survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和smac-diablo基因表达的影响

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1、Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC-DIABLO基因表达的影响2007,27(10)南方医科大学(JSouthMedUniv)?1571?Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响孙艳,李勇2范立侨2吴小华,程建新,赵群(河北医科大学第三医院妇产科,2第四医院外三科,第四医院妇产科,河北石家庄050051)摘要:目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin,Smac/DIAB

2、LO表达的影响.探讨survivin,Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制.方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导survivinASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性.流式细胞学技术检测细胞凋亡指数,细胞周期分布及survivin,Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin,Smac/DIABLO基因表达改变.结果同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48hIC在600nmoF1左

3、右.用600nmol/LASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.367l,P<0.05);更多的细胞停留在G0/Gl期(t=10.3832,P<0.01).SurvivinmRNA和蛋白表达明显下调(t_3.503l,P<0.05,t=7.8146,P<0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.801l,P<0.05,t=l1.3917,P<0.01).结论ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/Gl期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下

4、调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin,Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期,凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生,发展的重要分子机制之一.关键词:卵巢癌;survivin基因;Smac/DIABLO基因;ASODN中图分类号:R392文献标识码:A文章编号:l673-4254(2007)l0一l571.04EffectsofsurvivinantisenseoligonucleotidesonsurvivinandS,∞geneexpressioninov

5、ariancancercellsSUNYan,LIYong2,FANLi—qiao,WUXiao—hua3,CHENGJiang-xin3,ZHAOQun2DepartmentofGynecologyandObstetrics,111打dAffiliatedHospital,111打dDepartmentofSurgery,ForthAffiliatedHospital,DepartmentofGynecologyandObstetrics,ForthAffiliatedHospital,HebeiMedicalUni

6、versity,Shijiazhuang050051,ChinaAbstract:0bjectiveToobservetheeffectofsurvivinantisenseoligonucleotidesfASODN)onsun,ivinandSmacgeneexpressioninovariancancerSKOV3cellsandexploretheroleofsurvivinandSmacgenesinASODN—inducedovariancancereellcyclealterationandapoptos

7、isanditsmolecularmechanisms.MethodsSurvivinASODNwasintroducedviaLipofectaminer~e2000intoSKOV3cells.whosegrowthactivitywasdetectedsubsequentlywithM[TTassay.Theapoptosisindex.cellcycleandchangesinsurvivnandSmacproteinexpressionweredeterminedusingflowcytometry.111e

8、changesin删/vnandSmacmRNAexpressionweredetectedbvRT.PCR.ResultsIncomparisonwiththecontrolcells,cellstransfectedwithdifferenceconcentrationsofsurvivinASODNexhibitedsign

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