酪丝亮肽对人肝癌bel7402细胞的抑制作用及对nk细胞杀伤活性的影响

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1、酪丝亮肽对人肝癌BEL7402细胞的抑制作用及对NK细胞杀伤活性的影响.L.编辑。【摘要】　　［目的］研究三肽化合物酪丝亮肽（tyroserleutide，YSL）对人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤的抑制作用及对自然杀伤细胞（NK细胞）杀伤活性的影响。［方法］建立人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤模型，观察YSL对肿瘤生长的抑制作用；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测YSL对正常小鼠及人肝癌BEL7402荷瘤鼠的NK细胞杀伤活性的影响。［结果］YSL[160μg/（kg·d）]能抑制BEL7402的生长，肿瘤抑制率为72.23%，且能增强BEL

2、7402荷瘤裸鼠及正常小鼠NK细胞杀伤活性，与生理盐水组相比均具有显著性差异（P<0.05）。［结论］YSL对人肝癌BEL7402裸鼠移植瘤有抑制作用，并具有增强正常及荷瘤小鼠NK细胞杀伤肿瘤细胞活性的作用。【关键词】酪氨酸　丝氨酸　亮氨酸　小鼠　裸　肿瘤　实验性　肝肿瘤　杀伤细胞　天然　　InhibitiveEffectofTripeptideTyroserleutid（YSL）onHumanHepatocellularCarcinomaBEL7402cellsandItsEffectontheActivityofNKCellAb

3、stract:［Purpose］Toinvestigatetheinhibitiveeffectoftripeptidetyroserleutide（YSL）onhumanhepatocellularcarcinomaBEL7402transplantedtumorinnudemiceanditseffectontheactivityofnaturalkillercells(NKcell).［Methods］HumanhepatocellularcarcinomaBEL7402transplantedtumormodelinnudemic

4、eorgroalmiceandinnudemicetransplantedaBEL7402ethylthiazolyltetrazolium(MTT)colorimetricassay.［Results］YSL[160μg/(kg·d)]couldinhibitthegroorBEL7402innudemice,orinhibitionrate72.23%,andcouldenhancetheactivityofNKcellinnaturalmiceandinnudemicetransplantedaBEL7402,aBEL7402tra

5、nsplantedtumor,andcanenhancetheactivityofNKcell.Keyice,nude;neoplasms,experimental;liverneoplasms;killercells,natural酪丝亮肽是我国自主研发的小分子多肽化合物，由三个氨基酸组成，化学结构组成为L酪氨酰L丝氨酰L亮氨酸，分子结构式为C18H27N3O6，分子量为381.42，中国国家药典委员会批准通用名称为酪丝亮肽（Tyroserleutide，YSL）。YSL在前期研究结果显示出较强的抗实验性肝癌作用[1,2]，2003年9

6、月中国国家药品与食品管理局（SFDA）批准，进入Ⅰ期及Ⅱ期临床实验研究，已取得初步疗效。本课题对此化合物的抗肿瘤作用及相应机制进行初步探讨。1材料与方法1.1药品及主要试剂YSL由深圳康哲药业有限公司提供，RPMIMedium1640培养液购自GIBCO试剂公司，胎牛血清购自Hyclone试剂公司，MTT购自SIGMA试剂公司。1.2细胞株YAC1细胞株，天津医科大学免疫教研室保存。1.3实验动物健康BALB/c小鼠（CLA即清洁动物级），雄性，6~8周龄，体重18g~22g，购自军事医学科学院实验动物中心。健康BALB/c(nu/nu)

7、裸鼠（SPF即无特定病原体动物级），雄性，4~5周龄，体重18g~22g，与荷人肝癌BEL7402裸鼠均购自中国医学科学院肿瘤研究所动物中心。于独立换气的无特定病原体的层流柜中饲养，所用饲料、垫料、饮用水均为无菌处理，严格按照NIH标准（安全操作号：A38731）进行。1.4YSL对正常小鼠NK细胞杀伤活性的影响[3]将30只健康BALB/c小鼠随机分为YSL不同剂量组[160μg/(kg·d)、80μg/(kg·d)]、生理盐水组，每组10只，连续腹腔注射给药，每日1次，连续给药28d。于给药结束后次日处死小鼠，无菌条件下取脾脏，常规制

8、备脾细胞悬液，以PRMI1640液调整细胞浓度为4×106个/ml，将已达到对数生长期的YAC1细胞制成1×105/ml[4]，于96孔细胞培养板中加入各组小鼠脾细胞悬液100μl/孔和细胞培