桥本甲状腺炎中trail及其死亡受体dr4，dr5的表达论文

《桥本甲状腺炎中trail及其死亡受体dr4，dr5的表达论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、桥本甲状腺炎中TRAIL及其死亡受体DR4，DR5的表达论文.freelornecrosisfactor;ligands;recep-tors;thyroiditis，autoimmuneAbstract:AIMToinvestigatethesignificenceoftheex-pressionofTNF-relatedapoptosis-inducingligand（TRAIL），deathreceptor4（DR4）anddeathreceptor5（DR5）inthepathogenesisandp

2、athologicalchangesinHashimoto’sthy-roiditis（HT）.METHODSExpressionsanddistributionsofTRAIL，DR4andDR5inthyroidtissuesfrom18patientsmunohistochemicalandinsituquantificationmethods.RESULTSTherelativeamountsofpositiveimmunostainingforTRAIL，DR4andDR5inthyrocytesf

3、romHTandNTGpatientsountsofpositiveimmunostainingforTRAIL，DR4andDR5inthyrocytesfromHTpatientsthenontoxicgoiter（NTG）pa-tients（P0.05）.Stronglypositiveimmunostainedthyro-cytesofHTforTRAIL，DR4andDR5ainlydistribut-edinfolliclesadjancenttolymphocyticinfiltrates.St

4、ainingofinfiltratinglymphocytesforTRAIL，DR4andDR5HTmunostainingofinfil-tratinglymphocytesforTRAIL，DR4andDR5ayleadtotheirdestructionthroughapop-tosis.0引言桥本甲状腺炎（HT）是器官特异性自身免疫性疾病，以甲状腺组织中大量淋巴细胞浸润和甲状腺滤泡细胞破坏为特征，其发病机制尚不清楚.近年的研究表明细胞凋亡在HT的发病机制中起重要作用［1，2］，尤其对凋亡分子FasL

5、、Fas的研究中发现其在HT病理改变中起重要作用［3］.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）是新发现的凋亡分子，在许多组织中存在，与其两个死亡受体DR4（TRAILR1），DR5（TRAILR2）相互作用，诱导许多组织来源的肿瘤细胞株迅速凋亡.TRAIL的另两个诱捕受体DcR1（TRAILR3）缺乏死亡功能区，DcR2（TRAILR4）胞内区只含有死亡功能区的1/3，因而不能介导凋亡，但可以抑制DR4，DR5介导的凋亡［4］.有实验［5］证实活性T淋巴细胞表达TRAIL并对其诱导的细胞凋亡敏感.因此推测

6、TRAIL及其受体在维持免疫系统对自身抗原的免疫耐受和组织自身稳定中起重要作用.而HT中有较多的甲状腺滤泡细胞发生凋亡，且多发生在浸润淋巴滤泡附近［1，2，6］.对于TRAIL在HT中是否表达尚未见报道，本实验旨在观察HT中TRAIL及其死亡受体的表达和分布，以探讨其在HT中发病机制和病理改变中的作用.1材料和方法1.1材料取1996/2000在西京医院普通外科活检及手术并经病理诊断为HT的18例甲状腺标本;对照组非毒性甲状腺肿（NTG）18例，所有病例均未经药物治疗.所有标本经40gL-1多聚甲醛固定，常规

7、石蜡包埋，制成5μm连续切片，贴于预先涂有APES的载玻片上，37℃烤箱36h，鼠抗人TRAIL，DR4和DR5单克隆抗体由第四军医大学免疫学教研室惠赠.SABC试剂盒购自华美生物工程公司，DAB购自Sigma公司.1.2方法①组织切片经二甲苯、纯乙醇常规脱蜡至水.②用30mLL-1甲醇-双氧水室温作用30min，以封闭内源性过氧化物酶.③滴加1∶200稀释的小鼠抗TRAIL，DR4和DR5单克隆抗体于4℃过夜.④加1∶100的生物素标记的抗小鼠IgG抗体室温孵育2h.⑤加1∶50的ABC复合物室温孵育1h.

8、以上各步骤之间均用0.01mLL-1PBS（pH7.3）洗10min×3次.⑥用DAB显色液（含DAB5.0mg，0.01mLL-1PBS40mL和300mLL-1双氧水40μL）显色30min.⑦脱水、透明及DPX封片.⑧结果观察及记录.采用OLYM-PUSBH-2光学显微镜观察并摄片.免疫阳性产物为棕黄色，以正常羊血清及PBS代替一抗染色，作为阴性和空白对照.密封片号情况下，用LE-ICAQ50