异常黑胆质成熟剂总黄酮和总酚的含量测定论文

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1、异常黑胆质成熟剂总黄酮和总酚的含量测定论文木拉提·克扎衣别克阿不都热依木·玉苏甫哈木拉提·吾甫尔【摘要】目的检测异常黑胆质成熟剂中总黄酮和总酚的含量。方法以芦丁为对照品,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH比色法测定了总黄酮含量;以没食子酸为对照品,采用Folin-Ciocalteu比色法测定了总酚含量。结果芦丁浓度在0.011~0.130mg/ml范围内线性关系良好,最低检测限为0.06μg/ml,最低定量限为0.18μg/ml。该方法加样回收率为95.1%~97.5%,精密度为1.34%,水提物和醇提物中总黄酮含量分别为16.2mg/g和19.0mg/g。没食子

2、酸浓度在1.1~7.7μg/ml范围内线性关系良好,最低检测限为0.01μg/ml.freell。该方法加样回收率为99.5%~104.8%,精密度为3.39%,水提物和醇提物中总酚含量分别为38.28mg/g和21.54mg/g。结论此两种方法灵敏、准确性强,精密度高,重复性好,分别可以用作异常黑胆质成熟剂中总黄酮和总酚含量的测定。【关键词】异常黑胆质成熟剂总黄酮总酚含量测定异常黑胆质成熟剂是维吾尔医常用复方制剂,由破布木CordiadichotomaForst.,红枣ZiziphusjujubaMill.,甘草GlycyrrhizauralensisFisch.,牛舌

3、草AnchusaitalicaRetz.,小茴香FoeniculumvulgareMill.,地锦草Euphorbiahumifusaunziq)。与芦丁溶液显色之后的吸收光谱图(Rutin,以1号溶液为空白,对2号溶液进行波长扫描)绘制在同一坐标上,得图3。由图3确定,在510nm处,对照品和样品有共同的最大吸收峰,因此,我们以510nm作为测定波长。对照品测定时,以1号溶液为空白,测定2号溶液的吸光度;供试品测定时,以5号溶液为空白,测定4号溶液的吸光度。2.1.5标准曲线的制备分别精密吸取对照品溶液0,0.3,0.5,1.0,2.0,3.0,3.5ml标准品溶液分别

4、置于10ml容量瓶中,接着向容量瓶中依次加入4.7,4.5,4.0,3.0,2.0,1.5ml蒸馏水,使各容量瓶中的溶液总体积均变成5ml,加入5%NaNO20.3ml,摇匀,放置6min;分别加入10%Al(NO3)30.3ml,摇匀,放置6min;再分别加入1mol/LNaOH溶液2ml,最后用蒸馏水分别稀释至刻度,摇匀。以第1瓶溶液作为空白参照,分别在分光光度计上测A510。结果见表3。表11号和2号溶液的组成ml(略)表23~5号溶液的组成ml(略)图1改进前后的吸光度动力学测量曲线比较(略)图2待测溶液的吸收光谱图(略)图3样品与芦丁溶液的吸收光谱图比较(略)表

5、3不同浓度芦丁的吸光度及LOD,LOQ值(略)实验结果表明,芦丁浓度在0.011~0.130mg/ml范围内线性关系良好。得回归方程:A=11.356C-0.008,相关系数r=0.9999。最低检测限为0.06μg/ml,最低定量限为0.18μg/ml。2.1.6加样回收率实验精密量取同一批已知浓度的样品溶液5份,每份1.0ml,分别加入芦丁标准品溶液0.2,0.4,0.7,1.0和1.5ml,分别按“2.1.5标准曲线的制备”项下方法显色后,以各自不含10%Al(NO3)3的溶液作为空白对照,进行含量测定,重复3次,并计算回收率。表4供试品溶液的加样回收率(略)结果表

6、明,该方法加样回收率为95.1%~97.5%。2.1.7精密度实验精密量取同一批已知浓度的样品溶液5份,每份1.0ml,分别按“2.1.5标准曲线的制备”项下方法显色后,以各自不含10%Al(NO3)3的溶液为空白对照,进行含量测定。结果见表5。结果表明,该方法加样回收率为95.1%~97.5%。表5供试品溶液的精密度(略)结果表明,该方法精密度小于2%。2.1.8异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物中总黄酮含量测定及重现性实验精密称取异常黑胆质成熟剂水提物和醇提物的干燥粉末各5份,每份约0.50g,制备25ml样品溶液共10份,每份按“2.1.5标准曲线的制备”项下方法显色,

7、以不含硝酸铝的样品溶液作空白,在510nm波长处测定供试品溶液的吸光度,按以下公式计算供试品中总黄酮的含量。样品中总黄酮含量(mg/g)=(C×10×25)/m其中C为10ml样品溶液中总黄酮浓度(mg/ml),m为供试品取样量(g)。实验结果表明,异常黑胆质成熟剂水提物中总黄酮含量为16.21mg/g,相对标准偏差为2.11%,而异常黑胆质成熟剂醇提物中总黄酮含量为19.04mg/g,相对标准偏差为3.14%,说明该测定方法重现性良好。见表6。2.2总酚含量的测定2.2.1Folin-Ciocalteu试剂的配制[8]称取8

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