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《中国汉族人群p-选择素基因多态性的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国汉族人群P-选择素基因多态性的研究临床检验杂志2006年第24卷第4期ChineseJournalofClinicalLaboratoryScience,2006,Vo1.24,No.4285文章编号:1001—764x(2006)04285一D4中图分类号:Q503文献标识码:A?研究生园地?中国汉族人群P一选择素基因多态性的研究明凯华,李艳,夏尊恩,熊小泉(武汉大学人民医院检验科,武汉430060)摘要:目的研究P一选择素(P—selectin)C一2123G,T一1817C,G一1969A,Thr715Pro基因多
2、态性在中国湖北地区健康汉族人群中的分布,比较种族问的基因型及等位基因频率分布差异.方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR.RFLP)的分析方法,检测200名健康者P.selectin基因C一2123G,T一1817C,G一1969A,Thr715Pro的基因型并计算其基因型频率及等位基因频率.结果中国汉族人群P—seleetinC一2123G位点基因型以GG型频率最高,CG型次之,CC型最少,这种基因多态性分布在男女间无显着性差异(P>O.05).与德国和英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显着差
3、异(P均<0.001).P—selectinG.1969A位点基因型以GG型频率最高,GA型次之,未检测到AA型,男女间无显着性差异(P>O.05).与德国和英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显着差异(P均<0.001).P—selectinT一1817C位点基因型以1TI'型频率最高,Tc型次之,CC型最少,男女间也无显着性差异(P>O.05).与英国比较,该位点基因型分布及等位基因频率均存在显着差异(P<0.01).本次实验中未检测到Thr715Pro基因多态性.结论中国湖北地区
4、汉族人群存在P—selectin启动子区C一2123G,G一1969A,T一1817C基因多态性,这种多态性在同种族男女问无差异,在种族问存在着较大的差异.但不存在Thr715Pro基因多态性.关键词:P一选择素;基因多态性;种族黏附分子P-选择素(P-selectin,CD62P)是一类表达在活化内皮细胞及血小板表面的黏附分子,为细胞表面糖蛋白,参与动脉粥样硬化的形成和发展.它是体内的一种促炎细胞因子,有广泛的生物学活性.编码P一选择素的基因定位于人类1号染色体(1q21—24)上一段长50kb的DNA序列,包含l7个外显
5、子和l6个内含子….P.selectin基因存在l3个位点的多态性J,其中C-2123G,T.1817C,G.1969A,Thr715Pro基因多态性在国外已有相关的报道.我们研究P-selectin上述4个位点在中国健康人群中的分布特点,为群体遗传学研究提供基础资料.1对象与方法1.1研究对象湖北地区无血缘关系的汉族人200例,均为本院体检健康者,各项临床及实验室检查指标均正常.男性123例,女性77例,年龄23—69岁,平均年龄(47.4±12.5)岁.取空腹12h静脉血,一70℃保存备用.1.2实验方法1.2.1人类基
6、因组DNA提取参照文献[3].1.2.2引物设计与合成参照有关文献],由北京赛百盛公司合成.见表1.1.2.3PCR扩增条件PCR反应体系均为25l,其中10×PCRbuffer2.5ixl,2.5mmolfLdNTPs2.0l,引物Pl,P2各20pmol,模板DNA5.0ixl,DNA聚合酶1U,不足体积用灭菌重蒸馏水补足至25l.置热循环仪(GeneAmpPCRSystem2700型,USA)扩增.具体条件见表2.1.2.4扩增产物的限制性酶切酶切条件见表3.染色后用法国VL凝胶成像系统判断结果.表1P-selecti
7、n4个位点特异性引物1.3统计学方法所有资料均以SPSS11.5软件包分析.基因型和等位基因频率采用直接基因计数法计算,然后经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验各基因型频率是否已达遗传平衡,具有群体代表性.:l:基金项目:湖北省卫生厅科研基金(JX1B014).作者简介:明凯华,1979年生,男,医学硕士,从事炎症因子与冠心病相关性研究.通讯作者:李艳,E—mail:yanliff@yahoo.com.ca.286临床检验杂志2006年第24卷第4期ChineseJournalofClinicalLaborator
8、yScience,2006,Vo1.24,No.4单个基因型及组间等位基因频率比较采用四格表x检验.男女间及不同种族间P—selectin基因频率比较采用RXC列联表x检验.P<0.05为有统计学意义.表2P—selectin4个位点扩增条件位点(Biolabs篡司)h凝胶电泳方式物
