桥本甲状腺炎甲状腺组织trail、caspase

《桥本甲状腺炎甲状腺组织trail、caspase》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、桥本甲状腺炎甲状腺组织TRAIL、Caspase【摘要】目的研究桥本甲状腺炎（HT）患者甲状腺组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）的表达及其在HT发病和病理改变中的意义。方法采用SP免疫组织化学方法检测26例HT（HT组）和12例正常甲状腺组织（对照组）中TRAIL、caspase3的表达情况。结果（1）TRAIL、caspase3在HT组呈高表达，多见于浸润淋巴细胞旁的甲状腺滤泡上皮细胞；而浸润的淋巴细胞TRAIL染色阴性，caspase3染色呈弱阳性。（2）TRAIL的表达阳性率

2、在HT组明显高于对照组(72.92%vs41.67%，P<0.05)，前者滤泡上皮细胞的表达强度明显高于后者[（0.051±0.016）vs（0.016±0.010），P<0.05]。(3)caspase3的表达阳性率在HT组明显高于对照组(92.31%vs33.33%，P<0.01)，滤泡上皮细胞的表达强度明显高于对照组[（0.065±0.025）vs（0.022±0.008），P<0.05]。(4)TRAIL与caspase3的表达程度呈正相关(rs=0.631，P=0.001)。结论TRAIL与caspase3可能

3、共同参与HT的病理演变过程，通过表达TRAIL激活caspase3而诱导甲状腺滤泡细胞凋亡，损伤甲状腺组织。【关键词】肿瘤坏死因子胱氨酸天冬氨酸蛋白酶桥本甲状腺炎（Hashimoto’sthyroiditis，HT）是器官特异性自身免疫性疾病，以免疫活性细胞浸润、甲状腺特异性自身抗体和甲状腺自身抗原特异性T淋巴细胞存在以及滤泡结构的破坏为特征，是引起甲状腺功能减退症的最常见原因，其发病机制尚不清楚。研究表明细胞凋亡在HT的发病机制中起重要作用[1]。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL，Apo2L)为肿瘤坏死因子超家族（TNFRSF）的成员，是一个新

4、近发现的与FasL同源的死亡配体，与死亡受体DR4、DR5结合诱导细胞凋亡。天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）则是细胞凋亡重要的效应分子，活化DNA酶，降解染色体，最终引起细胞凋亡。笔者通过免疫组织化学方法，检测HT患者甲状腺组织中TRAIL、caspase3的表达，探讨TRAIL、caspase3在HT发病机制及病理改变中的意义。1对象与方法1.1对象选取20012005年手术切除并经病理确诊为HT的甲状腺组织标本26例（HT组），男性3例，女性23例，中位年龄44.5岁（27～63岁）。选择20042005年住院甲状腺腺瘤患者

5、腺瘤旁正常组织12例（对照组），男性1例,女性11例,中位年龄32岁（20～68岁）。2组患者术前均未接受药物及同位素治疗。1.2方法鼠抗人TRAIL单克隆抗体（美国RD公司）；鼠抗人caspase3单克隆抗体（美国LABVISION公司）；免疫组织化学试剂盒（深圳晶美生物工程有限公司）。采用SP免疫组织化学染色方法检测TRAIL、caspase3，操作按说明书进行。用已知阳性片作为阳性对照，同时用PBS替代第一抗体作阴性对照。1.3结果判断与图像分析阳性染色细胞质呈棕黄色。根据细胞质的染色强度逐渐加深进行评分，分为1,2,3分；根据着色细胞百分率进行

6、评分，分为1，2，3，4分。将每张切片染色强度得分与着色细胞百分率得分各自相乘为其最后得分：0分为阴性（－），1～2分为弱阳性（＋），3～4分为中等阳性（），≥6分为强阳性（）。采用图像分析系统（CMIASB型，北京航空航天大学图像中心、空军总医院）测定阳性甲状腺滤泡上皮细胞的TRAIL、caspase3的平均光密度（D）值，即阳性细胞质单位面积内TRAIL、caspase3的相对含量，单位为AU(arbitraryunits)。1.4统计学处理应用SPSS11.0统计软件包进行分析。两样本率差别检验用四格表Fisher确切概率法；所得定量资料采用

7、t检验，方差不齐时行t＇检验；变量之间相关关系的比较，采用非参数统计中的等级资料Spearman秩相关作数据分析。P＜0.05为界值。2结果2.1免疫组织化学染色2.1.1TRAIL染色HT组阳性细胞分布不均匀，强阳性细胞多集中在淋巴滤泡和生发中心附近的甲状腺滤泡上皮细胞，部分甲状腺滤泡已萎缩、破坏，失去滤泡结构，滤泡内无胶质；另一部分甲状腺滤泡结构完整，阳性染色上皮细胞多为立方状或低柱状，HT中浸润淋巴细胞TRAIL不染色。对照组中TRAIL仅见于少数甲状腺滤泡上皮细胞（图1）。HT组与对照组TRAIL阳性表达率比较见表1。A：对照组阳性细胞仅见于少数甲状

8、腺滤泡上皮细胞;B：桥本甲状腺炎组阳性细胞集中在浸润