乌饭树叶提取液的脱蛋白方法研究

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1、乌饭树叶提取液的脱蛋白方法研究试验研究乌饭树叶提取液的脱蛋白方法研究何志伟刘钟栋邵斌魏国华许新德(1.河南工业大学粮油食品学院,河南郑州450052;2.浙江新昌制药厂,浙江新昌312500)摘-要:本实验以总糖损失率和脱蛋白率为指标,通过对几种脱蛋白方法的比较优化出乌饭树提取液较好的且瞧白方法.选用盐酸法,三氯乙酸法和Sevag法三种常见方法,分别对提取液进行脱蛋白处理,比较可知Sevag法效果较好,为提取液的纯化提供一定的参考.关键词:乌饭树;脱蛋白;提取液;比较Studyontheremovedproteinofvacciniumbractumthu

2、nbIeaveextractHEZhi-weiLIUZhong.dongSHAOBinWEIGuo.huaXUXin.de(1.SchoolofOilandFoodHenanUniversityofTechnology,Zhengzhou450052,China;2.ZhejiangXinchangPharmaceuticalFactory,Xinchang312500,China)Abstract:thelosssacchariderateandtheremovedproteinareconsideredthescaletarget.Themethods

3、ofHC1,CC13COOH,Sevagarechosed,theextractisdisposedwiththeemethodsthatmentionedbefore,throughcomparingthepercentageofthelosssaccharideandtheremovedprotein.Itisconcludedthatthemethodofsaveghasahighper-centageofremovedproteinandisthebestmethodofremovedprotein,whichCansupplysomerefere

4、nceforpurificationoftheextract.Keywords:vacciniumbractumthunb;removalofprotein;extract;comparison乌饭树(VacciniumBracteatumThunb),又名南烛,是一种长绿灌木或小乔木,广泛分布于华南和华东地区的山丘和丘陵地带,乌饭树树叶味淡,具有乌发明目的功能,在其提取液中含有大量天然黄酮类化合物,黑色素,脂类,蛋白质,糖类等_l叫J.在乌饭树提取液中,蛋白质占有相当大的比例,乌饭树叶中黑色素在紫外光区的286nm和309Bin处有特征吸收峰.查阅文献可

5、知_2J,蛋白质对乌饭树叶中黑色素特征吸收峰有相当程度的影响;另外,提取液中多糖类也是一种非常重要的成份,乌饭树叶中多糖在肿瘤,病毒,心血管,抗衰老等方面有独特的生物活性,其多种多样的生物活性功能和在临床上的广泛应用为越来越多科学工作者关注,蛋白质对乌饭树叶中多糖的提取也有影响,故提取乌饭树叶中黑色素和多糖时需要脱去蛋白以尽量减少其影响,但是脱蛋白的方法很多,如何使蛋白质达到不影响的程度并且了解在脱蛋白过程中黑色素和多糖损失情况,是研究乌饭树叶中黑色素和多糖时的首要环节,本研究将探索合理的乌饭树叶提取液脱蛋白条件.1材料与方法1.1设备与材料1.1.1实验

6、材料乌饭树叶(浙江长兴);无水葡萄糖(国药集团化学试剂有限公司);牛血清白蛋白(国药集团化学试剂有限公司);考马斯亮兰G一250(国药集团化学试剂有限公司);浓硫酸(衢州巨化试剂有限公司);苯酚(上海三鹰化学试剂有限公司);氯仿(上海化学试剂有限公司);正丁醇(广东汕头市西陇化工厂);三氯乙酸(国药集团化学试剂有限公司);盐酸(上海三鹰化学有限公司);铝粉(广东汕头市西陇化工厂);碳酸氢钠(温州市华侨化学试剂有限公司);石油醚(中国石化集团杭州炼油厂);磷酸(中国上海试剂总厂)1.1.2实验仪器与设备紫外分光光度计(uV一2450,SHIMADZUCorp

7、oration);台式离心机(AnkeTDLSO一2B,上海安亭科学仪器厂);旋转蒸发器(RE一52D,上海安亭实验仪器有限公司);超声波振荡器(SK2200LH,上海科导超声仪器有限公司);予华循环水真空泵(SHZ—DIII,巩义市予华仪器有限公司);精密pH计(PHS一3C,上海雷磁仪器厂)1.2乌饭树叶色素提取及浓缩工艺乌饭树叶一干燥一÷净化一÷粉碎(20～40目)一溶剂浸提冷却静置一减压抽滤一离心一取上层清液减压浓缩静置一÷离心一÷初步纯化提取液乌饭树叶色素的提取条件为以60%的乙醇在55℃下浸提2h,提取液在经过静置,抽滤,离心等物理过程后用石油

8、醚反复萃取脱脂,得到初步纯化的提取液.1.3标准曲线的制备卅1.3