安全。10.提取草珊瑚有效成分后配伍制成注射液用以治疗家畜流行性感冒、风湿痹症、胃肠炎、仔猪白痢、禽霍乱等疾病,平均治愈率为93.3%;对猪流行性感冒的对比治疗试验其治愈率比青霉素、安乃近、病毒灵对照组高出21个百分点;对仔猪下痢的对比治疗试验其治愈率比青霉素、链霉素对照组高出25个百分点、比氟哌酸对照组高出12个百分点。11.经济效益分析表明草珊瑚注射液项目投资收益率54.45%;投

8、资回收期3.5年~4.5年;销售利润率21.78%;成本利润率34.95%;净现值NPV(i=12%)=925.29万元;内部收益率IRR--32.57%;盈亏平衡点26.34%;投入产出比1:2.5;具有较好的经济效益及社会效益。关键词:草珊瑚总黄酮、提取工艺、草珊瑚注射液、新兽药、研制与应用四川农业大学兽医硕士学位论文ABSTRACTTopic:TheStudiesonExtractiontechnicsoftheFlav

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