造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞的天然免疫黏附功能及对nk细胞杀伤活性的影响论文

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1、造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞的天然免疫黏附功能及对NK细胞杀伤活性的影响论文张乃红，冯玫，鹿育晋朱镭，刘洁，高鸿鹏，李为民，乔振华【摘要】本研究探讨造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞天然免疫黏附功能及红细胞对NK细胞杀伤活性的影响。外周血枸橼酸钠抗凝，检测红细胞在自身血浆条件下对K562细胞的免疫黏附并计算黏附率。用MTT法测定红细胞对正常NK细胞杀伤K562细胞活性的影响.freelmuneAdheringFunction(ENIAF)inPatientsatopoieticandLymphoidNeoplasmsandItsEffectonNKCellK

2、illingActivityAbstractTheobjectiveofthisstudymuneadheringfunction(ENIAF)inselfplasmaofpatientsatologicandlymphoidneoplasmsanditseffectonthekillingactivityofNKcells.Theaofpatientsorcontrolsixedinutes.OneK562cellattachedbyoneormoreerythrocytesnormolpersonsedbyRBCsof21normalcontro

3、lsandK562cellsedbyRBCsof24patientsandK562cellsatologicandlymphoidneoplasmsalindividuolsalcontrolsbutdecreasedby4.3%±7.6%atopoieticandlymphoidneoplasmsdecreases,acpanyingthereductionofthekillingactivityofNKcellstoK562cells,sotodetectchangeofENIAFmaybehelpfulfortheassessmentofthei

4、mmunologicalfunctionofpatientsatopoieticandlymphoidneoplasms.Keyatopoieticneoplasm;lymphoidneoplasms;erythrocyte;innateimmuneadheringfunction;NKcell红细胞作为天然免疫的一个重要的构成部分，是机体免疫平衡和稳定的重要基础［1］。红细胞能够结合、固定、聚集免疫复合物或微生物，将其呈递给吞噬细胞［2，3］，使吞噬细胞的吞噬作用增强4-6倍。红细胞具有免疫调节作用，能够增强T细胞依赖的免疫应答，调节B细胞的活化及I

5、g的产生，调节补体的活化过程，还能促进NK细胞的杀伤作用。研究表明，NK细胞直接介入控制AML的复发；把NK细胞植入NOD/SCID小鼠排斥了植入的AML细胞，这也证明NK细胞对移植的AML有异体反应性。红细胞的NK细胞增强因子（naturalkillercellenhancingfactor，NKEF）是抗氧化剂家族的重要成员，它存在于红细胞质内，能够显著增强NK细胞对K562杀伤活性。造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞的天然免疫黏附功能及对NK细胞杀伤活性的影响王海滨等［4］建立了红细胞天然免疫黏附功能的快速检测方法。该方法操作简单、重复性高和稳定性好。

6、我们应用此方法研究了造血和淋巴组织肿瘤患者红细胞对K562细胞的天然免疫黏附功能，用MTT法测定了造血与淋巴组织肿瘤患者红细胞对正常人来源的NK细胞杀伤K562细胞活性的影响。材料和方法病例来源造血与淋巴组织肿瘤患者来源于山西省人民医院或山西医科大学第二附属医院血液科门诊及住院患者，正常对照者为门诊体检的健康人，年龄、性别构成一致，具有可比性。患者24例，男性15例，女性9例，年龄19-57岁，其中CML3例，AML10例（M36例，M42例，M52例），MDS1例，ALL7例，MM2例，NHL1例。正常对照21例，男性13例，女性8例，年龄18-48

7、岁。患者血标本采集时间为初诊或化疗3周以后，以避免药物对检测结果的影响。主要仪器CO2培养箱（HeraeusandLISHEN公司生产），培养瓶（50ml），超净工作台，自动双重纯水蒸馏器（苏州净化设备厂生产），高速离心机(centrifuge5810R型)，水浴锅，可调微量加样器、微量滴头，普通、倒置显微镜（Olympas），骨髓图象分析仪(天津），细胞记数板，40孔酶标板，流式细胞仪（Conlter公司产品），酶标仪分光光度计（北京六一仪器产品）。主要试剂1640培养基购自晶美公司，10%胎牛血清，戊二醛，姬姆萨染液。淋巴细胞分离液（Ficoll液

8、），磷酸缓冲液（PBS），MTT粉末、DMSO购自晶美公司。K562细胞培养K562细胞购自中