高碘对桥本甲状腺炎大鼠trail表达的影响论文

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1、高碘对桥本甲状腺炎大鼠TRAIL表达的影响论文张雅萍，帖丽丽，张南雁，姬秋和【关键词】碘；TRAIL；甲状腺炎,自身免疫性EffectofiodineexcessonTRAILexpressioninratsotosthyroiditis【Abstract】AIM:ToexplorethesignificanceoftheexpressionofTRAILinthepathogenesisandpathologicalchangesinthesituationofiodineexcessinratsentalautoimmunet

2、hyroiditis(EAT).METHODS:FemaleSDratsalmodelsandfedonhighiodinedietsinthisstudy.Immunohistochemicalmethodsalcontrolgroup,EATmodelgroupandEATiodineexcessgroup(P0.05).StronglypositiveimmunostainedthyroidfollicularcellsofEATratsforTRAILmainlydistributedadjacentlytoinfiltr

3、atinglymphocytes.StainingofinfiltratinglymphocytesforTRAILightinducethyrocyteapoptosisbyincreasingtheexpressionofTRAIL,thusresultinginthyroidfollicledestruction.【Keymune【摘要】目的：观察高碘环境下桥本甲状腺炎大鼠（EAT）TRAIL的表达在发病机制及病理变化中的作用及意义.方法：采用雌性SD大鼠制作EAT模型，给予高碘饮食，采用免疫组织化学方法和图像分析，检测高碘

4、环境下EAT大鼠甲状腺TRAIL的表达及分布.结果：大鼠甲状腺滤泡细胞中TRAIL的免疫染色阳性率在正常对照组，EAT对照组和EAT高碘组依次增高(P0.05).桥本甲状腺炎大鼠中TRAIL免疫染色强阳性甲状腺滤泡细胞多分布于浸润淋巴滤泡附近,浸润淋巴细胞中TRAIL免疫染色较弱.结论：EAT大鼠TRAIL在甲状腺滤泡细胞中呈有特征性分布的高表达.freelotosthyroiditis,HT）中甲状腺细胞凋亡的调控.目前高碘对Fas,FasL和bcl2表达的影响均有报道［2］，但高碘对桥本甲状腺炎中TRAIL表达途径的影响少见报

5、道.我们采用免疫组织化学方法和图像分析,检测高碘环境下桥本甲状腺炎大鼠（experimentalautoimmunethyroiditis,.freela公司；完全弗氏佐剂与不完全弗氏佐剂购自北京鼎国生物技术有限责任公司；兔抗鼠TRAIL多克隆抗体购自SantaCruz公司；免疫组化ABC试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司；DAB购自武汉博士德公司；APES（3氨丙基三乙氧硅烷）处理的切片购自西安宝信生物工程有限公司；雌性SD大鼠由第四军医大学实验动物中心提供.1.2方法雌性SD大鼠18只，5～6g/L的溶液)［3］喂养，并甲

6、状腺球蛋白（pTG）生理盐水溶至1g/L与完全弗氏佐剂按V/V=1∶1混合，于实验第15日以每只鼠100μg乳化的pTG皮内多点注射行初次免疫，pTG与不完全弗氏佐剂按V/V=1∶1混合后于实验第29日加强免疫，以后每周加强免疫1次，共4次，至第4次加强免疫后1o.将大鼠用乙醚麻醉，取血后，取新鲜甲状腺组织，行冰冻切片，厚约5～6μm，贴于事先用APES（3氨丙基三乙氧硅烷）处理的切片上，其中正常对照组切片19张，EAT对照组切片25张，EAT高碘组切片30张，37℃烤箱24h.ABC技术进行免疫组织化学染色.按免疫组化ABC试剂

7、盒说明书所示步骤染色.兔抗鼠TRAIL多克隆抗体工作浓度为1∶400，免疫阳性产物为棕黄色，以正常兔血清及PBS替代一抗染色，作为阴性对照.密封片号情况下(单盲)，在光学显微镜下对切片染色阳性情况进行半定量评估.观察全片，如无阳性细胞表达，用“”表示，如阳性细胞表达率＜10%，用“＋”表示，阳性细胞表达率在11%~50%之间，用“”表示，如阳性细胞表达率＞51%用“”表示［5］.求出每组中“＋”~“”标本所占总例数的百分比为该组标本阳性率，测定各组之间阳性率的差异.统计学处理：采用SPSS11.0统计软件，对各组阳性率进行多个样本

8、率比较的χ2分割法检验，P0.0125表示有统计学意义.2结果2.1甲状腺组织形态的观察显微镜下观察,正常对照组甲状腺组织的甲状腺滤泡呈小叶状排列,滤泡发育成熟,滤泡腔充满胶质,分布均匀,未见炎细胞浸润（图1）.EAT组中大鼠甲状腺与正常对照组比较