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时间:2018-07-15
《小鼠不同发育阶段肾小体细胞增殖的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、小鼠不同发育阶段肾小体细胞增殖的实验研究【摘要】目的研究小鼠不同发育阶段肾小体细胞增殖的规律并探讨其作用。方法选择不同胚龄和生后日龄小鼠肾脏做常规光、电镜标本,并采用免疫组织化学方法测定不同发育阶段肾小体内PCNA阳性细胞表达率。结果PCNA免疫组织化学染色显示在Ⅰ和Ⅱ期肾小体内几乎所有细胞呈PCNA强阳性反应,Ⅲ、Ⅳ期肾小体内PCNA阳性细胞数逐渐减少,在Ⅴ期肾小体内PCNA阳性细胞少见。电镜观察所见:早期肾小体(Ⅰ、Ⅱ)所有细胞核分裂相机率均高,Ⅲ期肾小体中的内皮细胞、足细胞核分裂相机率高,Ⅳ期肾小
2、体中只见到内皮细胞核分裂相。结论研究结果说明细胞增殖在小鼠肾小体发育、形成中有着重要的作用。【关键词】肾小体发育细胞增殖StudyonProliferationinDevelopingRenalGlomeruliinMiceWANGXu,GUOMin(DepartmentofHistologyandEmbryology,LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shenyang111001China;DepartmentofHistologyandEm
3、bryology,LiaoningMedicalUniversity,Jinzhou121001China)【Abstract】ObjectiveTostudytherulesofcellproliferationinmouseglomeruliatdifferentstagesofdevelopment.MethodsTheembryonicandpostnatalmousekidneyswerechoosedforstudybylightandelectronmicroscopy,andPCNAim
4、munohistochemistrymethodwereusedtoobserveproliferationwithincorpuscleatdifferentstagesofdevelopment.ResultsNearlyallcellsinⅠandⅡstageshadnuclearPCNAimmunolabeling.ThenumberofPCNAimmunolabelingcellsduringⅢandⅣstageswasgraduallydecreased,andtolessinⅤstage.
5、ElectronmicroscopyrevealedthatthemitoticactivitywasobservedinallcellsofⅠandⅡstagesrenalcorpuscles.ThemitoticphasesofendothelialcellsandpodocytescouldbeseeninⅢstage,butonlyendothelialmitoticactivitiesinIVstageofrenalcorpuscle.Apoptoticactivitiesofendothel
6、ialcellandBowmansparietalcellwerenoted.ConclusionsTheresultssuggestthatproliferationplayanimportantroleintheformationofglomeruli.【Keywords】renalcorpuscle;development;celluarproliferation肾脏发育的基础是细胞的增殖与分化,它存在于肾脏发生发育的全过程。但在肾脏发育的不同阶段细胞的增殖分裂状况有着不同的变化,其增殖状况的变
7、化与肾脏的结构和功能有着密切的关系。PCNA作为一种核内蛋白,它的合成和表达与细胞增殖状态密切相关,故近年来学者们把它作为衡量胚胎发育中组织内细胞增殖水平的一个客观指标。因此它表达的多少、时间和部位可直接反映肾脏发育中的增殖规律。目前关于不同阶段小鼠肾小体中的细胞增殖的定量研究较少,因此本文通过PCNA染色方法及电镜技术对小鼠发育不同阶段肾小体细胞增殖进行了系统观察,现报告如下。1材料和方法1.1动物选择和胚(日)龄计算选用成年健康昆明小白鼠,雌、雄同窝饲养,以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄(emb
8、ryonicdays,E)0天。记录受孕时间,然后将孕鼠分笼饲养。饲养2周后,每日早8时、晚5时观察生产情况,以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后(neonataldays,N)0天。记录出生日期,与母鼠同窝饲养。选取E14,E16,E18天胎鼠,生后1,3,7天仔鼠处死。取出左右肾脏进行观察。每组取4只鼠,每只母鼠取2只胎鼠或仔鼠。1.2光、电镜标本的制作将孕鼠用乙醚麻醉后剖腹取出胎鼠,胚龄14、16、18天的胎鼠剖腹取出左右肾脏。生后1,
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