山羊fgf21基因克隆及其在肌内脂肪细胞中的表达模式研究_李倩

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1、畜牧兽医学报２０１７，４８（１）：３１－３８ＡｃｔａＶｅｔｅｒｉｎａｒｉａｅｔＺｏｏｔｅｃｈｎｉｃａＳｉｎｉｃａｄｏｉ：１０．１１８４３／ｊ．ｉｓｓｎ．０３６６－６９６４．２０１７．０１．００４山羊ＦＧＦ２１基因克隆及其在肌内脂肪细胞中的表达模式研究李倩１，２，林亚秋１，朱江江１，２，林森１，２，张小玉１，王永１，２＊（１．西南民族大学生命科学与技术学院，成都６１００４１；２．青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室，成都６１００４１）摘要：本研究旨在获得山羊ＦＧＦ２１基因序列，阐明其组织表达特

2、性，同时检测ＦＧＦ２１基因与ＦＧＦ受体（ＦＧＦＲ）在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达水平。以简州大耳羊为试验动物，采用ＩＩ型胶原酶消化获得山羊原代肌内前体脂肪细胞，采用ＲＴ－ＰＣＲ技术克隆山羊ＦＧＦ２１基因，利用荧光定量ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）技术检测ＦＧＦ２１基因在成年山羊不同组织中的表达特性及ＦＧＦ２１与ＦＧＦ受体在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达差异。结果，克隆获得山羊ＦＧＦ２１基因（ＧｅｎＢａｎｋ登录号：ＫＴ２８８１９５）全长序列６６６ｂｐ，其中开放阅读框６３０ｂｐ，编码２０９个氨基酸。ＦＧ

3、Ｆ２１ｍＲＮＡ在山羊心、肝、脾、肺、肾、脂肪和背最长肌中均检测到表达，且在肝和脂肪中存在较高水平表达。ＦＧＦ２１基因与ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２表达模式相同，均是在诱导分化第２天的肌内脂肪细胞中表达水平最高，极显著高于其他天数（Ｐ＜０．０１）。ＦＧＦ２１基因在山羊脂肪组织中存在较高水平的表达，并且在诱导分化的肌内前体脂肪细胞成脂分化第２天表达水平最高，推测其可能通过受体ＦＧＦＲ１或ＦＧＦＲ２在山羊肌内前体脂肪细胞分化早期发挥调控作用，此研究结果为进一步揭示ＦＧＦ２１基因在山羊肌内脂肪沉积中的作用机制提供了

4、数据支持。关键词：ＦＧＦ２１；ＦＧＦＲ；山羊；克隆；表达；肌内前体脂肪细胞中图分类号：Ｓ８２７；Ｓ８１３．１文献标志码：Ａ文章编号：０３６６－６９６４（２０１７）０１－００３１－０８ＣｌｏｎｉｎｇｏｆＧｏａｔＦＧＦ２１ＧｅｎｅａｎｄＩｔｓＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＰａｔｔｅｒｎｉｎＩｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒＡｄｉｐｏｃｙｔｅ１，２，ＬＩＮＹａ－ｑｉｕ１，ＺＨＵＪｉａｎｇ－ｊｉａｎｇ１，２，ＬＩＮＳｅｎ１，２，ＺＨＡＮＧＸｉａｏ－ｙｕ１，ＷＡＮＧＹｏｎｇ１，２＊ＬＩＱｉａｎ（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃ

5、ｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１，Ｃｈｉｎａ；２．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅｆｏｒＱｉｎｇｈａｉ－ＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕＡｎｉｍａｌＧｅｎｅｔｉｃＲｅｓｏｕｒｃｅＲｅｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＥｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ，Ｃｈｅｎｇｄｕ６１００４１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｇｏ

6、ａｔＦＧＦ２１ｇｅｎｅ，ｅｌｕｃｉｄａｔｅｔｈｅｅｘ－ｐｒｅｓｓｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＦＧＦ２１ｇｅｎｅｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＦＧＦ２１ａｎｄＦＧＦＲｄｕｒｉｎｇｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．ＪｉａｎｚｈｏｕＢｉｇ－ｅａｒｅｄｇｏａｔｗａｓｕｓｅｄａｓｌａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｉｍａｌｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ．Ｔｈｅｇｏａｔｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅ

7、ｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｕｓｉｎｇｃｏｌｌａ－ｇｅｎａｓｅＩＩ．ＲＴ－ＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｃｌｏｎｅＦＧＦ２１ｇｅｎｅ．Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ（ｑＰＣＲ）ｗａｓｐｅｒ－ｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＦＧＦ２１ｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＦＧＦ２１ａｎｄｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒｓｄｕｒｉｎｇｇｏａｔｉｎｔｒａｍｕｓｃｕｌａｒｐｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｆｕｌ

8、ｌ－ｌｅｎｇｔｈｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｇｏａｔＦＧＦ２１ｇｅｎｅｗａｓ６６６ｂｐｉｎｃｌｕｄｉｎｇａｃｏｍｐｌｅｔｅ６３０ｂｐｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ（ＯＲＦ），ｅｎｃｏｄｉｎｇ２０９ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ（ＡｃｃｅｓｓｉｏｎＮｏ．：ＫＴ２８８１９５）．ＦＧＦ２１ｇｅｎｅｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎａｌｌｅｘａｍｉｎｅｄｔｉｓｓｕｅｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｈｅａｒｔ，ｌｉｖｅｒ，ｓｐｌｅｅｎ，ｌｕｎｇ，ｋｉｄｎｅｙ，ａｄｉｐｏｓｅｔｉｓｓｕｅａｎｄｌｏｎ